説明
これは、野生型 T7 RNA ポリメラーゼから派生し、大腸菌で生成される、改変された T7 RNA ポリメラーゼ変異体 (低 dsRNA) です。キャップ類似体を効率的に組み込みながら二本鎖 RNA (dsRNA) の生成を大幅に削減し、野生型 T7 RNA ポリメラーゼに匹敵する非常に効率的な in vitro 転写 (IVT) を示します。T7 プロモーター配列 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') から二本鎖 DNA 上の RNA の 5'→3' 合成を触媒し、NTP を基質として使用します。
注: G* は RNA 転写の最初の塩基です。
特徴
- dsRNAレベルは約1/100000に低下
- Trilink CleanCap AG、LZCapと互換性あり
- WTに匹敵する高収量
- キャップ入力を下げる
- 動物由来原料不使用（AOF）
コンポーネント
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コンポーネント番号 |
名前 |
10629ES10 |
10629ES60 |
10629ES72 |
10629ES86 |
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（10 KU） |
（100 KU） |
（250 KU） |
（2,500 KU） |
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10629 |
CleaScrip™ T7 RNAポリメラーゼ（GMPグレード、低dsRNA、250 U/μL） |
40μL |
400μL |
1mL |
10mL |
仕様
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ソース |
組み換え T7 RNAポリメラーゼ遺伝子を持つ大腸菌 |
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最適温度 |
37℃ |
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ストレージ バッファ |
50 mM トリス-HCl、1 mM EDTA、10 mM DTT、100 mM NaCl、0.1% トリトンX-100、50% (v/v) グリセリン、25℃でpH7.9 |
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ユニットの定義 |
37℃、pH8.0で1時間以内に1nmolの[ 3H ]GMPを酸不溶性沈殿物に取り込むために必要な酵素量を1単位と定義する。 |
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推奨Mg2+ |
30mM酢酸マグネシウム |
QC標準
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項目 |
仕様/規格 |
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酵素 活動 |
250 - 300U/μL |
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タンパク質の純度 |
≥95% |
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エンドトキシン |
<20 EU/mg |
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プロテアーゼ |
ネガティブ |
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エキソヌクレアーゼ |
ネガティブ |
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ニッカセ |
ネガティブ |
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RNアーゼ |
ネガティブ |
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大腸菌宿主タンパク質 |
<50ppm |
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大腸菌宿主 DNA |
<10 fg/U |
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マイコプラズマ検査 |
ネガティブ |
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数字
図 2. マウス RAW264.7 細胞における IVT 産物の免疫原性の評価 (図 2A および 2B)。変異体によって生成された mRNA を導入した RAW264.7 細胞では、野生型と比較して IFN-β mRNA およびタンパク質レベルが低下しました。これは、野生型 T7 RNAP によって合成された mRNA が最も強力な免疫応答を引き起こし、変異体からの mRNA では応答が大幅に低下したことを示しています。
図 3. セルロース処理後、CleaScript™ T7 RNA ポリメラーゼで合成された mRNA の dsRNA 含有量は、野生型酵素で合成された mRNA の dsRNA 含有量よりも低くなります。
配送と保管
商品はドライアイスと一緒に発送され、-15℃～-25℃で1年間保管可能です。
出版物:
FADSと半合理的設計により改変されたT7 RNAポリメラーゼはdsRNAの産生を減少させ、末端転移酵素とRDRPの活性を低下させた。
文書
支払いとセキュリティ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
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