説明
LZCap GG (3'Acm) は cap1 類似体です。この産物は 5'GG3' の初期配列とともに転写に使用され、Cap1 転写キャッピングによって自然な cap1 構造が生成されます。
米国特許承認済み。
コンポーネント
カタログNo. |
名前 |
サイズ |
10686 |
LZCap GG (3'Acm) (50mM) |
100μL |
1mL |
製品詳細
分子式 |
C 35 H 48 N 16 O 25 P 4 (遊離酸) |
分子量 |
1216.19 (遊離酸) |
集中 |
50±3mM |
純度 |
HPLC ≥95% |
LZキャップ DNAテンプレート デザイン
LZCap GG(3'Acm) は 適切な のために GG 開始 シーケンス。 表示 の 形 以下、 SP6 プロモーター (下線部)に続いて GG配列によって 効果的に 開始する 転写。
プロトコル
1. コンポーネントを解凍する 実験に必要な 氷。
2. 追加 RNaseフリー水と NTPから 反応管。
3. 熱 LZCap GG(3'Acm) アリコート 15 分 60°Cで冷却 室温 のために 5 分
4. すぐに追加 LZCap GG(3'Acm)をチューブに通してボルテックスする 混ぜる。スピンする 簡単に 集める 液体。
5. 追加 10倍転写 バッファとボルテックス。
6. 追加 DNAテンプレートと SP6 酵素 ミックス。
7. 混ぜる 準備した 反応溶液、スピン 簡単に言えば、 孵化させる 37°Cの場合 2-3 時間。 トランスクリプトが 長さ は 未満 100nt、 増加 反応時間4-8 h.
成分 |
音量 (μL) |
最終濃度 |
RNアーゼ 無料の水 |
まで 20μL |
/ |
ATP(100mM) |
1 |
5mM |
UTP(100mM) |
1 |
5mM |
CTP(100mM) |
1 |
5ミリ |
GTP(100mM) |
0.2 |
1mM |
LZCap GG(3'Acm) (50ミリモル) |
1.6 |
4mM |
10×転写 バッファ |
2 |
1 × |
リニア DNA |
1μg |
50 ng/μL |
SP6 酵素 ミックス |
2 |
/ |
最終巻 |
20μL |
注記:
1) SP6 酵素 ミックス私たち 推奨 に 使用済み は メガスクリプト® キット(AM1330)。
2) LZCap GG(3'Acm)は、5つの'GG 3'開始配列を持つSP6プロモーター転写ベクターに適しています。 どれの 必要 ベクトルを構築するときに考慮する必要があります。
3) 試薬、 消耗品 そして コンテナ 使用済み で の 実験 は 無料 の RNアーゼ 汚染。
4) それは は 推奨 使用する 線形化された DNA の温度が転写に遅れています。
5) いつ 変更された ヌクレオチドは 使用済み で 場所 野生型の ヌクレオチド、 の ファイナル 集中 の の 反応は 変更なし。
6) 修正 N1-Me-pUTP できる なれ 使用済み で 場所 野生型の UTP。 修正された N1-Me-pUTP 減少する 免疫原性 の mRNA。 ヘノフコム できる また 提供する 変更された ヌクレオチド N1-Me-pUTP (猫。 いいえ。: HN1002)。
7) もし PCR 製品 は 使用済み として 転写 開始 DNA テンプレート、 の 額 の DNA テンプレート できる なれ 減少した による 半分。
ストレージ
この製品は-25~-15℃で2年間保存できます。
予防
- 安全と健康のため、この製品を操作するときは、実験着や使い捨て手袋などの個人用保護具 (PPE) を着用してください。
- 研究目的のみにご使用ください。
よくある質問
1. LZCap はどのように設計するのですか?
酵素は比較的「特異的」な基質認識を持っています。そのため、新しいキャップ構造を設計する際には、特許目的で新しい構造変更が必要ですが、他方では、天然/既知の構造との類似性を可能な限り維持するよう努めています。天然構造にはリボース 3' OH があり、これは変更可能です (例: メチル化)。この考慮に基づいて、特許の新規性のために 3' 位置に炭素を追加し、続いて OH の水素結合を模倣するために NH を追加し、次に NH の塩基性を減らして水素結合能力を高めるためにアセチル基を追加することを選択しました。LzCap の活性は、おそらく水素結合の増加により、メチル化された天然キャップよりも優れています。メチル基やメトキシ基と比較して、アセチルアミノ基は、基質 (キャップ) と開始因子 (酵素) 間のファンデルワールス相互作用も増加させる可能性があります。
2. アセチルアミノ基は安定していますか?
アセチルアミノ基はすでに十分に安定しています。キャップの最も不安定な部分である 7-メチル化位置とホスホジエステル結合よりもはるかに安定しています。
LZCap ライセンスの詳細についてはお問い合わせください。
支払いとセキュリティ
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問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。