ハイフェア™ AdvanceFast 1st Strand cDNA合成キット（染料なし）は、Hifair™に基づいて開発された高速逆転写キットです。 III 1st Strand cDNA 合成キット (染料なし) は、PCR 増幅および RT-qPCR 実験に適しています。Hifair™ III 1st Strand cDNA 合成キット (染料なし) と比較して、安定した検出率、特異性、および収量保証を誇り、逆転写の合計時間は 6 分未満に短縮される可能性があり、実験時間を大幅に短縮します。

キットには gDNA Digester Mix が含まれており、RNA テンプレートに残っているゲノム DNA の汚染を排除して、その後の結果の信頼性を高めることができます。キットには、ランダムプライマー N6 とオリゴ (dT) _{18 の}2 種類の cDNA 合成プライマーが用意されています。ユーザーは、必要に応じて、逆転写プライマーとしてランダムプライマー N6、オリゴ (dT) ₁₈ 、または遺伝子特異的プライマーを選択できます。合成された一本鎖 cDNA 製品は、その後の PCR または qPCR 反応に直接使用できます。

仕様

コンポーネント

ストレージ

この製品は-25～-15℃で保管してください。 1年。

説明書

1. 実験で残留ゲノムDNAの除去が必要な場合

1）gDNAの消化

RNaseフリーの遠心チューブに以下の混合物を調製し、軽くピペットでよく混ぜます。42℃で2分間インキュベートします。

※Total RNAの投入量は2μgを超えないことを推奨します。対象遺伝子の発現レベルが低い場合は、投入量を最大5μgのTotal RNAまで増やすことができます。

2）逆転写反応系の調製（20μL系）

* プライマーの量は、テンプレートの入力量に応じて調整できます。逆転写産物を qPCR 実験に使用する場合は、推奨量に応じてランダムプライマーをシステムに追加できます。

** 最初に 4× Hifair™AdvanceFast SuperMix (No Dye) を加えてよく混ぜ、次に逆転写プライマーを加えて、プライマーが gDNA Digester の影響を受けないようにすることをお勧めします。

3）逆転写手順の設定

* GC含有量の高いテンプレートや複雑なテンプレートの場合は、逆転写温度を60℃まで上げることができます。

** この製品は 14 kb 未満の cDNA 配列を合成できます。より長い cDNA 製品が必要な場合は、逆転写時間を適切に延長できます。

2. 実験でゲノムDNAの除去が必要ない場合

1）逆転写反応系の調製（20μL系）

※Total RNAの投入量は2μgを超えないことを推奨します。対象遺伝子の発現レベルが低い場合は、投入量を最大5μgのTotal RNAまで増やすことができます。

** プライマーの量は、テンプレートの入力量に応じて調整できます。逆転写産物を qPCR 実験に使用する場合は、推奨量に応じてランダムプライマーをシステムに追加できます。

2）逆転写手順の設定

* GC含有量の高いテンプレートや複雑なテンプレートの場合は、逆転写温度を60℃まで上げることができます。

** この製品は 14 kb 未満の cDNA 配列を合成できます。より長い cDNA 製品が必要な場合は、逆転写時間を適切に延長できます。

注記

1. すべての操作は氷上で実行し、RNase 汚染を避ける方法で実行する必要があります。
2. この製品は研究目的にのみご使用いただけます。
3. 安全のため、白衣と使い捨て手袋を着用して作業してください。

ドキュメント: