Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR は、Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA Digester Plus) の強化版です。逆転写とゲノム除去の両方の反応を 1 本のチューブ内で行うという要求を満たすように設計されています。さらに、反応プロセスを効率化し、反応時間を大幅に短縮し、逆転写産物の収量を増加させます。4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix には、逆転写反応に必要なすべての試薬が含まれています。反応中は、gDNA Remover Mix、テンプレート RNA、水を補充するだけで、cDNA の最初の鎖を効率的に合成し、同時にゲノム DNA の汚染を排除できます。この製品は、複雑な RNA テンプレートの逆転写に適しており、テンプレートの量が少なく、コピー数が少ない遺伝子の逆転写に非常に効果的です。

この製品によって生成される逆転写産物は、プローブベースおよび染料ベースの両方の qPCR 方法と完全に互換性があります。プローブベースの qPCR の場合、Hieff Unicon® Universal TaqMan マルチプレックス qPCR マスター ミックス (カタログ番号 11211) の使用をお勧めします。一方、染料ベースの qPCR の場合、高性能遺伝子発現解析には Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green マスター ミックス (カタログ番号 11184) をお勧めします。

ただし、この製品で生成される逆転写産物は、長い断片の増幅などの後続の用途には適していないことに注意してください。これらの目的で効率的な逆転写が必要な場合は、Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA 合成キット (カタログ番号 11149、カタログ番号 11150) の使用をお勧めします。

特徴

• 5分間のRT

• RTとgDNA消化を1本のチューブに統合

アプリケーション

• RT-qPCR
  
• アンチセンスRNA合成

仕様

コンポーネント

配送と保管

商品はドライアイスと一緒に発送され、-15℃～-25℃で12ヶ月間保管可能です。

使用方法

11151-A/B/C の成分を氷上で解凍し、各試薬成分を軽くかき混ぜてよく混ぜます。次に、RNase フリーのチューブに以下の成分を混ぜます。

表1: 反応の準備

*総RNA入力量は2μgを超えないようにすることをお勧めします。対象遺伝子の発現量が少ない場合は、総RNA入力を最大5μgまで増やすことができます。

表2: 反応プロトコル

*このプロセスには、逆転写と gDNA 消化の両方が含まれます。

逆転写産物は、qPCR 反応ですぐに使用するのに適していますが、短期間であれば -20°C で保存することもできます。長期間保存する場合は、凍結融解サイクルを複数回繰り返さないように、小分けにして -80°C で保存することをお勧めします。

予防：

1. すべての手順は、RNase 汚染を防ぐために細心の注意を払いながら氷上で実行する必要があります。

2. 実験着と使い捨て手袋を着用して、安全と健康を確保してください。

3. この製品は科学研究目的のみに使用することを意図しており、それ以外の目的で使用しないでください。