説明
CRISPR/Cas9 は、RNA 誘導 Cas ヌクレアーゼが標的遺伝子に特定の DNA 修飾を行う技術であり、細菌や古細菌がファージや外来プラスミドの攻撃に反応して進化させた獲得免疫防御機構です。このシステムでは、Cas9 ヌクレアーゼは人工的に最適化されたシングル ガイド RNA (sgRNA) によって誘導され、標的部位で二本鎖 DNA (dsDNA) を切断して DNA 切断を引き起こします。DNA は、生体内で非相同末端結合または相同性誘導修復機構によって修復され、遺伝子のフレームシフト変異、置換、または削除が起こります。
HifairTM Precision sgRNA 合成キットは、T7 RNA ポリメラーゼ混合物を使用して、spCas9 sgRNA を効率的に転写します。キットには、Cas9 タンパク質によって認識され、足場として機能する特定の配列が含まれています。配列の一部は、ユーザーが設計したターゲット固有の配列と部分的に重複できます。相補鎖は DNA ポリメラーゼによって埋められ、転写用の dsDNA テンプレートが生成されます。キットには付属の試薬とユーザーが設計した特定の DNA 配列を使用して、1 本のチューブ反応で 4 時間以内に 20 ~ 100 μgの機能的な sgRNA が得られます。
特徴
高い合成収率: 4 時間を超える単一チューブ反応で、sgRNA の収量は 20 - 100 μg に達します。
幅広い応用範囲: さまざまな種類の sgRNA で高い収量が得られます。
高純度:合成された sgRNA には単一のバンドがあります。
高い活性: 合成された sgRNA は Cas9 を効果的に誘導して標的 DNA を切断します。
アプリケーション
CRISPR/Cas遺伝子編集
コンポーネント
コンポーネント番号 |
名前 |
11355ES05 |
11355ES25 |
11355ES50 |
11355ES60 |
11355-A |
10×sgRNA酵素ミックス |
10μL |
50μL |
100μL |
200μL |
11355-B |
10×sgRNA反応バッファー |
10μL |
50μL |
100μL |
200μL |
11355-C |
カナス酵素ミックス×2 |
62.5μL |
312.5μL |
625μL |
1.25mL |
11355-D |
足場テンプレート |
6.25μL |
31.25μL |
62.5μL |
125μL |
11355-E |
NTP(各25 mM) |
40μL |
200μL |
400μL |
800μL |
11355-F |
コントロール sgRNAオリゴ( 10 μM ) |
2μL |
10μL |
20μL |
40μL |
配送と保管
この製品は-25〜-15℃で2年間保管する必要があります。
数字
形 1.異なる時点におけるsgRNAの合成量
図2異なる配列を持つsgRNAの合成収率
図3合成されたsgRNAの純度(Agilent 2100で測定)
図4 sgRNAの切断効率チャート
ドキュメント:
安全データシート
1 1355 _MSDS_ Ver.EN202 50120 .pdf
マニュアル
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。