説明
ウラシル特異的切除試薬 (USER と呼ばれる) は、ウラシル DNA グリコシラーゼ (UDG) とエンドヌクレアーゼ VIII (Endo VIII) からなる酵素カクテルです。これは、ウラシルの位置に特異的に 1 ヌクレオチドのギャップを生成することができます。UDG はウラシル塩基の切断を促進し、ホスホジエステル糖リン酸骨格の完全性を維持しながら AP 部位 (アプリン酸/アピリミジン酸部位) を形成します。Endo VIII のエンドヌクレアーゼ活性は、アプリン酸部位の3 '末端と 5 '末端の両方でホスホジエステル結合を切断し、塩基のないデオキシリボース糖を放出します。
特徴
ヌクレアーゼやRNaseは残留しない
高い切除効率
アプリケーション
RNA鎖特異的ライブラリ構築
ウラシル特異的切除介在クローニング（USER-LIC）
DNAアセンブリ、例えばTALEモノマーのアセンブリ
単一細胞からの複数のcDNAライブラリの連続構築
仕様
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集中 |
1U/µL |
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ユニットDの定義 |
1単位は、10 μL反応システムで 37°C で 15 分間、単一のウラシル塩基を含む 34 量体の二本鎖オリゴヌクレオチドを切断するために必要な酵素の量として定義され、これは 10 pmol の基質の切断に相当します。 |
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活性化条件 |
75 ℃ 、10 分 |
コンポーネント
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コンポーネント番号 |
名前 |
14537ES50 |
14537ES72 |
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14537-A |
ウラシル特異的切除試薬 （ 1U /μL） |
50μL |
250μL |
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14537-B |
10 × ウラシル特異的切除試薬反応バッファー |
1. 25mL |
1. 25mL |
配送と保管
製品は-2.5℃～-1.5℃で1年間保存してください。
数字
図1. 切除効果の比較
注: YeasenのUSER酵素とサプライヤーAの同等の製品を使用して、dUTPを含む2本鎖DNA 10 pmolを切り出しました。アガロースゲル電気泳動の結果、YeasenのUSER酵素の切り出し効果はサプライヤーAの酵素の切り出し効果と一致していることが示されました。
図2 USER-LICクローニングにおけるコロニー数の比較
注: Yeasen の USER 酵素とサプライヤー A の同等製品を使用して 600 bp の DNA 断片を連結してベクターを構築し、これを大腸菌に形質転換して培養しました。培養プレート上のコロニーの数を観察した結果、Yeasen の USER 酵素を使用した USER-LIC クローニング効率はサプライヤー A のものより優れていることがわかりました。
ドキュメント:
安全データシート
1 4537 _MSDS_ Ver.EN20241210 .pdf
マニュアル
支払いとセキュリティ
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問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
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