RNase HIIは、 ピロコッカス・アビッシ そして組み換え発現した 大腸菌由来。DNA-rN-DNA/DNA二重鎖を認識し、リボヌクレオチドがDNAに組み込まれる部位で切断します。しかし、一本鎖RNAに対する活性は非常に低く、dsDNAやssDNAには切断活性を示しません。RNase HIIは、5'末端から1つのリボヌクレオチド残基の部位で切断し、切断後に5'リン酸基と3'ヒドロキシル末端を生成します。このRNase HII酵素は70〜75℃で最適活性を示し、50℃から75℃の間で活性がありますが、室温では非常に低い活性です。製品は耐熱性が高く、95℃で45分間インキュベートした後でもほとんど活性が低下しません。さまざまなPCR反応システムに適合します。

仕様

コンポーネント

ストレージ

この製品は-25〜-15℃で2年間保存する必要があります。

製品アプリケーション

1. 高感度プローブを用いたLAMPによる検出。
2. RNase HII依存性PCR（rhPCR）。
3. ポリメラーゼ連鎖反応中に形成された不一致のリボヌクレオチドの除去。
4. 岡崎フラグメントのRNA部分の分解。

注記

1. この製品は研究目的にのみご使用いただけます。
2. 安全のため、白衣と使い捨て手袋を着用して作業してください。

数字

1. 大腸菌 ゲノムDNA残基 < 0.5コピー/100 U

RNase HII の異なるバッチで大腸菌ゲノム DNA 残留物を検出した結果、YEASEN の RNase HII の宿主ゲノム DNA 残留物は 0.5 コピー/100 U をはるかに下回っていることが示されました。

図4.大腸菌ゲノムDNA残留物の検出

2. 95℃耐熱試験

RNase HIIを95℃で0～45分間加熱した後、RNase HIIの酵素活性を試験しました。その結果、YEASENのRNase HIIは45分間加熱した後でも酵素活性がほとんど失われていないことがわかりました。

図5. 95°C耐熱試験

3. エキソヌクレアーゼ、切断酵素、RNase残留物なし（1単位投与）

RNase HII の異なるバッチ 1 U をそれぞれの基質 DNA/RNA とともに 37°C で 4 時間インキュベートし、アガロースゲル電気泳動の結果、RNase HII にはエキソヌクレアーゼ、切断酵素、または RNase 残留物がないことがわかりました。

図6. エキソヌクレアーゼ、切断酵素、RNase残基の検出

ドキュメント:

マニュアル