説明
Tth DNAポリメラーゼは好熱性細菌から発見された耐熱性DNAポリメラーゼである。 サーマス・サーモフィラスHB8この酵素は、Mg²⁺存在下では5′-3′ DNAポリメラーゼ活性および5′-3′ エキソヌクレアーゼ活性を示しますが、3′-5′ エキソヌクレアーゼ活性を欠いているため、PCR増幅反応に広く適用できます。Mn²⁺存在下では、酵素は55〜70°Cの温度で強力な逆転写酵素活性を示し、ワンステップRT-PCR反応に適しています。
仕様
ユニットの定義: 活性の 1 単位 (U) は、活性化されたサケ精子 DNA をテンプレート/プライマーとして使用し、74°C で 30 分以内に 10 nmol の総ヌクレオチドを酸不溶性生成物に組み込む酵素の量として定義されます。
成分
いいえ。 | 名前 | サイズ | |
14607ES72 (250ユニット) | 14607ES80 (1250 う) | ||
14607-A | Tth DNAポリメラーゼ(5 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
14607-B | 5×T番目のRT-PCR バッファ | 1mL | 4×1.25 ミリリットル |
14607-C | 10×T番目のPCR バッファ (Mg2+を含む) | 500 μL | 2×1.25 ミリリットル |
14607-D | 50mM マグネシウム(OAc)2 | 250 μL | 1.25 ミリリットル |
14607-E | dNTP混合物(各10 mM) | 150 μL | 750 μL |
配送 およびストレージ
配送ドライアイスで保管してください。 で -20°C、保存期間は2年です。
予防
1) 解凍時に緩衝液に少量の沈殿物が現れた場合、これは正常な現象です。使用前に転倒混和してよく混ぜてください。
2) 安全と健康のため、操作中は白衣と使い捨て手袋を着用してください。
3) この製品は研究目的にのみご使用ください。
説明書
推奨されるPCR反応手順:
1.反応システムの準備
名前 | 音量 (μL) |
10×T番目のPCR バッファ (Mg2+を含む) | 5 |
Tth DNAポリメラーゼ(5 U/μL) | 0.5 |
dNTP混合物(各10 mM) | 1 |
上流 入門 10μM | 2 |
下流 入門 10μM | 2 |
テンプレートDNA | 50 pg- 1μg |
ddH2お | に 50 |
[注記]: Tth DNA ポリメラーゼ、上流プライマーと下流プライマー、および dNTP 混合物の量は、特定の実験ニーズに応じて調整できます。
2. サイクルの設定
手順 | 温度(℃) | 時間 | サイクル |
前変性 | 94 | 30秒~5分 | 1 |
変性 | 94 | 30秒 |
35
|
アニーリング | 50-70 | 30秒 | |
拡大 | 72 | 60秒/KB | |
最終延長 | 72 | 10分 | 1 |
[注記]: 反応条件は、特定の実験要件に応じて調整できます。
推奨されるRT-PCR反応手順:
1. 反応系の準備
名前 | 音量 (μL) |
5×T番目のRT-PCR バッファ | 10 |
Tth DNAポリメラーゼ(5 U/μL) | 1.5 |
50mM マグネシウム(OAc)2 | 2.5 |
dNTP混合物(各10 mM) | 1.5 |
上流 入門 10μM | 2 |
下流 入門 10μM | 2 |
テンプレート RNA | 50 pg- 1μg |
ddH2O | に 50 |
[注記]: Tth DNA ポリメラーゼ、上流プライマーと下流プライマー、および dNTP 混合物の量は、特定の実験ニーズに応じて調整できます。
2.サイクル設定
手順 | 温度(℃) | 時間 | サイクル |
逆転写 | 55-70 | 30分 | 1 |
事前変性 | 94 | 30秒~5分 | 1 |
変性 | 94 | 30秒 |
35
|
アニーリング | 50-70 | 30秒 | |
拡大 | 72 | 60秒/KB | |
最終延長 | 72 | 10分 | 1 |
[注記]: 反応条件は、特定の実験要件に応じて調整できます。
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。