説明
AapCas12b ヌクレアーゼ (C2c1 とも呼ばれる) は、好熱性細菌Alicyclobacillus acidophilusに由来する、tracrRNA:crRNA (または sgRNA) によって媒介される DNA エンドヌクレアーゼです。標的の二本鎖 DNA (dsDNA) に PAM (TTN) 配列が存在する場合、標的の dsDNA を特異的に切断し、二本鎖切断を引き起こして粘着末端を生成します。AapCas12b は、PAM 配列とは関係なく、一本鎖 DNA 標的を特異的に切断できます。二本鎖および一本鎖 DNA 標的の両方が、AapCas12b のトランス切断活性を活性化できます。AapCas12b 酵素が sgRNA および標的 DNA と三元複合体を形成すると、非特異的 ssDNA トランス切断活性が活性化され、システム内の ssDNA の任意の配列を切断します。 AapCas12b の最適な切断反応温度は 60 ℃ であり、 AacCas12b よりも耐熱性が高く、等温増幅/CRISPR-Cas 検出システムを開発するための LAMP との使用に適しています。
特徴
広い反応温度範囲：37 ～ 65 ℃の温度範囲で分解活性を示す
ヌクレアーゼ残留が少ない: エキソヌクレアーゼ、ニッカーゼ、RNaseが残留していない
シス切断活性：in vitroでの二本鎖DNAの非常に効率的な切断
トランス切断活性：核酸検出に適した高いトランス切断活性
アプリケーション
CRISPR/Cas遺伝子編集
CRISPR/Casシステムに基づく診断と検出
等温核酸増幅技術（RPAおよびLAMP）などと組み合わせたその他の検出アプリケーション
仕様
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分子量 |
130KDa |
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集中 |
10μM |
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純度 |
>95% ( SDS-PAGE ) |
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ユニットの定義 |
1×反応緩衝液を含む総反応量20μLで、 60 ℃で1分以内に1 pmolのssDNAプローブを切断するために必要なCas12b酵素の量は1 Uと定義されます。 |
コンポーネント
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コンポーネント番号 |
名前 |
14808ES65 |
14808ES80 |
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14808-A |
AapCas12bヌクレアーゼ（ 10μM ） |
10 0μL |
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14808-B |
10 ×反応バッファー |
1mL |
1mL |
船のピンと保管
この製品は-25〜-15℃で2年間保管する必要があります。
数字
形 1. AapCas12bヌクレアーゼのシス切断活性の検証
注: PAM 配列を持つターゲット dsDNA、sgRNA、Cas12b、および 1 ×反応バッファーを含む20 μLの反応システムで、混合物を 60 o Cで30 分間インキュベートし、その後 85 o Cで5 分間不活性化しました。アガロース ゲル電気泳動の結果、3 バッチの AapCas12b ヌクレアーゼはすべて dsDNA を効果的に切断でき、切断効率は輸入ブランド T* に匹敵することが示されました。
図2 AapCas12bヌクレアーゼトランス切断活性試験結果
注: PAM 配列を持つターゲット dsDNA、sgRNA、Cas12b、レポート ssDNA 蛍光プローブ、および 1 ×反応バッファーを含む20 μLの反応システムで、混合物を 60 o Cで1 時間インキュベートし、30 秒ごとに蛍光シグナルを収集しました。結果は、ターゲット DNA、sgRNA、および Cas12b が共存すると、レポート ssDNA 蛍光プローブが切断され、蛍光シグナルが放出されることを示しました。
ドキュメント:
安全データシート
1 4 808 _MSDS_ Ver.EN202412 09 .pdf
マニュアル
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
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