Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR プローブ キット (UDG Plus) は、RNA をテンプレートとするマルチプレックス定量 PCR キットです。実験の過程では、逆転写と定量 PCR が同じチューブ内で実行されるため、実験操作が簡素化され、汚染のリスクが軽減されます。

このキットでは、耐熱性Hifair™逆転写酵素によって第一鎖cDNAが効率的に合成され、UNICON™ HotStart Taq DNAポリメラーゼによって定量的に増幅されます。キットには主に、最適化されたMPバッファー、酵素ミックスが含まれています。バッファー溶液にはすでにMg ²⁺とdNTPミックスが含まれています。さらに、非特異的PCR増幅を効果的に抑制し、複数のqPCR反応の増幅効率を向上させる因子が追加されているため、増幅効率を確保し、複数の増幅反応を実行できます。dUTP / UDGシステムが追加され、エアロゾル汚染のリスクを効果的に防止します。

特徴

特徴

1.優れた汎用性:病原微生物、ヒトゲノム、植物、その他の種の核酸のqPCR増幅および検出に適しています。

2. 高感度:慎重に最適化されたバッファー システムにより、最大 250 コピー/mL の低濃度テンプレートの検出感度が向上します。

3. dUP/UDG システム: dUTP/熱不安定性 UDG 汚染防止システムを導入し、製品のエアロゾル汚染を効率的に分解し、偽陽性を減らし、正確な結果を保証します。

4. 高速プログラムをサポート：40 分の高速プログラムと互換性があります。

5. 優れた安定性： 37℃で14日間安定、凍結融解を10回繰り返しても安定。

仕様

コンポーネント

注: 1) 5×Hifair™ MP Buffer は、Hifair™ Superior Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer の略称で、dNTP、dUTP、Mg ²⁺ 、安定剤などが含まれています。

2) Hifair™酵素ミックスには、主にHifair™逆転写酵素、UNICON™ HotStart Taq DNA ポリメラーゼ、RNase 阻害剤、 UDGase などが含まれています。

ストレージ

製品は-25℃～-15℃で1年間保存してください。凍結と解凍を繰り返すことは避けてください。

説明書

1.反応組成:

注意：使用前に必ずよく混ぜ、激しい振動による過度の泡立ちを避けてください。

a ) プライマー濃度:プライマー マルチプレックスプライマーを含むミックスの場合、状況に応じて最適なプライマー濃度は 0.1 ～ 1.0 μM になります。

b ) プローブ濃度: 異なる蛍光基を標識したマルチプレックスプローブを含むプローブミックス。状況に応じて、最適なプローブ濃度は 0.05 ～ 0.5 μM になります。

c ) テンプレートの希釈: qPCR は非常に感度が高いため、テンプレートを希釈することをお勧めします。コントロール Ct 値は 20 ～ 35 が適切です。

d)システムの準備: フィルターエレメント付きのヘッドを外します。相互汚染とエアロゾル汚染を避けてください。

2.最適化されたサイクリングプロトコル

（１）標準的な増幅手順

注記：

a) 逆転写：温度は50 ℃または5 ℃ 、 10～15分を選択できます。

b) 増幅反応：設計されたプライマーのTm値に応じて温度を調整します。

c) 蛍光信号の取得:機器の要件に応じて実験手順を設定してください。 マニュアル。

（２）迅速な増幅プログラム

注意：実際のqPCR検出器が急速増幅をサポートしているかどうかは、事前テストを実行して確認してください。

3. アプリケーション機器

ABI 5700、7000、7300、7700、7900HT Fast、StepOne™、StepOne Plus™ 、 ABI 7500、7500 Fast、ViiA™7、QuantStudio™ 3 および 5、QuantStudio™ 6、7、12k Flex ；

ストラタジェンMX3000P™、MX3005P™、MX4000P™ ；

Bio-Rad CFX96™、CFX384™、iCycler iQ™、iQ™5、MyiQ™、MiniOpticon™、Opticon®、Opticon® 2、Chromo4™ ；

Eppendorf Mastercycler® ep realplex、realplex 2 s;

キアゲンコルベット ロータージーン® Q、ロータージーン® 3000、ロータージーン® 6000 ；

ロシュ・アプライド・サイエンス ライトサイクラー® 480、ライトサイクラー® 2.0、ライトサイクラー® 96 ；

サーモサイエンティフィックピコリアル サイクラー; Cepheid SmartCycle® ;イルミナエコqPCR; SLAN96S 、96P。

注記

健康と安全を確保するために、白衣や手袋などの必要な個人用保護具を着用してください。

実験にはRNaseフリーの消耗品を使用してください。

この製品は研究用途にのみご使用ください。