説明
ポリアクリルアミドゲル（PAGEゲル）は、タンパク質の分離を実現するためにタンパク質電気泳動によく使用されます。この種類のゲルは、通常、濃縮ゲルと分離ゲルで構成されています。前者はタンパク質サンプルを濃縮する役割を果たし、後者はゲル内で使用されるアクリルアミドモノマーとN,N-メチレンビスアクリルアミド（メチレンアクリルアミド）架橋剤の濃度に応じて、異なるサイズのタンパク質を分離します。
このキットには、PAGE ゲルを迅速に調製するために必要なさまざまな試薬が含まれています。ユーザーは、ゲルを調製するために独自のゲル調製装置を準備するだけでよいため、ゲル調製プロセスが大幅に簡素化されます。このキットで調製したゲルは、変性 PAGE ゲル電気泳動にのみ使用できます。この仕様では、約 125 個のミニゲル (0.75 mm 厚のゲルで計算) を調製できます。
仕様
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SDS-PAGE濃縮ゲル濃度 |
4.2% |
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SDS-PAGE分離ゲル濃縮 |
10 % |
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分離範囲（kDa） |
20-80 |
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ゲルシステム |
トリスグリシン |
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SDS-PAGE濃縮ゲル濃度 |
4.2% |
コンポーネント
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コンポーネント番号 |
名前 |
2032 5 ES62 （ミニジェル125個） |
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20325-A |
10% - 分離ゲルバッファー |
250mL |
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20325-B |
10% - 分離ゲル溶液 |
250mL |
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20325-C |
10% - カラー濃縮ゲルバッファー |
80mL |
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20325-D |
10% - 濃縮ゲル溶液 |
80mL |
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20325-E |
ジェルカップを準備する |
3 |
配送と保管
商品は保冷剤と一緒に発送され、2 ℃ ～8 ℃で1年間保存できます。
説明書： 上部溶液の追加が遅れるのを避けるために、一度にゲルをあまり多く設定しないことをお勧めします（最大で2〜3個が推奨されます）。
1.標的タンパク質の分子量に応じて適切なゲル濃度を選択する（表1参照）
2.ゲル製造工程（0.75/1.0/1.5 mmのミニゲルを例に挙げます）
2.1 分離ゲル緩衝液と分離ゲル溶液を等量取り、混合します。つまり、2 つの溶液をそれぞれ 2.0/2.7/ 4.0 mL 取ります。
2.2 過硫酸アンモニウム 0.1 g を量り取り、脱イオン水 1 mL に溶かします。過硫酸アンモニウムはお客様ご自身で購入していただく必要があります。
2.3 ステップ 1 の混合溶液に 35/45/70 μL の APS を加え (固化が速すぎる場合は、使用する APS の量を半分に減らすことができます)、完全に混合します。
2.4 ステップ2の溶液をゲル製造用ガラス板に注入します。分離ゲルを添加してから2分以内に濃縮ゲルをゲル型に注入し、濃縮ゲルと分離ゲルが混ざらないように濃縮ゲルの注入はゆっくりと行う必要があります。設定が難しい場合は、エタノールで密封してから濃縮ゲルを設定することもできます。
2.5 濃縮ゲルの調製：濃縮ゲル緩衝液と濃縮ゲル溶液を等量、すなわちそれぞれ 0.5/0.75/1.0 mL ずつ採取し、その後 10/13/18 μL の APS を加えてよく混ぜます。
2.6 ゲル製造用ガラス板に注入し、櫛歯を挿入します（櫛歯を優しく挿入するため、過度の力を加えないでください）。
2.7 濃縮ゲルを 15 分間固めた後、コームの歯を取り外して電気泳動に使用できます。注意: 新しく調製した電気泳動バッファーを使用するようにしてください。
注記
1. 電気泳動中の電圧は 100 ～ 120 V にすることをお勧めします。電気泳動速度を加速する必要がある場合は、150 V まで上げることができます。
2. ゲルを充填する前に、ゲル溶液を室温とバランスさせて（たとえば、数分間そのままにして）、ゲル内の気泡の形成を効果的に回避します。
3. 過硫酸アンモニウムはお客様ご自身でご購入いただく必要があります。Sigma の Cat#A3678 の製品の使用をお勧めします。
4. 過硫酸アンモニウム溶液の量は参考値であり、実際の量は個人の実験習慣や経験に応じて増減できます。過硫酸アンモニウムをさらに追加するとゲル速度が速まり、その逆も同様です。PAGEゲルの凝固速度は、温度と過硫酸アンモニウムの量に密接に関係しています。
5. 本製品には適量のTEMED代替物が添加されています。ゲル化速度をさらに加速する必要がある場合は、分注前に必要に応じて適量のTEMEDを添加することができます。
6. ゲルの凝固と温度の間には有意な正の相関関係があり、同じ条件下では温度が高いほど凝固速度が速くなります。
7. カラー濃縮ジェルは保管中に少量の沈殿物が生じる場合がありますが、これは正常な現象です。安心してご使用ください。
8. APSは-20 ℃で保管されていましたが、開封して使用中のAPSは便宜上4 ℃で保管できます。
9. 健康と安全を確保するために、白衣や手袋などの必要な個人用保護具を着用してください。
10. 研究目的のみに使用してください。
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SDS-PAGEゲル濃度 |
分離範囲（kDa） |
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8% |
30-200 |
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10% |
20-80 |
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12.5% |
15-60 |
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15% |
10-45 |
ドキュメント:
安全データシート
マニュアル
引用と参考文献:
[1] Su G、Wang W、Zhao X、et al. エンハンサー構造依存性の多層転写制御がRAシグナル誘導によるES細胞の早期系統分化を調整する。Nucleic Acids Res. 2021;49(20):11575-11595. doi:10.1093/nar/gkab1001(IF:16.971)
[ 2 ] Li M、Niu Y、Tian L、et al。アストラガロシドIVはSTING/NF-κB経路を介してマウスのマクロファージ老化とd-ガラクトース誘発性骨量減少を軽減する。Int Immunopharmacol。2024;129:111588。doi:10.1016/j.intimp.2024.111588(IF:5.6)
[ 3 ] Song M、Qian C、Zhang T、et al。Salvia mitiorrhiza Bunge水性抽出物は、Cox2/PGE2カスケードの調節を介して大腸癌における腫瘍関連マクロファージの浸潤を減弱し、抗PD-L1免疫療法を増強する。J Ethnopharmacol。2023;316:116735。doi：10.1016/j.jep.2023.116735（IF：5.4）
[ 4 ] Zang C, Liu H, Ju C, et al. Gardenia jasminoides J. Ellis抽出物は神経炎症を抑制してオリゴデンドロサイト前駆細胞の分化を促進し、白質損傷を軽減した。Food Funct. 2022;13(4):2131-2141. 2022年2月21日発行。doi:10.1039/d1fo02127c(IF:5.396)
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