説明
SUMOプロテアーゼは、100アミノ酸からなる完全なSUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)標識タンパク質を認識し、融合タンパク質からSUMOを効率的に切断します。EKやTEVの認識部位と比較して、SUMOプロテアーゼは認識配列が長いため特異性が高く、温度(4〜30℃)、pH(5.5〜9.5)などの幅広い反応環境系で高い活性を維持します。SUMOプロテアーゼには重合His標識もあり、SUMOプロテアーゼを除去してアフィニティークロマトグラフィーで標的タンパク質を精製するのに便利です。
仕様
カタログ番号 |
20410ES60 / 20410ES70 / 20410ES80 |
サイズ |
100単位 / 500単位 / 1000単位 |
酵素活性 |
1U/μL |
ユニットの定義 |
1×rTEV緩衝液(50 mMトリス、pH 8.0、0.1 mM EDTA、1 mM DTT)中の3μg基質の85%以上を30℃で1時間切断するために必要な酵素量を活性単位として定義した。 |
ソース |
大腸菌で発現 |
ラベル |
彼のラベルを重合した |
タンパク質の純度 |
> 90% |
分子量 |
26.55kDa |
ストレージ バッファ |
25 mM トリス-HCl、pH 8.0、0.1 % イゲパル(NP-40) 、 250 mM NaCl 、 500 μM DTT 、 50% グリセリン |
コンポーネント
注意:酵素活性の定義には、10×Protease Buffer (-salt) を使用しています。SUMO Protease は、10×Protease Buffer (-salt) で比較的高い活性を示しますが、不安定な基質の場合は、10×Protease Buffer (+salt) を選択する必要があります。+salt を含む反応バッファー 20410-B2 も提供しています。実験に適したバッファーを選択してください。20410-B2 : 500 mM Tris-HCl、pH 8.0、2 % Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT ; 20410-B1 : 500 mM Tris-HCl、pH 8.0、2 % Igepal (NP-40)、10 mM DTT。 |
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ストレージ
この製品は-85〜-65℃で1年間保存する必要があります。
説明書
- EP チューブでは次の反応システムが構築されます。
- 30℃でインキュベートし、1、2、4、6時間後に上記反応溶液をそれぞれ20μLずつ別のEPチューブに吸い出します。
- 2×SDSローディングバッファー20μLをEPチューブに加え、-20℃に置きます。
- すべてのサンプルの反応が完了したら、サンプルを 5 分間煮沸し、30 μL を SDS-PAGE 分析用に採取します。最適な応答時間を決定します。
コンポーネント |
容量(μL)(反応系は同様にスケールダウン可能) |
融合タンパク質 |
50μg |
10×プロテアーゼバッファー |
20μL |
SUMOプロテアーゼ(1U/μL) |
10μL |
ddH2O |
200μLまで |
注意:融合タンパク質に低温処理が必要な場合は、反応溶液を4℃に置いて反応時間を延長し、SUMO酵素の量を増やして酵素消化の効果を確保することができます。
表1. 異なる温度におけるSUMOプロテアーゼ消化活性
潜伏時間(時間) |
異なる温度での消化活性(%) |
|||
4℃ |
16℃ |
25 ℃ |
30℃ |
|
0.5 |
48 |
73 |
83 |
88 |
1 |
60 |
87 |
90 |
93 |
2 |
71 |
94 |
94 |
95 |
3 |
74 |
95 |
95 |
95 |
注記
1. 健康と安全を確保するために、白衣や手袋などの必要な個人用保護具を着用してください。
2. この製品は研究目的にのみご使用ください。
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。