説明
フィブロネクチン (FN) は、体液中では可溶性、細胞外マトリックス中では不溶性で存在する細胞外糖タンパク質です。主要な細胞接着分子の 1 つとして、FN は胚形成、創傷治癒、止血、血栓症など、多くの重要な生理学的プロセスで重要な役割を果たします。フィブロネクチンの発現、分解、結合の変化は、癌や線維症など、多数の病理学的発生と密接に関連しています。
フィブロネクチン(FN)の用途:
1)細胞培養マトリックスとして、細胞の成長を促進し、細胞接着率を高め、細胞代謝レベルを高め、細胞成長時間を短縮し、ハイブリドーマ技術における細胞融合率を高めるなどの機能があります。
2) 病気の診断と治療。その機能は、傷の修復と治癒、癌の診断と治療、血管系と心血管および脳血管疾患の治療などです。
本製品は、イネ胚乳細胞由来の組換えヒトフィブロネクチンであり、単量体として存在し、マトリゲル、ラットテールコラーゲン、血液由来フィブロネクチンなどの代替として細胞培養マトリックスとして使用でき、細胞接着率を高め、細胞代謝レベルを高め、細胞増殖周期を短縮します。また、培養培地に直接添加して、血清の使用量を置き換えたり減らしたり、細胞の接着、移動、移動成長を促進し、細胞の状態を維持したりすることもできます。
この製品は細胞培養グレードの凍結乾燥粉末であり、バッチ間の差異が小さく、ウイルス感染の潜在的なリスクがないという特徴があります。
製品特性
CAS番号 |
86088-83-7 |
ソース |
米 |
分子量 |
200〜210kDa |
外見 |
滅菌濾過された白色の凍結乾燥(フリーズドライ)粉末。 |
純度 |
SDS-PAGEによる95%以上 |
pH |
6.0〜8.0 |
生物活性 |
B16-F1 マウス黒色腫細胞を用いた細胞接着アッセイで決定された ED50 は 1.1 μg/mL 未満であり、これは 1.17 X 10 7 IU/mg を超える比活性に相当します。 |
エンドトキシン |
< 0.5 EU/μg |
配送と保管
この製品は-25〜-15℃で3年間保存する必要があります。
再構成
組換えヒトフィブロネクチン(rFN)を1×PBSに溶解し、濃度1mg/mLの保存溶液を調製します。繰り返しの凍結融解を避けるため、1回分ずつ小分けにして-20℃で保存してください。有効期間は3~6か月です。
使用方法
1. コーティング実験(6ウェルプレートを例にとり、他の培養プレートについては表1を参照)
1.1 適量の組換えヒトフィブロネクチン(rFN)を取り出し、滅菌1×PBS、pH 7.2〜7.4で作業溶液濃度に希釈します。最終濃度の参照範囲は50〜100μg/mLです。混合後、6ウェルプレートに800μL/ウェルずつ加え、作業溶液が6ウェルプレートの底を完全に覆うようにします。
1.2 rFNワーキング溶液が入った6ウェルプレートを4℃で一晩、または37℃で1時間コーティングします。
1.3 6ウェルプレートに作業溶液を採取し、4℃で保存します。1週間以内に他の培養ボトル/プレートのコーティングに使用できます。
1.4 rFN でコーティングされた 6 ウェル プレートを取り出し、通常の細胞培養培地を加え、細胞を直接接種します。rFN は細胞の接着と成長を促進します。
1.5 コーティングした6ウェルプレートをしばらく使用しない場合は、密閉容器に入れて4℃で保管してください。1週間以内に使用することをお勧めします。
表1. 培養ボトル/プレートごとの推奨rFN添加量
細胞培養皿/プレート |
底面積(cm 2 ) |
推奨用量 |
96ウェルプレート |
0.32 |
50μL/ウェル |
24ウェルプレート |
2 |
200μL/ウェル |
12ウェルプレート |
4.5 |
400μL/ウェル |
6ウェルプレート |
9.6 |
800μL/ウェル |
35mm皿 |
8 |
600μL/ウェル |
60mm皿 |
21 |
1.6mL/皿 |
T-25ボトル |
25-28 |
2mL/ボトル |
コーティング/プレーティング実験では、以下の表 1 に示すように、培養皿/ボトルのサイズに応じて、追加する組換えヒトフィブロネクチン (rFN) 作業溶液の量を調整する必要があります。
2.細胞培養実験
細胞培養中に、rFN を細胞培養培地に直接添加すると、細胞の接着、移動を促進し、細胞の状態を維持できます。最終濃度の基準範囲は 5~50 μg/mL です。
注記
1. この製品は研究目的にのみご使用いただけます。
2.安全のため、白衣と使い捨て手袋を着用して作業してください。
注意
1.凍結融解の繰り返しを避けてください。
2.安全と健康のため、操作時には白衣と使い捨て手袋を着用してください。
3. 研究目的のみにご使用ください。
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。