説明
細胞がアポトーシスを起こすと、ヌクレオソーム間のゲノム DNA を切断するエンドヌクレアーゼ酵素が活性化されます。アポトーシス中の DNA を抽出した後、電気泳動によって 180～200 bp の DNA ラダーを検出できます。
TUNEL (TdT 媒介 dUTP ニック エンド ラベリング) 細胞アポトーシス アッセイ キット (FITC) は、アポトーシス後期の組織細胞における核 DNA の切断を検出するために使用できます。原理は、末端デオキシヌクレオチド トランスフェラーゼ (TdT) の作用による DNA 切断時に露出したゲノム DNA の 3'-ヒドロキシル (3'-OH) 末端に FITC-12-dUTP が挿入されるというものです。これは蛍光顕微鏡またはフローサイトメトリーで検出できます。
このキットは、3'-OH 末端でのヌクレオチドの組み込みに最適な比率で FITC-12-dUTP と非標識 dNTP を使用して標識反応を最適化し、同じ切断された DNA 断片の末端の「標識テール」を長くします。「標識テール」は、隣接する dNTP 上の標識基の立体障害を軽減し、各切断断片上の蛍光基の数を増やし、隣接する蛍光基によって引き起こされる可能性のある凝集と消光を軽減します。これにより、検出感度が向上し、非特異的反応が減少します。
このキットは幅広い用途に使用できます。凍結切片やパラフィン切片、培養接着細胞や浮遊細胞でのアポトーシスの検出に使用できます。
特徴
- このキットの試薬は使いやすいように液体の形で提供されます。
- このキットは、フローサイトメトリー、検出用蛍光顕微鏡など、さまざまな目的に使用できます。
- 蛍光顕微鏡で見ると、色の区別は明らかです。
アプリケーション
- このキットはフローサイトメトリーや蛍光顕微鏡検査に使用できます。
- このキットは細胞の初期アポトーシスを検出することができます。
- このキットは、後期アポトーシス細胞と壊死細胞を区別できます。
仕様
| 応用 | このキットの検証済みの用途は、フローサイトメトリーまたは免疫蛍光細胞診によるアポトーシス細胞の検出でした。 |
| 梱包形態 | ボトル |
コンポーネント
| 成分 | 名前 | 40306ES20 (20T) | 40306ES50 (50T) | 40306ES60 (100T) |
| 40306-A | 5×平衡バッファー | 750μL | 1.25mL×2 | 1.25mL×3 |
| 40306-B | FITC-12-dUTP ラベリングミックス | 100μL | 250μL | 250μL×2 |
| 40306-C | 組み換えTdT酵素 | 20μL | 50μL | 50μL×2 |
| 40306-D | プロテイナーゼK（2mg/mL） | 40μL | 100μL | 100μL×2 |
| 40306-E | DNase I (1 U/μL) | 5μL | 12.5μL | 25μL |
| 40306-F | 10 × DNase I バッファー | 100μL | 250μL | 500μL |
配送と保管
商品はドライアイスと一緒に発送され、-15℃～-25℃で1年間保存可能です。
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