Hieff Trans™ リポソームトランスフェクション試薬に関するよくある質問

（１）Q：核酸トランスフェクション試薬複合体を調製する際に血清を存在させることはできますか？

A: 血清の存在はリポソームの形成に影響します。核酸トランスフェクション試薬複合体を調製する場合は、無血清培地（通常は MEM 培地）を使用することをお勧めします。

（２）Q：トランスフェクション試薬は凍結できますか？

A: いいえ。この試薬は 2 ～ 8 ℃ で保存する必要があり、キャップを長期間繰り返し開けないように注意してください。キャップを長期間開けるとリポソームが酸化され、トランスフェクション効率に影響します。

（3）Q：Hieff Trans™リポソーム核酸トランスフェクション試薬を使用する際に注意すべきことは何ですか？

A: 1) トランスフェクション操作中、細胞集密度が 80% ～ 95% に達することが望ましく、具体的な播種密度は細胞の状況に応じて決定されます。

2) 高純度 DNA を使用すると、より高いトランスフェクション効率が得られます。

3) トランスフェクション複合体を調製する際には、DNA およびトランスフェクション試薬を無血清培地で希釈する必要があります。

4) トランスフェクション中に培地に抗生物質を添加することはできません。

5) 最大のトランスフェクション効率を得るために、初回使用時にDNA濃度とカチオンリポソーム試薬の量を最適化する必要があります。DNAとトランスフェクション試薬の比率は 一般的には1:2～1:3が推奨されます。

（４）Q：トランスフェクション後に停止させる必要がありますか？

A: 必要ありません。リポソーム複合体は 6 時間安定しています。トランスフェクション前に細胞培地を交換していない場合は、正常な細胞成長に必要な栄養素を確保するために、4 ～ 6 時間後に新しい培地に変更する必要があります。ただし、トランスフェクション前に培地を変更した場合は、リポソームトランスフェクション後に培地を変更する必要はありません。

（５）Q：トランスフェクション効率を向上させたい場合、どのような点に注意すればよいでしょうか？

A: a: トランスフェクション時の細胞密度は 90%～95% です。

b: トランスフェクション中は、核酸およびリポソームの希釈に MEM 無血清培地を使用します。

c: トランスフェクション後4〜6時間で培地を交換できます。

（6）Q：DNAとsiRNAの同時トランスフェクションは可能ですか？効果はどうですか？

A: 同時トランスフェクションは可能ですが、別々にトランスフェクションを行うことが推奨され、DNAトランスフェクションはsiRNAの6時間後に行う必要があります。一緒に操作すると、siRNAトランスフェクション効率が悪くなります。

（７）Q：トランスフェクション試薬はレンチウイルスパッケージングトランスフェクションに使用できますか？

A: レンチウイルスのパッケージングは​​可能ですが、レンチウイルスのパッケージングの効率は必ずしもトランスフェクションの効率に関係しているわけではなく、パッケージングプラスミドの選択とプラスミド間の比率にも関係しています。

（8）Q：Hieff Trans™リポソーム核酸トランスフェクション試薬は懸濁細胞のトランスフェクションに使用できますか？

A: Hieff Trans™ リポソーム核酸トランスフェクション試薬は、浮遊細胞トランスフェクションに使用できます。詳細についてはプロトコルを参照してください。さらに、浮遊細胞専用のトランスフェクション試薬も発売しています (カタログ番号 40805、浮遊細胞用リポソーム核酸トランスフェクション試薬)。

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