説明
Hieff Trans™ in vitro siRNA/miRNAトランスフェクション試薬は、哺乳類細胞へのsiRNAのトランスフェクション用に開発されたPEIカチオン性両親媒性トランスフェクション試薬です。siRNAおよびmiRNAのトランスフェクションに適しています。このトランスフェクション試薬は、siRNAまたはmiRNAをカプセル化してカチオン複合体を形成し、細胞表面の負に帯電したプロテオグリカンと相互作用して細胞表面に吸着し、エンドサイトーシスによって細胞内に入り、封入体を形成します。トランスフェクション試薬はプロトンスポンジとして機能し、リソソーム内のH +を吸収し、プロトンの継続的な流入によって複合体が膨張して破裂し、外因性のsiRNAまたはmiRNAが細胞質に放出されます。
この製品は、幅広い細胞株で 1 nM siRNA の 90% を超える発現効率を達成し、オフターゲット効果を回避できます。Hela、MCF-7、HepG2、CHO などの接着細胞を含むさまざまな細胞のトランスフェクションに適しており、トランスフェクションが難しい K562 または THP-1 細胞などの懸濁細胞株でも 80% のサイレンシング効率を達成できます。一部の初代細胞、初代ヒト線維芽細胞、初代ヒト肝細胞などを含め、80% のサイレンシング効率を達成できます。
特徴
- 低毒性: トランスフェクトされた細胞は依然として良好な活性を維持します。
- 幅広い適応性:通常の細胞やトランスフェクションが難しい初代細胞も完全にカバーします。
応用
- 細胞トランスフェクション
仕様
物理的および化学的性質 | 情報 |
形状 | 液体 |
血清適合性 | はい |
細胞の種類 | 樹立細胞株 |
サンプルタイプ | siRNA/miRNA |
トランスフェクション技術 | PEIベースのトランスフェクション |
コンポーネント
コンポーネント番号 | 名前 | 40806ES01 | 40821ES02 | 40821ES03 |
40806 | Hieff Trans™ in vitro siRNA/miRNAトランスフェクション試薬 | 0.1mL | 0.5mL | 1mL |
ストレージ
製品は2~8℃で1年間保存してください。冷凍しないでください。
数字
- トランスフェクション効果の実証
図 1. Hieff Trans™ in vitro siRNA/miRNA トランスフェクション試薬のトランスフェクション効率を上に示します。
(1)Q:DNAトランスフェクションとsiRNAトランスフェクションの違いは何ですか?
A: 1. siRNA は 20 塩基対しかないため、数千または 10,000 塩基対を超える DNA よりもはるかに小さくなります。
2. DNA のトランスフェクションに使用されるトランスフェクション試薬および方法は、siRNA のトランスフェクションには適していません。
3. siRNA トランスフェクションでは、DNA トランスフェクションよりもトランスフェクション試薬の細胞毒性に対する要件が厳しくなります。
(2)Q:トランスフェクション後にトランスフェクション試薬を交換する必要がありますか?
A: 媒体の変更については、2 つの状況を区別できます。
1. トランスフェクション前に培地を交換しない場合は、細胞の成長に必要な栄養素を確保するために、トランスフェクション後約 6 時間で培地を交換する必要があります。
2. トランスフェクション前に変更があった場合 培地に栄養が不足している場合は、通常どおり培地を変更できます。
(3)質問:siRNAとプラスミドのトランスフェクションにおけるPEIトランスフェクション試薬の効率はどのくらいですか?
A: この PEI トランスフェクション試薬は siRNA 用に特別に開発されており、プラスミド トランスフェクションは推奨されません。
(4)Q:トランスフェクション試薬は凍結できますか?
A: トランスフェクション試薬は PEI カチオントランスフェクション試薬であるため、凍結しないでください。低温で凍結すると、PEI トランスフェクション試薬の活性が破壊されます。したがって、最高のトランスフェクション効率を維持するには、4 度で保管するのが最適です。
(5)Q:トランスフェクション効率を向上させるにはどうすればいいですか?
A: a: トランスフェクション時の細胞密度、30%~50%。
b: トランスフェクション中の siRNA およびリポソームの希釈には、Opti-MEM 無血清培地を使用する必要があります。
c: トランスフェクション後4〜6時間で培地を交換できます。
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