Afbeelding. 1 HIJ vlekken resultaten van DSS acuut colitis sectie

2. Zebravismodellering

1) Zebravis embryo's waren gekweekt in E3 embryomedium met daarin methylblauw bij 28,5 °C tot 1 dpf;

2) 0,5% DSS drinken water was geconfigureerd met E3 medium En Dan gefilterd door A 0,22 μm filtermembraan;

3) Zebravis waren behandeld met 0,5% DSS van 3 dpf naar 6 dpf.

4) Experimenteel resultaten: alle 0,5% DSS-tarief medicamenteuze behandelingen resulteerde in verduistering van zebravis lever kleur en ontstekingsstress.

Afbeelding 2 DSS veroorzaakt een ontstekingsreactie in de lever van zebravissen

3. Varkensgieten

1) Vier naar vijf dag oud Yorkshire biggetjes, experimenteel groep: geperfuseerd met DSS, controle groep: geperfuseerd met zoutoplossing

2) Dagelijks inname van 1,25 gram DSS/kg per biggetje, doordrenkt voor 5 dagen

3) Experimenteel resultaten: Na instillatie van DSS-, de plasma D-mannitol opname tarief van de experimenteel groep was aanzienlijk hoger dan Dat van de controle groep, aangevend Dat de biggetjes toonde symptomen van enteritis zichtbaar naar de naakt oog.

Afbeelding 3 DSS veroorzaakte een hogere concentratie D-mannitol bij biggen dan bij controles

4.Drosophila modellering

1) Vrouwelijke Drosophila van 5 tot 10 dagen oud werden in een leeg flesje met 2,5 × 2,5 × 1 cm flesjes in cultuur gebracht met 3.75 cm chromatografiepapier (Fisher) voedingsmedium bevochtigd met 5% sucrose-oplossing;

2) Voedingsmedia met verschillende componenten werden afzonderlijk bereid met een 5% sucrose-oplossing, en de categorieën omvatten elk 3% DSS en 25 μg/ml bleomycine;

3) Drosophila werd in kolven met chromatografiepapier geplaatst en gedurende drie dagen bij 29°C geïncubeerd. Gedurende deze periode werden de overlevende Drosophila dagelijks overgebracht naar lege kolven met vers medium;

4) Experimentele resultaten: DSS heeft een dodelijke functie en DSS induceert de proliferatie van ISC-precursorcellen.

Afbeelding 4 DSS induceert proliferatie van ISC-precursorcellen in Drosophila

IV. Hoe naar evalueren de succes van modellering?

1. Ziekteactiviteit Index (DAI score)

Drie aspecten waren beoordeeld En gescoord: gewicht, ontlasting samenhang, En ontlasting occult bloed, En de DAI score was de som van de drie indicatoren.

Tabel 2 DAI-scoreregels

2. Scoren van histologisch veranderingen

Histologisch veranderingen waren gescoord als de som van de boven, En lymfe knooppunt vorming was niet gescoord in de acuut colitis model. De standaardmethode voor histologische analyse was HE-kleuring (cat.nr.: 60524ES60).

Tabel 3 Histologische veranderingsscores

3.Dubbele punt lengte

Colonisch lengte verkorting was detecteerbaar op dag 8 in de acuut colitis model; Het was meer uitgesproken in de chronisch colitis model.

4.Samenvatting

DSS UC dier model bouw zou moeten zijn voorafgegaan door voorproeven naar gevoel de modellering voorwaarden, En Het is aanbevolen dat pre-tests worden uitgevoerd met 8-10 samples in elke groep, en dat er een controlegroep moet worden opgezet. Meestal is het voorkomen van Gewichtsverlies, dunne ontlasting, diarree, bloederige ontlasting of occult bloed in de ontlasting, ulceratie kan worden beschouwd als het DSS-medicijn is effectief en het modelleren is succesvol.

VI.Yeasen DSS Modellering Geval Studie

Yeasen DSS (Kat. Nee: 60316ES, MW:36000~50000) is wijdverbreid gebruikt in de bouw van UC modellen. Yeasen

DSS kan succesvol UC-modellen bouwen met resultaten die vergelijkbaar zijn met die van geïmporteerde merken.

Objectief: Naar vergelijken de omvang van wijziging in lichaam gewicht van muizen aangetast door DSS-geïnduceerd acuut colitis van verschillend fabrikanten.

Muis type: BALB/c muizen;

Modellering protocol: 2% DSS concentratie, doorlopend vrije doorstroming drinken voor 1 week.

Conclusie: De tendens van lichaam gewicht verlies geïnduceerd door Yeasen DSS in muizen was consistent met Dat van de geïmporteerd merk.

En Wij gevonden Dat de acuut colitis modellering tijd is voornamelijk geconcentreerd in over 7 dagen, de effect is erg significant. De De volgende tabel bevat de feedback van enkele klanten.

Tabel 4 Modellering van verschillende soorten enterocolitis met DSS

Producteigenschappen:

1. Symptomen zijn zeer vergelijkbaar naar die van menselijk UC: Het kan zijn gebruikt naar studie de mechanisme van colitis En farmacodynamisch studie.
2. Hoge schimmelvorming tarief: gratis drinken DSS waterig oplossing, eenvoudig En eenvoudig,
3. kanconstrueren verscheidenheid van colitis modellen: acuut colitis, chronisch colitis, kan Ook zijn gecombineerd met AOM naar construeren colitis- geassocieerd kanker (CAC)-model.
4. Het is geschikt voor de modellering van velen soorten van dieren: muizen, ratten, zebravissen, varkens, fruit vliegen en Dus
5. hoge beveiliging: DSS kan zijn gedegradeerd door de natuurlijk ecosysteem, veilig voor de omgeving; 6, hoge zuiverheid: hoge zuiverheid (98%), zwavelgehalte 17-19%;

Hoofdstuk VII.Veelgestelde vragen

Of acuut DSS colitis model of chronisch DSS colitis model, de ernst En succes van enteritis is verwant naar muis soorten (verschillende genetische achtergronden), DSS-concentratie en doseringscyclus.

Tabel 5 Veelgestelde vragen voor DSS-colitismodellering

VIII.Product Bestellen

Modellering van acute pancreatitis bij dieren

Caerulein is A maag- regelgevend molecuul functioneel En samenstelling vergelijkbaar naar cholecystokinine (CCK) Dat stimuleert maag-, gal- en pancreasafscheiding.Rainfrogin kan worden gebruikt om signaalpaden te bestuderen die worden gemedieerd door NF-κB-upregulatie. eiwitten zoals Intercellular Adhesion Molecule (ICAM-1), ontstekingsgerelateerde factoren zoals NADPH-oxidase en Janus kinase. En het is succesvol gebruikt bij het opzetten van acute pancreatitis (AP) modellen bij ratten, muizen, honden en Syrisch hamsters.

Voordeel van gieten:

1. eenvoudige bediening
2. lagere kosten
3. snelle prototyping
4. meervoudige modi van medicijn levering

Modelleringsmechanismen:

1. Upregulatie van intercellulair hechting molecuul (ICAM-1) uitdrukking in alvleesklier alveolair cellen door stimulerend intracellulair NF-KB. Oppervlakte-ICAM-1 bevordert op zijn beurt de adhesie van neutrofielen aan alveolaire cellen, waardoor de ontstekingsreactie van de pancreas wordt versterkt. effecten;
2. Inducespancreatitis door inducerend dysregulatie van spijsvertering enzym afscheiding En cytoplasmatisch vacuolisatie leidend naar dood van alveolaire cellen en pancreasoedeem;
3. Activering van ontstekingsbevorderend factoren.

Verwant Reagentia

Yeasen biedt decapeptide moleculair vorm, zuiverheid ≥97% (HPLC) regenkikker; hoog vormefficiëntie, gunstig prijs, spotaanbod.

Modellering van diabetesziekten

Streptozocine (STZ) is een antitumor antibioticum dat wordt geproduceerd uit een bepaald type Streptomyces-schimmel, Aureobasidium pullulans, en kan ook worden gesynthetiseerd. Het wordt vaak gebruikt bij de behandeling van alvleesklierkanker. Tegelijkertijd heeft STZ een selectief destructief effect op de β-cellen van de eilandjes van de alvleesklier van bepaalde diersoorten en kan het diabetes veroorzaken bij veel dieren, meestal met behulp van ratten en muizen om diermodellen te creëren. Het is uitgebreid bestudeerd bij anti-leukemie, DNA-methylering en anti-nefritis.

1.1 Voorbereiding van de dieren

Probeer mannelijke dieren te gebruiken, vrouwtjes bevatten hormonen die de efficiëntie van het modelleren beïnvloeden. Sommige onderzoeken hebben aangetoond dat vrouwelijke dieren slechte modelleringspercentages hebben en hogere sterftecijfers kunnen ervaren dan mannetjes, vooral voor type I.

Type I-diabetes (diabetes type 1) kan over het algemeen worden geselecteerd op basis van het lichaamsgewicht. Voor ratten wordt 170-200 g aanbevolen en voor muizen 17-22 g. De modelleringssnelheid is relatief ideaal wanneer STZ wordt geïnjecteerd op een nuchtere maag na 1 tot 2 weken adaptieve voeding.

Voor diabetes type II worden ratten (bijv. SD/Wistar) geselecteerd op een leeftijd van 4-5 weken, met een gewicht van 90-100 g, en krijgen ze gedurende 4-6 weken een dieet met veel vet (veel suiker) om een ​​lichaamsgewicht van ongeveer 240-280 g te bereiken. Voor muizen (bijv. C57/ICR/Kunming-muizen) worden geselecteerd op een leeftijd van 4-5 weken, met een gewicht van 16-20 g, en krijgen ze gedurende 4-6 weken een dieet met veel vet (veel suiker) om een ​​lichaamsgewicht van ongeveer 30-35 g te bereiken.Voor nieuw gekochte dieren of dieren die van voedingsomgeving veranderen, moeten ze een week lang op normale diëten worden gevoerd voordat de juiste leeftijd/gewicht wordt geselecteerd om over te schakelen op vetrijk (suikerrijk) voer. Voor muizen (bijv. C57/ICR/Kunming-muizen) selecteert u 4-5 weken oud, weegt 16-20 g en voert u 4-6 weken vetrijk (suikerrijk) voer om een ​​lichaamsgewicht van ongeveer 30-35 g te bereiken. Voor nieuw gekochte dieren of een verandering van voedingsomgeving is het noodzakelijk om de dieren adaptief te voeren met normale diëten gedurende een week en vervolgens de juiste wekelijkse leeftijd/lichaamsgewicht dieren te selecteren en over te schakelen op vetrijk, suikerrijk dieet. In termen van modelleringssucces wordt SD aanbevolen voor ratten en C57 voor muizen.

1.2 Voeden vóór het vormen

Voeren vóór modellering: het model voor diabetes type I verloopt relatief snel. Meestal kunnen ratten na twee weken adaptief voeren met normaal voer beginnen met modelleren. Model voor diabetes type II: inductie van een vetrijk dieet plus een kleine dosis STZ. Vóór modellering werd voer met veel vet (veel suiker) gevoerd, wat insulineresistentie induceerde.

1.3 Voorbereiding van reagentia

①Vetrijk (veel suiker) voedt

Veel vet (veel suiker) voer Ingrediënten: bevat 10% sacharose, 10% vet, 5% cholesterol

Veel vet En veel suiker voedt waren gemaakt door combineren basis rat voer met sacharose, gecondenseerd vet En ei dooier in de volgende massaverhouding: 18% reuzel, 20% sucrose, 3% eidooier en 59% basisvoer.

② Voorbereiding van STZ oplosmiddel - natrium citraat buffer

Voorbereiding van Vloeistof A En Vloeistof B: Wegen 2,1 gram van citroenzuur zuur (Bron: 210.14) En toevoegen Het naar 100 ml van dubbel gedestilleerd water maken Vloeistof A. Weegt 2,94 g natriumcitraat (FW:294.10) en voeg het toe aan 100 ml dubbel gedestilleerd water om vloeistof B te maken.

Voorbereiding van natrium citraat buffer: Mengen A En B vloeistof in A zeker verhouding (1:1.32 of 1:1), pH meter naar bepalen de pH-waarde, pas de pH-waarde aan tot 4,2-4,5, dat wil zeggen de benodigde natriumcitraatbuffer.

1.4 Voorbereiding voor injectie

Voor voorbereiden STZ injectie, STZ gevriesdroogd poeder was geplaatst in A droog gesteriliseerd flesje, ingepakt extern met aluminium folie of aluminiumfolie, voorgekoeld in een ijs bad met natrium citraatbuffer, en bracht naar de dier kamer voor back-up.

Opmerking: Na verwijderen de STZ gevriesdroogd poeder van de -20°C koelkast, vertrekken Het droog en beschermd van licht bij kamer temperatuur voor ongeveer 10min om toe te staan het ontdooien helemaal (heel belangrijk).

1.5 Voorbereiding van injectie oplossing

Ratten waren gewogen En bloed glucose concentraties waren gemeten na 's nachts vasten (Nee water). Ratten waren gegroepeerd om de STZ-injectie voor te bereiden op basis van het aantal dieren en de te injecteren dosis. Los STZ op tot 1% concentratie (w/V), filteren en steriliseren, waarbij u in gedachten moet houden dat STZ volledig is opgelost.

Aandacht:

①STZ is onstabiel En eenvoudig naar inactiveren, de overig reagens na snel weging nog steeds vereist drogen En licht bescherming, En Het is aan te raden om het in droog aluminiumfolie (of tinfolie) te wikkelen.

②Als Jij Zijn niet vaardig in injectie, Doen niet oplossen de STZ bij een tijd, En Het is aanbevolen Dat Jij oplossen de STZ in groepen, bijvoorbeeld 10 of 15 ratten per groep, afhankelijk van uw vaardigheidsniveau.

③De STZ kan ook zijn gewogen van tevoren En verdeeld in de benodigde hoeveelheid voor groepering van dieren.

1.6 Injectie

Injecteer intraperitoneaal of caudaal ader volgens het nuchtere lichaamsgewicht van het dier. Als de injectie operatie techniek is niet vaardig, twee groepen zou moeten zijn geïnjecteerd afwisselend, En de injectie zou moeten zijn voltooid binnenin 30 notulen. Let op: de meeste injecties moeten snel worden toegediend.

Aandacht:

Type Ik diabetesmodel: rattendosis 70-65mg/kg

Type Ik diabeet model: Ratten gevoed met hoog suiker En hoog vet voor 1-2 maanden waren behandeld met STZ bij A dosis van 25-40mg/kg.

1.7 Na injectie

Na de injectie met STZ moeten de dieren voldoende water en voedsel krijgen (de basislevenskenmerken van diabeten). ratten), En de beddengoed behoeften naar zijn veranderd dagelijks naar houden de kooi droog. Wanneer voeden, nemen zorg naar voorkomen sterk zonlicht. Steriliseren zo vaak mogelijk.

Opmerking: Na STZ modellering, schommelingen in klaarblijkelijk bloed glucose niveaus show 3 tijdelijk fasen, vergankelijk hyperglycemie (1- 2 uur), voorbijgaande hypoglykemie (6-10 uur) en aanhoudende hyperglykemie (>72 uur). Insuline en glucose moeten op de juiste manier worden toegediend. aangevuld.

2. Indicatoren voor beoordelen de modellering effect van STZ-geïnduceerd suikerziekte modellering

De volgend indicatoren waren geteld in vergelijking met de controle groep:

1. Algemene indicatoren: de fenomeen van excessief drinken, eten En urineren, En gewicht verlies;
2. Andere indicatoren: vasten bloed glucose, vasten serum insuline niveau, serum insuline niveau, insuline gevoeligheid, glucose tolerantie enzovoort;
3. Serumbiochemische indicatoren: T-Cho, TG, HDL-C, LDL-C, CR, BON, Alt, enz.
4. Pathologische dia's: histopathologisch dia's van de alvleesklier

3.Uitleg van de redenen voor de mislukking van de STZ-geïnduceerd suikerziekte model

1. 1. de kwaliteit van STZ is de sleutel, de zuiverheid van STZ voor modelleren zou moeten wees niet minder dan 98% (HPLC-test).
2. 2. STZ-falen: droog opslaan, vocht vermijden.Vermijd langdurige plaatsing van het poeder bij kamertemperatuur. Opgeloste STZis erg onstabiel, met A halfwaardetijd van 15 notulen bij neutrale  Betalen aandacht naar oplossen STZ met zuur pH-waarde, bij voorkeur in een ijs bad.
3. Of het nu wel of niet intraperitoneale injectie is geïnjecteerd in de darmen en andere organen.

Als de model is niet omhoog naar standaard, Het is aanbevolen Dat, als de model is niet omhoog naar standaard, Het zou moeten zijn opnieuw geïnjecteerd voor een andere 3 dagen.

4. Uitleg van de oorzaken van STZ-geïnduceerd hoog sterfte in muizen/ratten

4.1. De ratten gewicht is te laag;

4.2. Genoeg drinken water moet zijn gegarandeerd (onvoldoende drinken water kan gemakkelijk leiden tot dode ratten).

4.3. Een hoge bloedsuikerspiegel en een lage bloedsuikerspiegel kunnen leiden tot dode ratten. Vermijd dode ratten, deze kunnen worden geïnjecteerd met insuline of tijdelijke suiker. aanvulling, twee manieren: ① Algemeen hoog bloed suiker. Insuline aanvulling methode, supplement sommige middelmatig werkend insuline. Geef bijvoorbeeld Novolin N of NPH (neutrale visproteïnezinkinsuline), 2-3 eenheden per keer, na 3-5 dagen, de algemene het sterftecijfer van ratten zal laag zijn; ②Suikersuppletiemethode, na vastende ratten is de injectie uitgevoerd in een hypoglycemische toestand staat, de vorming van 4 uur na de intraperitoneale injectie van 20% glucose, kan worden vermeden door de injectie van hypoglykemie dood van de ratten;

4.4. Voorkomen dieren van doden elk ander. Gebrek van voedsel En onvoldoende water levering zullen traan elk ander uit elkaar En knabbelen op soortgenoten, dus voedsel en water moeten in voldoende hoeveelheden worden verstrekt, bij voorkeur op twee manieren.

4.5.Voorkomen infectie. Diabetisch ratten urineren A kavel, de beddengoed is vochtig En behoeften naar zijn veranderd vaak, Dus diabeet ratten zijn vatbaarder voor infecties dan andere ratten, met name urineweginfecties en buikinfecties. Voor en na invasieve Bij operaties zoals intraperitoneale injectie, subcutane injectie en bloedglucoseverzameling moet aandacht worden besteed aan sterilisatie. Voor voorbeeld, tetracycline (of gentamycine oogheelkundig zalf) kan zijn toegepast lokaal naar traktatie de wond naar voorkomen infectie na elke bloedglucosemeting.

5. Factoren beïnvloedend suikerziekte modellering

De beïnvloedende factoren van diabetesziektemodellering zijn onder meer de kwaliteit van STZ-modelleringsreagentia, de dierconditie en administratie methode. Te midden van hen, de voornaamst eigenschappen van de reagentia Zijn zuiverheid, stabiliteit, oplosbaarheid kenmerken, enz. De De conditie van het dier omvat voornamelijk genetische achtergrond, mannelijk en vrouwelijk, geslacht, lichaamsgewicht, voedingsomgeving, dieet structuur, enz., en de wijze van toediening omvat de toedieningstijd, het toedieningsinterval en de toedieningsroute. Gedifferentieerde factoren brengen gedifferentieerde modelleringseffecten met zich mee.

6. De STZ modellering methodologie ideeën gesorteerd uit

Standaardisatie van de beïnvloeden factoren is A garantie van bereiken de modellering doel En modelleren van stabiliteit. Theoretisch gezien, alle diermodellering experimenten vereisen voorafgaand experiment.

In het geval van een STZ-geïnduceerd diabetesmodel moet de dosering van STZ gebaseerd zijn op de resultaten van de voortesten, en moet geprobeerd worden niet blindelings Volg de dosering in de literatuur of anderen om direct te gebruiken, aangezien het gemiddelde gewicht van ratten en vasten (lage glucosestatus) weerstand, de duur van het vasten, de timing van de injecties, evenals het voorgaande voedingsproces, de tijd van glucose meting, En Dus op, Zijn verschillend, En Het is de meest wetenschappelijk naar bepalen de dosering metingen in overeenstemming met hun eigen proefmuizen door de pre-tests. De meest wetenschappelijke manier is om de dosering van het medicijn te bepalen door pre-testen.

7.Hoog Modellering Succes Tarief STZ Gebruik Richtlijnen

STZ behoud, oplossen, afgeven en andere voorzorgsmaatregelen voor gebruik, zien de officieel website van de relevante reagentia.

8.Producten

Hoog slagingspercentage: zuiverheid ≥98% (HPLC bepaling); stabiel kwaliteit, kosteneffectief, spotlevering, naverkoop garantie.

(Voor meer informatie op de gebruik van STZ gieten, Alsjeblieft rekening de speciaal artikel op yeasen website)

Product Lijn Gepubliceerd Artikelen (gedeeltelijk)

[1] Li, , Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut commensal derived-valeriaanzuur beschermt tegen stralingsschade. Gut Microbes,.2020 .1-18. IF=10.245

[2] Wang Y, Jia M, Yan X, et al. Verhoogde neutrofiele gelatinase-geassocieerde lipocaline (NGAL) bevordert de remodellering van de luchtwegen bij chronische obstructieve longziekte[J]. Clinical Science, 2017, 131(11): 1147-1159. IF=6.124

[3] Su J, Sun H, Meng Q, en  Verbeterde bloedsuspensibiliteit en laser-geactiveerde tumorspecifieke medicijnafgifte van theranostische mesoporeuze silica-nanodeeltjes door functionalisering met erytrocytmembranen [J]. Theranostics, 2017, 7 (3): 523. IF = 11,556

[4] Wu J, Lv Q, He J, et al. MicroRNA-188 onderdrukt de G 1/S-overgang door zich te richten op meerdere cycline/CDK-complexen[J]. Cell Communication and Signaling, 2014, 12(1): 66. IF=5.712

[5] Zhang T Q, Wang J  Scheutregeneratieve capaciteitstests in Arabidopsis en tabak [J].The Plant Cell, 2015. IF=10.69

[6] YaoC, Ni Z, Gong C, en  Rocaglamide verbetert NK-cel-gemedieerde doding van niet-kleincellige longkankercellen door autofagie te remmen[J]. Autophagy, 2018, 14(10): 1831-1844. IF=16.016

[7] FanH, Chen W, Zhu J, en  Toosendanin verlicht dextransulfaatnatrium-geïnduceerde colitis door de polarisatie van M1-macrofagen te remmen en de NLRP3-inflammasome- en Nrf2/HO-1-signalering te reguleren[J]. International immunopharmacology, 2019, 76: 105909. IF=4.932

[8] Gao X, Fan W, Tan L, et al. Soja-isoflavonen verbeteren experimentele colitis door te richten op ERα/NLRP3-inflammasome-paden[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83. IF=6.048

Modellering van reumatoïde artritis

Reumatoïde artritis (RA) is een chronische ontstekingsziekte van de gewrichten die wordt gekenmerkt door aanhoudende synovitis, systemische ontsteking, gepaard gaand met erosie van bot en kraakbeen, wat uiteindelijk kan leiden tot ankylering en misvorming van de gewrichten.

Freunds Adjuvant werd uitgevonden door Jules Freund in de jaren 40 van de 20e eeuw, wat een antigeenemulsie is die een gelijke hoeveelheid antigeenoplossing in water mengt met een olie en vervolgens een emulgator toevoegt om water-in-olie te maken, wat het meest gebruikte adjuvans is in dierproeven. Freunds adjuvant is onderverdeeld in Complete Freunds Adjuvant (CFA) met Mycobacterium tuberculosis en Incomplete Freunds Adjuvant (IFA) zonder Mycobacterium tuberculosis, die voornamelijk worden gebruikt om collageen-geïnduceerde artritis CIA-model en adjuvant-geïnduceerde artritis AA-model in muizen te induceren.

1. Stappen voor collageen-geïnduceerde artritis (CIA) modellering (alleen ter referentie)

1) Bereid de relevante reagentia voor, besteed aandacht aan het samenstellen van de experimentele groep en de controlegroep.

2) Rundercollageen type 2 (CII.) werd opgelost in een oplossing van ijsazijn in een concentratie van 2 mg/ml bij 4°C gedurende de nacht.

3) Freund's incomplete adjuvans werd aangevuld met geïnactiveerde Mycobacterium tuberculosis in een concentratie van 2-5 mg/ml om Freund's complete adjuvans te bereiden. De concentratie van Mycobacterium tuberculosis in de 60718ES Freund's complete adjuvans geleverd door Yisheng Biotech was minder dan 10 mg/ml.

4) Een oplossing van rundercollageen type 2 (CII.) azijnzuur wordt gemengd met een gelijke hoeveelheid Freund's complete adjuvans en geëmulgeerd.

5) Subcutane injectie van 0,1-0,2 ml op de rug van elke proefmuis.

6) Na 3 weken werd dezelfde hoeveelheid Fund incompleet adjuvans gemengd met een oplossing van bovien collageen type 2 (CII.) azijnzuur en geëmulgeerd. Vervolgens werd bij elke muis in totaal 0,1-0,2 ml subcutaan in de staartbasis geïnjecteerd.

7) Pathologisch onderzoek: muizen in de experimentele groep en de controlegroep werden verwijderd, 4% formaldehyde werd meer dan 48 uur gefixeerd, 5% nitraat werd gedurende 2 uur ontkalkt, xyleen werd geïnfiltreerd en paraffine werd ingebed. Er werden secties gemaakt, HE-kleuring en bekeken met conventionele lichtmicroscopie.

2. Modelleringsstappen voor adjuvans-geïnduceerde artritis (AA) (alleen ter referentie)

1) Bereid de relevante reagentia voor, besteed aandacht aan het samenstellen van de experimentele groep en de controlegroep.

2) Observatieverslag: Over het algemeen vertoont meer dan 80% van de muizen 7-12 dagen na de tweede immunisatie artritissymptomen.De klinische symptomen werden gegradeerd op basis van de roodheid, zwelling en activiteit van de gewrichtsdelen van de muizen. De observatiegegevens werden respectievelijk vóór het experiment en op de 3e, 5e, 7e en 12e dag na het experiment vastgelegd. De referentie voor de classificatie van de gradaties is als volgt:

3) Meting bij muizen: Het volume van de gewrichten van de achterpoten van muizen werd voor en na het experiment gemeten met behulp van een volumemeter voor muizenklauwpoten. Het volume van de kniegewrichten van de achterpoten van elke muis werd gemeten onder ongeveer 5 mm. Dit werd drie keer herhaald. De gemiddelde waarde werd vastgelegd en de test werd eens in de drie dagen uitgevoerd.

4) Pathologisch onderzoek: muizen in de experimentele groep en de controlegroep werden verwijderd, 4% formaldehyde werd meer dan 48 uur gefixeerd, 5% nitraat werd gedurende 2 uur ontkalkt, xyleen werd geïnfiltreerd en paraffine werd ingebed. Er werden secties gemaakt, HE-kleuring en bekeken met conventionele lichtmicroscopie.

3.Veelgestelde vragen

Gerelateerde productaanbevelingen

Hypertensieve modellering

Hypertensie wordt gekenmerkt door een verhoogde systemische arteriële bloeddruk (systolische en/of diastolische bloeddruk), wat zich uit in systemische arteriële bloeddruk (systolische bloeddruk ≥ 140 mmHg en/of diastolische bloeddruk ≥90 mmHg), wat de meest voorkomende chronische ziekte is en de belangrijkste risicofactor voor cardiovasculaire en cerebrovasculaire ziekten, en vaak gepaard gaat met klinische syndromen met functionele of organische schade aan hart, nieren, hersenen en andere organen. De studie van de preventie en behandeling van hypertensie is van groot praktisch belang, en het opzetten van een dierlijk hypertensiemodel is een belangrijk onderdeel van de studie van hypertensie.

Dierlijke hypertensiemodellen kan worden onderverdeeld in genetisch gerelateerde modellen en niet-genetisch gerelateerde modellen. Genetisch gerelateerde modellen omvatten erfelijke en genetisch gemanipuleerde diermodellen, terwijl niet-genetisch gerelateerde modellen over het algemeen verwijzen naar modellen die worden geïnduceerd door omgevings-, chirurgische en medicijnfactoren. De onderzoeksonderwerpen van modellering omvatten over het algemeen varkens, schapen, konijnen, honden, muizen en ratten, enz., maar de meeste experimenten worden gemodelleerd in muizen en ratten, en de veelgebruikte dierlijke hypertensiemodellen zijn het SHR-model van spontane hypertensieve ratten en het medicijn-geïnduceerde hypertensiemodel.

1. Dierlijk erfelijk hypertensiemodel

1.1 SHR-model van spontaan hypertensieve ratten

Spontane hypertensieve ratten, ook bekend als SHR-ratten, hebben een incidentie van hypertensie van bijna 100% en zijn de meest gebruikte diermodellen. De systolische bloeddruk van normale ratten is 110-120 mmHg, en de bloeddruk van SHR-ratten begint te stijgen na 4-6 weken leeftijd, en de bloeddruk is zelfs meer dan 200 mmHg na het fokken.

Voordelen: De incidentie van hypertensie is hoog, het ziekteverloop is kort en de pathologische veranderingen van de doelorganen kunnen in het begin worden waargenomen.

Nadelen: De kweekcyclus is lang, de voedingsomstandigheden stellen bepaalde eisen en de prijs is iets hoger dan die van gewone ratten.

1.2 SHRsp-model van ratten met spontane hypertensie die vatbaar zijn voor beroertes

Beroertegevoelige spontane hypertensie ratten, ook bekend als SHRsp ratten, hebben een incidentie van hypertensie van bijna 100% en beroerte van bijna 80%. De bloeddruk bij SHRsp ratten begon te stijgen na 4-6 weken oud en kon 200 mm Hg bereiken na 10-15 weken oud.

Voordelen: De incidentie van hypertensie ligt dicht bij de 100% en de incidentie van beroertes bedraagt ​​80%. Dit maakt het een ideaal diermodel voor beroerteonderzoek.

Nadelen: lange teeltcyclus, lastige genetische veredeling, gemakkelijk te muteren, breuk.

2. Model voor door medicijnen veroorzaakte hypertensie

2.1 Angiotensine II (AngII.) inductie

2.1.1 Experimentele methoden (alleen ter referentie)

Mannelijke muizen van 8-12 weken oud werden geïnjecteerd met angiotensine II en normale zoutoplossing door middel van subcutane injectie met een osmotische pomp, en de dosis AngII was over het algemeen 100 ng/(kg·min) gedurende 2-4 weken. De toedieningstijd kan worden verkort of verlengd, afhankelijk van de werkelijke situatie.

2.1.2 Experimentele afbeeldingen (fragmenten uit de literatuur)

Toepassing 1: Angiotensine II. Muizen die gedurende 28 dagen werden gevoed met een NaCl-oplossing, de experimentele groep vergeleken met de controlegroep, lieten een significante stijging van de bloeddruk zien.

Figuur 5 Veranderingen in bloeddruk en hartslag bij muizen (A is systolische bloeddruk, B is gemiddelde bloeddruk, C is diastolische bloeddruk, D is hartslag)

2.2 Inductie van deoxycorticosteronacetaat (DOCA)

Deoxycorticosteronacetaat (DOCA) kan het renine-angiotensinesysteem remmen, wat resulteert in een lage plasmarenineactiviteit en zo een stijging van de bloeddruk veroorzaakt. Dit gebeurt doorgaans door het implanteren van een subcutane DOCA-pomp met verlengde afgifte of door het injecteren van DOCA en het toevoegen van een NaCl-oplossing om de vorming van hypertensie te induceren.

Het is vooral toepasbaar op onderzoek naar het renine-angiotensinesysteem (RAS) en het water- en natriummetabolisme bij hypertensie. Het model kan de bloeddruk stabiel laten stijgen en de methode is eenvoudig.

2.2.1 Experimentele methoden (alleen ter referentie)

De linkernier van een normale mannelijke rat van 250-275 gram werd verwijderd en het rubbermedium van DOCA en silicagel werd onder de huid tussen de schouderbladen aan beide kanten van de rat geplaatst. Nadat de linkernier was verwijderd, werd DOCA subcutaan geïnjecteerd in een dosering van 50 mg/(kg·d) per dag. Hierbij moet worden opgemerkt dat de DOCA-ratten tijdens het voederproces 1% NaCl-oplossing moesten drinken. De bloeddruk van de ratten werd gemeten na 3-5 weken operatie.

2.2.2 Experimentele afbeeldingen (fragmenten uit de literatuur)

Toepassing 1: Nadat de unilaterale nier was verwijderd, werd DOCA toegevoegd en de resultaten lieten zien dat de bloeddruk van de muizen in de controlegroep relatief constant was, maar dat de bloeddruk van de muizen in de experimentele groep significant toenam.

Afbeelding 6 Diagram van bloeddrukveranderingen bij muizen

2.3 N-nitro-L-argininemethylester (L-NAME)-geïnduceerd diermodel voor hypertensie

L-NAME is een competitieve remmer van stikstofoxidesynthase, een werkzame stof die de endotheelfunctie bevordert en de bloeddruk verlaagt wanneer stikstofoxide stijgt. L-NAME, een competitieve remmer van stikstofoxidesynthase, kan het vaatverwijdende effect van stikstofoxide verzwakken en leiden tot het optreden van hypertensie. Daarom kan een diermodel van hypertensie veroorzaakt door langdurige NO-deficiëntie worden vastgesteld en de experimentele onderzoeksobjecten van het model worden meestal gezien bij ratten.

Het is vooral geschikt voor de studie van het stikstofoxidesysteem en het cardiovasculaire systeem bij hypertensie. Het model kan de bloeddruk stabiel en continu laten stijgen en de methode is eenvoudig.

2.3.1 Experimentele methoden (alleen ter referentie)

Mannelijke ratten van 3-4 weken oud kregen intraperitoneaal een injectie (of via een injectiespuit) met L-NAME in een dosering van 20-50 mg/(kg·d) en kregen dit gedurende 4 weken eenmaal per dag toegediend. De controlegroep kreeg alleen intraperitoneaal een injectie (of via een injectiespuit) met gedestilleerd water en de veranderingen bij de ratten werden dagelijks gecontroleerd.

Na het experiment werden het lichaamsgewicht, de bloeddruk, de hartslag, de biochemische indexen in het serum en andere biochemische indexen van de experimentele groep en de controlegroep gemeten.

2.3.2 Experimentele tabellen en afbeeldingen (fragmenten uit de literatuur)

Toepassing 1: Na inschrijving nam de bloeddruk van de modelgroep geleidelijk toe naarmate de innametijd van L-NAME werd verlengd, en bereikte de bloeddruk in de 4e week de norm van hypertensie, die aanzienlijk hoger was dan die van de overeenkomstige controlegroep.

Toepassing 2: Na 4 weken irrigatie ontstond bij ratten hypertensie, wat aanzienlijk hoger was dan bij ratten in de overeenkomstige controlegroep. Het waterige extract van cassiazaad kon de druk verlagen en nierletsels verbeteren.

2.4 Vergelijking van door geneesmiddelen geïnduceerde hypertensiemodellen

Gerelateerde productaanbevelingen (samenvatting)

Voor meer product details En promotioneel prijzen Alsjeblieft contact verkoop