Het protocol van ulcerosistolitis Drosophila -modellering met behulp van dextran natriumsulfaat (DSS, colitiskwaliteit)

Dextransulfaatnatrium (DSS) is een polyanionisch derivaat van dextran, geproduceerd door verestering van dextran met chloorsulfonzuur. Het voeren van Drosophila zal de verbinding tussen intestinale epidermale cellen in het intestinale epitheel vernietigen, wat schade aan de intestinale cellen veroorzaakt, waardoor meerdere reactiepaden ontstaan ​​om de zelfvernieuwing en differentiatie van stamcellen te reguleren, beschadigde cellen aan te vullen en de intestinale homeostase te handhaven.

Figuur 1 Schematisch diagram van de deling en differentiatie van Drosophila intestinale stamcellen

1 Modelbouw

1.1 Diermodel

Drosophila, vrouwelijk, 5-10 dagen;

1.2 Materiaal

DSS-(Yeasen#60316ES,MW36000-50000)

1.3 Protocol

1、Voeden medium werd bereid met een 5% sucrose-oplossing;

2、Controlegroep: 5% sucrosemedium (SC), Experimentele groep: 3% DSS (mediumbereiding);

2. Vliegen werden gekweekt in een leeg flesje met daarin een stuk chromatografiepapier van 2,5 x 3,75 cm (Fisher) dat nat was gemaakt met een 5% sucrose-oplossing als voedingsmedium.

3. Drosophila werd gedurende drie dagen gekweekt bij 29°C, waarbij de kweekfles dagelijks werd verwisseld;

4. Na drie dagen kweek werden de middendarmen uitgesneden en immunologisch gekleurd met GFP (groen) en PH3 (rood) antilichamen en DRAQ5 (blauw).

2 Resultaten

Figuur 2. Proliferatie van ISC-precursorcellen in Drosophila melanogaster geïnduceerd door DSS [1]

Door gebruik te maken van verschillende labelingsmethoden bij immunokleuring werden de intestinale stamcellen (ISC) en de proliferatie van ISC-voorlopercellen gekwantificeerd, wat aangeeft dat DSS schade aan de darmen veroorzaakte in het drosophila-model.

3 Links naar deze bron

[1] Fangfang Ren, et al.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069

4 Succesvol geval voor modelleren met Yeasen DSS

Yeasen biedt hoogwaardige DSS (Cat#60316ES): zuiverheid (98%), zwavelgehalte 17-19%, vrije zwavel <0,2%, ondersteund door een groot aantal literatuurgegevens.

Tabel 1 Constructie van verschillende soorten enteritismodellen met DSS

Model

Modelleren van monsters

Modelleringsplan

Modelleringsresultaten

Gebruik evaluatie

acute colitis

BALB/c-muizen, vrouwelijk, 6-8 weken, 25 g

3%-5% DSS drinkt gedurende 7 opeenvolgende dagen vrij

Dag 5 verscheen, de lengte van de dikke darm was verkort, HE-kleuring en de ontsteking was duidelijk

de vormsnelheid is snel en de tijd is kort. Consistent met de kenmerken van het acute colitis model

C57BL/6 muizen, mannelijk, 8 weken, 20 g

3%-5% DSS via sondevoeding, continue toediening

Dag 5 treedt op, verkorting van de dikke darm, gewichtsverlies, bloed in de ontlasting, diarree

Hoge schimmelvormingsgraad en korte duur.In overeenstemming met de kenmerken van het acute colitismodel

chronische colitis

C57BL/6 muis, mannelijk, 8 weken, 22 g

1-2% DSS via sondevoeding, continue toediening

Dag 40 verschijnt, verkorting van de dikke darm, gewichtsverlies, bloed in de ontlasting, diarree

Hoge vormsnelheid. Consistent met de kenmerken van het chronische colitismodel

dikke darmkanker

C57BL/6 muis, mannelijk, 8 weken, 21 g

1%-2% DSS ad libitum gedurende 5 dagen gedurende 3 weken

14 weken met verkorte colonlengte, gewichtsverlies, HE-kleuring en duidelijke ontsteking

Hoge vormsnelheid. Consistent met kenmerken van het colonkankermodel

5 Pproduct bestelling

Een goed verkopend product kost slechts 1/3 van de prijs M* met dezelfde efficiëntie, en we houden een grote voorraad aan.

Pproduct Nik ben

Aartikel Nomber

Specificatie

Dextransulfaat natriumzout (DSS), colitis klasse MW: 36000~50000

60316ES25/60/76/80

25 gram/100 gram/500 gram/1 kg

Azoxymethaan (AOM)

60751ES03/08/10

1mg/5mg/10mg

MolPuur® Ontlasting DNA Kit

18820ES08/50/70

5 ton/50 T/200 T

MolPuur® Mag48 Bodem/ontlasting DNA Kit FA

18528ES48

48T

MolPuur®Mag Bodem/ontlasting DNA Kit

18526ES20/50/70

20 T/50 T/200 T

Hematoxyline en eosine kleuringskit

60524ES60

2×100 ml

Urine Fecale Occult Bloed Test Kit

60403ES60

100T

Alcian Blue Periodic Acid-Schiff (AB-PAS) kleuringsoplossing

60534ES50/60

6×50 ml/6×100 ml/

6 Pgepubliceerde artikelen met onze reagentia

  1. Zhong D, Jin K, Wang R, et al. Microalgen-gebaseerde hydrogel voor inflammatoire darmziekte en de bijbehorende angst en depressie. Adv Mater. 2024 26 jan:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. ALS=29,4
  2. Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis moduleert immuuntolerantie bij colitis via het L-lysine-geactiveerde AhR-IDO1-Kyn-pad. Nat Commun. 2024 13 feb;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.ALS= 16.6
  3. Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Verbetering van het platform voor medicijngebruik met injecteerbare mucoadhesieve hydrogel voor de behandeling van colitis ulcerosa[J].chemical engineering journal.424(2021)130464.ALS=16.744
  4. Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. Van melk afkomstige extracellulaire blaasjes verlichten colitis ulcerosa door de darmimmuniteit te reguleren en de darmmicrobiota opnieuw vorm te geven [J]. Theranostics. 2021; 11(17): 8570-8586 ALS=11.556
  5. Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut commensal derived-valeriaanzuur beschermt tegen stralingsschade. Gut Microbes,.2020 .1–18.ALS=10.245
  6. Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. Oraal toegediende nucleotide-afgiftedeeltjes uit microfluïdica voor de behandeling van inflammatoire darmziekten [J]. Applied Materials Today. 2021 Dec; 25:101231 ALS=10.041
  7. Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. Identificatie van immuungerelateerde gensignatuur en voorspelling van CeRNA-netwerk bij actieve colitis ulcerosa [J]. Frontiers in Immunology. 2022; 13: 855645.ALS=7.561
  8. JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. Orale microbiota beïnvloedt de werkzaamheid en prognose van radiotherapie voor colorectale kanker in muismodellen [J]. Celrapporten. 2021, 109886.ALS=9.423
  9. Hoi H,  Zhang X,  Tong Ik,  Liu Q,et al.Lactobacillus plantarumEffect van extracellulaire blaasjes afkomstig van Vraag 7 over darmflora en colitis ulcerosa bij muizen[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .ALS=7.561
  10. Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. Eetbaar vogelnest verbetert door dextransulfaatnatrium geïnduceerde colitis ulcerosa bij C57BL/6J-muizen door het herstellen van de Th17/Treg-celbalans[J].Frontiers in Pharmacology.2021.632602.ALS=7.561
  11. Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. Piperlongumine verlicht colitis bij muizen en colitis-geassocieerde colorectale kanker [J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885.ALS=7.561
  12. Gao X, Fan W, Tan L, et al. Soja-isoflavonen verbeteren experimentele colitis door te richten op ERα/NLRP3-inflammasome-paden[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.IF=6.048
  13. Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. Het ontstekingsremmende effect van uit runderbotten afkomstige gelatinepeptiden bij LPS-geïnduceerde RAW264.7 Macrofagencellen en door dextransulfaatnatrium geïnduceerde C57BL/6-muizen[J]. Nutrients 2022, 14, 1479. ALS=5.717
  14. Wang S,  Huang J,  Bruinen KS, et al. Isosteviolnatrium verbetert door dextrannatriumsulfaat veroorzaakte chronische colitis door regulering van metabole profilering, macrofaagpolarisatie en NF-B-route[J]. Oxidatieve geneeskunde en cellulaire levensduur. 2022,4636618. ALS=5.076

Inquiry