Het protocol voor het modelleren van biggen met colitis ulcerosa met behulp van dextrannatriumsulfaat (DSS)
Verhoogde intestinale permeabiliteit is een van de etiologische factoren van IBD en kan daarom worden gebruikt als een biomarker om de ernst van schade aan de dunne en dikke darm te beoordelen. D-Mannitol, een inert klein koolhydraatmolecuul dat kan worden geabsorbeerd langs de gehele crypte villus-as, werd gebruikt om in vivo intestinale permeabiliteit te beoordelen[1].
Figuur 1. Biggetje
1. Modelbouw
2. Resultaten
3. Links naar deze bron
4. Succesvol geval voor modelleren met
5. Productbestelling
6. Gepubliceerde artikelen met onze reagentia
7. Betreft het lezen
1. Modelbouw
1.1 Diermodel
Yorkshire biggetjes op de leeftijd van 4-5 dagen
1.2 Materiaal
DSS-(
1.3 Protocol
a) Yorkshire biggen werden individueel gehuisvest in metalen vloerhokken met rubberen vloeren in een gecontroleerde 12 uur licht/donker cyclus kamer. De kamertemperatuur werd gehandhaafd op 26℃ en aangevuld met de warmtelamp;
b) Biggen kregen drie keer per dag een commercieel melkvervangerdieet, vergelijkbaar met hun ad libitum-innameniveau;
c) Dieren werden chirurgisch voorzien van een intragastrische katheter. De katheter werd verankerd aan een siliconen patch (ongeveer 8×12 mm), die verder werd gehecht aan de maagwand met ongeveer 30 mm ingebracht in het maaglumen. Elk dier werd voorzien van een op maat gemaakt vest met een dorsale zak voor de tijdelijke opslag van het buitenste segment van de katheter;
d) Dieren werden verdeeld in een positieve controlegroep (Pos), negatieve controlegroep (Neg) en experimentele groep (Trp);
e) Positieve controlegroep (Pos): perfusie DSS (5 dagen) + zoutoplossing (5 dagen); Negatieve controlegroep (Neg): geperfuseerd met normale zoutoplossing (10 dagen); Experimentele groep (Trp): infuus DSS (5 dagen) + therapeutische medicijnen (5 dagen);
f) DSS-dosis: 1,25 g/kg, orale inname gedurende 5 dagen;
g) Bij het eindpunt werden de dieren verdoofd door middel van een geïnhaleerd anestheticum, isoflurane, en geëuthanaseerd door middel van intracardiale injectie van ethanol (pentobarbital) in een dosering van 0,3 ml/kg lichaamsgewicht (LG).
h) Weefsels uit de dikke darm werden onmiddellijk gespoeld in een koude zoutoplossing (154 mM, pH 7,4) met 0,1 mM fenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) en afgenomen voor histologie of snel ingevroren in vloeibare stikstof voor verdere analyse.
2. Resultaten
2.1 Analyse van de intestinale permeabiliteit
Figuur 2. De DSS-geïnduceerde D-mannitolconcentratie bij biggen was hoger dan die in de controlegroep
De DSS-geïnduceerde D-mannitolconcentratie bij biggen nam toe en de darmbarrière werd vernietigd.
2.2 H&E pathologische kleuringssectie
Figuur 3. H&E pathologische kleuringssectie (A: Negatieve groep; B: Pos-groep)
De ernst van de ontsteking in de dikke darm werd beoordeeld door middel van ontstekingsscores en histologische metingen.In de Pos-groep die met DSS werd behandeld, was de recessstructuur vervormd, infiltreerden ontstekingscellen in de mucosa en submucosa, ontstond er een recessabces en was er sprake van recessontsteking.
2.3 Detectie van ontstekingsfactoren
Figuur 4. Detectie van ontstekingsfactoren
De concentratie van twee cytokinen in de Pos-groep die met DSS werd behandeld, nam toe[1].
3. Links naar deze bron
[1]Connie J. Kim, et al. Tijdschrift voor voedingsbiochemie 21 (2010) 468–475.
4. Succesvol geval voor modelleren met Yeasen DSS
Tabel 1 Constructie van verschillende soorten enteritismodellen met DSS
| Model | Modelleren van monsters | Modelleringsplan | Modelleringsresultaten | Gebruik evaluatie |
| acute colitis | BALB/c-muizen, vrouwelijk, 6-8 weken, 25 g | 3%-5% DSS drinkt gedurende 7 opeenvolgende dagen vrij | Op dag 5 verscheen de lengte van de dikke darm werd verkort, HE-kleuring en de ontsteking was duidelijk | de vormsnelheid is snel en de tijd is kort. Consistent met de kenmerken van het acute colitis model |
| C57BL/6 muizen, mannelijk, 8 weken, 20 g | 3%-5% DSS via sondevoeding, continue toediening | Dag 5 treedt op, verkorting van de dikke darm, gewichtsverlies, bloed in de ontlasting, diarree | Hoge schimmelgraad en korte duur. Consistent met de kenmerken van het acute colitismodel | |
| chronische colitis | C57BL/6 muis, mannelijk, 8 weken, 22 g | 1-2% DSS via sondevoeding, continue toediening | Dag 40 verschijnt, verkorting van de dikke darm, gewichtsverlies, bloed in de ontlasting, diarree | Hoge vormsnelheid. Consistent met de kenmerken van het chronische colitismodel |
| dikke darmkanker | C57BL/6 muis, mannelijk, 8 weken, 21 g | 1%-2% DSS ad libitum gedurende 5 dagen gedurende 3 weken | 14 weken met verkorte colonlengte, gewichtsverlies, HE-kleuring en duidelijke ontsteking | Hoge vormsnelheid. Consistent met kenmerken van het colonkankermodel |
5.Productbestelling
Een goed verkopend product kost slechts 1/3 van de prijs van M*, is even efficiënt en we houden een grote voorraad aan.
Tabel 2. Productorder
| Productnaam | Cat.nr. | Maat |
| Dextransulfaatnatriumzout voor het modelleren van colitis MW: 36000~50000 | 60316ES25 | 25 gram |
| 60316ES60 | 100 gram | |
| 60316ES76 | 500 gram | |
| 60316ES80 | 1 kilo |
6. Gepubliceerde artikelen met onze reagentia
[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Verbetering van het platform voor medicijngebruik met injecteerbare mucoadhesieve hydrogel voor de behandeling van colitis ulcerosa[J]. chemical engineering journal.424(2021)130464.IF=16.744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. Van melk afkomstige extracellulaire blaasjes verlichten colitis ulcerosa door de darmimmuniteit te reguleren en de darmmicrobiota opnieuw vorm te geven[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 ALS=11.556
[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut commensal derived-valeriaanzuur beschermt tegen stralingsschade. Gut Microbes,.2020 .1–18.IF=10.245
[4]Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al.Oraal toegediende nucleotide-afgiftedeeltjes uit microfluïdica voor de behandeling van inflammatoire darmziekten[J]. Applied Materials Today.2021 Dec;25:101231 ALS=10.041
[5]Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. Identificatie van immuungerelateerde gensignatuur en voorspelling van CeRNA-netwerk bij actieve colitis ulcerosa [J]. Frontiers in Immunology. 2022; 13: 855645. ALS=7.561
[6]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al.Orale microbiota beïnvloedt de werkzaamheid en prognose van radiotherapie voor colorectale kanker in muismodellen[J].Cell reports.2021, 109886.IF=9.423
[7]Hao H, Zhang X, Tong Ik, Liu Q, et al.Lactobacillus plantarumEffect van extracellulaire blaasjes afkomstig van Vraag 7 over darmmicrobiota en colitis ulcerosa bij muizen[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7.561
[8]Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al.Eetbaar vogelnest verbetert door dextransulfaatnatrium geïnduceerde colitis ulcerosa bij C57BL/6J-muizen door het herstellen van de Th17/Treg-celbalans[J].Frontiers in Pharmacology.2021.632602.IF=7.561
[9]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. Piperlongumine verlicht colitis bij muizen en colitis-geassocieerde colorectale kanker[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885. ALS=7.561
[10]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Soja-isoflavonen verbeteren experimentele colitis door te richten op ERα/NLRP3-inflammasome-paden[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.IF=6.048
[11]Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. Het ontstekingsremmende effect van uit runderbotten afkomstige gelatinepeptiden bij LPS-geïnduceerde RAW264.7 Macrofagencellen en door dextransulfaatnatrium geïnduceerde C57BL/6-muizen[J]. Nutrients 2022, 14, 1479. ALS=5.717
[12] Wang S, Huang J, Bruinen KS, et al. Isosteviolnatrium verbetert door dextrannatriumsulfaat veroorzaakte chronische colitis door regulering van metabole profilering, macrofaagpolarisatie en NF-B-route[J]. Oxidatieve geneeskunde en cellulaire levensduur. 2022,4636618. ALS=5.076
7.Betreft Lezen
Oprichting van het Dextran natriumsulfaat (DSS) Ulceratieve Colitis Model
Oprichting van een door azoxymethaan (AOM) en dextransulfaatnatrium (DSS) geïnduceerd colitis-geassocieerd kankermodel
Het protocol voor Ulcerative Colitis Drosophila-modellering met behulp van dextrannatriumsulfaat (DSS)