Nucleïnezuur vormt de basis van alle moleculair-biologisch onderzoek. Bovendien is de kwaliteit van geëxtraheerd nucleïnezuur ook een van de belangrijkste factoren die het succes of falen van downstream-experimenten bepalen. Bij het ontwikkelen van reagentia voor de extractie van nucleïnezuur kunnen, naast conventionele chemische componenten, sommige kleine moleculaire nucleïnezuren of enzymen de extractie-efficiëntie aanzienlijk verbeteren of de interferentie van niet-doelstoffen verwijderen en belangrijke componenten worden bij de extractie van nucleïnezuur.

Over hulpstoffen voor de precipitatie van nucleïnezuur

Drager-RNA

Concept en functie van Drager-RNA

Carrier RNA, ook wel bekend als nucleïnezuurprecipitatiehulpmiddel in het Chinees. In het nucleïnezuurextractieproces zijn de centrifugebuizen die voor extractie worden gebruikt meestal gemaakt van polypropyleen. Er is statische elektriciteit op de buiswand, die nucleïnezuren zal adsorberen. Het gebruik van Carrier RNA in het extractie- en zuiveringsproces kan helpen nucleïnezuren het elektrostatische effect te verwijderen, ervoor te zorgen dat nucleïnezuren goed kunnen worden geadsorbeerd op de zuiveringskolom, de elutie-efficiëntie te verbeteren en zo de terugwinning van nucleïnezuren in het monster zoveel mogelijk te bereiken.

Veel voorkomende typen drager-RNA

Als hulpstof voor de precipitatie van nucleïnezuur kent Carrier-RNA verschillende typen, zoals PolyA-kaliumzout, totaal E. coli-RNA, totaal gist-RNA, tRNA, enz.

Veelvoorkomende problemen bij het gebruik van Drager-RNA

Kan Carrier RNA nog steeds worden gebruikt nadat het een tijdje op kamertemperatuur is geplaatst? Heeft de afbraak van Carrier RNA invloed op het gebruik ervan? Heeft Carrier RNA invloed op downstream experimenten?
Carrier RNA wordt opgelost in een RNA-protectant. De vloeibare Carrier RNA heeft weinig impact wanneer deze gedurende een korte periode (binnen 7 dagen) op 37°C of kamertemperatuur wordt geplaatst. In essentie is Carrier RNA een fragment in het bereik van 500 nt tot 1000 nt. Lichte degradatie heeft geen invloed op normaal gebruik. Voor downstream-toepassingen zoals fluorescerende kwantitatieve PCR heeft Carrier RNA geen effect op de Ct-waarde. Voor downstream-toepassingen zoals NGS kan het worden toegevoegd op basis van de werkelijke behoeften.

Productintroductie van Drager-RNA

Yeasen's Carrier RNA is RNA afkomstig van gist. Er zijn geen residuele DNase of RNase enzymen en het residuele gehalte van eiwitten en DNA is extreem laag. Het kan worden gebruikt in experimenten zoals virale nucleïnezuurextractie en sporen-DNA-extractie. De geëxtraheerde nucleïnezuren kunnen worden gebruikt in daaropvolgende experimenten zoals RT-PCR en RT-qPCR. Het product is verkrijgbaar in vloeibare en gevriesdroogde poederformuleringen voor handig direct gebruik, langeafstandstransport en opslag.

Productnaam	Product Nummer	Specificatie	Opslagcondities en houdbaarheid
Drager-RNA, 6 μg/μL	19701ES	1 ml / 5 ml / 100 ml	Bewaren bij -25 tot -15 °C. Houdbaarheid 2 jaar.
Drager-RNA-poeder, 216 μg/tube	19703ES	1 buis / 100 buis / 1000 buis	Bewaren bij kamertemperatuur. Houdbaarheid 2 jaar.
Drager-RNA-poeder, 310 μg/tube	19704ES	1 buis / 100 buis / 1000 buis	Bewaren bij kamertemperatuur. Houdbaarheid 2 jaar.

Lineaire acrylamide-oplossing

Concept en functie van lineaire acrylamide-oplossing

Lineair acrylamide, met de Engelse naam Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide, afgekort als LPA), is een coprecipitant die helpt bij het neerslaan van nucleïnezuren tijdens het zuiveringsproces van nucleïnezuren.

Kenmerken van lineaire acrylamide-oplossing

Het is een neutrale drager en van niet-biologische oorsprong. Daarom bevat het geen potentiële nucleïnezuur- of nucleasecontaminatie.

Het verstoort de A260/A280-waarden niet en remt de polymerase- en restrictie-endonuclease-activiteiten niet.

Het is compatibel met andere daaropvolgende toepassingen in de moleculaire biologie, zoals PCR en enzymatische vertering.

Het kan helpen bij het neerslaan van DNA en RNA (inclusief Oligo) op picogramniveau of hoger. De herstelbare fragmentlengte is meer dan 20 nucleotiden en zowel enkelstrengs als dubbelstrengs nucleïnezuren zijn toepasbaar.

Productintroductie

Productnaam	Product Nummer	Specificatie	Opslagcondities en houdbaarheid
Lineaire acrylamide-oplossing (5 mg/ml)	10408ES	1 ml	Opgeslagen bij 4 °C. Houdbaarheid is 3 jaren.

Hulpenzym voor extractie van nucleïnezuur

RNase A

Concept en functie van RNase A

Ribonuclease A (RNase A) breekt als endoribonuclease specifiek cytosine (C) of uracil (U) residuen af op enkelstrengs RNA. De meest voorkomende toepassing van ribonuclease A (RNase A) is het verwijderen van RNA tijdens de bereiding van plasmide-DNA of genomisch DNA. Daarnaast kan dit product ook worden gebruikt in moleculair biologische experimenten zoals RNase-beschermingsassays en RNA-sequentieanalyse.

Kenmerken van RNase A

RNase A is afkomstig van runderpancreas. Er is geen contaminatie van endo- en exonuclease deoxyribonuclease. Het kan direct worden gebruikt zonder voorverwarmen en is bestand tegen omgevingen met hoge temperaturen.

Productintroductie

Productnaam	Product Nummer	Specificatie	Opslagcondities en houdbaarheid
RNase A (100 mg/ml)	10406ES	1 ml	Bewaren bij -20°C. Houdbaarheid 2 jaar.
RNase A (10 mg/ml)	10405ES	1 ml	Bewaren bij kamertemperatuur.Houdbaarheid is 1 jaren.
Ribonuclease A (RNase A), uit runderpancreas	10407ES	100mg/1g	Bewaren bij kamertemperatuur. Houdbaarheid 2 jaar.

Desoxyribonuclease I (DNase I)

1. Concept en functie van DNase I

Deoxyribonuclease I (DNase I), een endonuclease die in verschillende cellen en weefsels voorkomt, richt zich op en splitst de fosfodiësterbinding naast pyrimidines, waardoor polynucleotiden worden geproduceerd met een fosfaatgroep aan het 5'-uiteinde en een hydroxylgroep aan het 3'-uiteinde. Het gemiddelde minimale verteringsproduct is een tetranucleotidepolymeer. DNase kan verschillende vormen van DNA katalyseren, zoals enkelstrengs DNA, dubbelstrengs DNA en zelfs chromatine (waarvan de splitsingssnelheid wordt beïnvloed door histonen). In experimenten in de moleculaire biologie wordt het vaak gebruikt om DNA van eiwitten te verwijderen of om inkepingen in DNA te introduceren om gelabelde basen in DNA te voegen.

2. Kenmerken van DNase I

Het optimale werkbereik van DNase I is pH 7-8, en de activiteit ervan is afhankelijk van Ca²⁺ en kan worden geactiveerd door tweewaardige metaalionen zoals Co²⁺, Mijn²⁺, Zn²⁺, enz. 5 mM Ca²⁺ kan het enzym beschermen tegen hydrolyse. In aanwezigheid van Mg²⁺, dit enzym kan willekeurig elke plek op beide strengen DNA herkennen en knippen; terwijl in de aanwezigheid van Mn²⁺kan het beide strengen DNA tegelijkertijd herkennen en op vrijwel dezelfde plaats knippen.

3. Productintroductie

Productnaam	Product Nummer	Specificatie	Opslagcondities en houdbaarheid
Deoxyribonuclease I (DNase I) uit runderpancreas	10607ES	15KU/10×15KU	Bewaren bij -20°C. Houdbaarheid 2 jaar.
Deoxyribonuclease I (DNase I) uit runderpancreas	10608ES	25mg/100mg/1g	Bewaren bij -20°C. Houdbaarheid 2 jaar.

Proteïnase K

1. Concept en functie van Proteinase K

Proteinase K (Proteinase K) is een serineprotease met een breed scala aan splitsingsactiviteiten. Het relatieve molecuulgewicht is ongeveer 29,3 kDa en het kan de carboxyl-terminale peptidebindingen van alifatische aminozuren en aromatische aminozuren splitsen. Proteinase K heeft een breed scala aan toepassingen en kan worden gebruikt in experimenten zoals het voorbereiden van chromosomaal DNA voor gepulste-veldgelelektroforese, Western blotting en het verwijderen van nucleasen in DNA- en RNA-preparaten. Denaturerende middelen zoals SDS (1%) kunnen de activiteit ervan verhogen.

2. Kenmerken van proteïnase K

Afkomstig van een genetisch recombinante giststam.

Vrij van RNase en DNase.

Actief en stabiel in ureum en SDS.

Actief in een breed pH-bereik (pH 4,0 - 12,0), waarbij het optimale pH-bereik pH 7,5 - 9,0 is.

3.Productintroductie

Productnaam	Product Nummer	Specificatie	Opslagcondities en houdbaarheid
Proteïnase K	10401ES	100mg/1g/5g/100g	Bewaren bij 4°C. Houdbaarheid is 3 jaren.
Proteïnase K-oplossing (20 mg/ml)	10412ES	1 ml/10 ml/25 ml/500 ml	Bewaren bij 4°C. Houdbaarheid is 2 jaren.
Proteïnase K-oplossing (20 mg/ml)	10410ES	1 ml/10 ml/25 ml/500 ml	Bewaren bij 4°C. Houdbaarheid is 2 jaren.

RNA-stabilisator

RNA-stabilisatoroplossing voor dierlijke en plantaardige weefsels

1. Functie van RNA-stabilisatoroplossing voor dierlijke en plantaardige weefsels

RNases zijn wijdverspreid aanwezig in het milieu en zullen hoogstwaarschijnlijk het RNA afbreken in vers verzamelde monsters van dierlijke en plantaardige weefsels, bloed, lichaamsvloeistoffen, enz. De RNAsafe weefselstabilisator voor dierlijke en plantaardige weefsels (RNAsafe Tissue Stabilizer) is speciaal ontwikkeld om het RNA in verzamelde monsters te stabiliseren en te beschermen. Als niet-toxische oplossing kan het snel weefsel binnendringen en endogene RNases inactiveren.

2. Kenmerken van RNA-stabilisatoroplossing voor dierlijke en plantaardige weefsels

Zeer eenvoudig te bedienen: snijd verse weefsels in weefselblokken van de juiste grootte (≤0,5 cm) en dompel ze onder in 5 tot 10 keer het volume RNAsafe.

Lange stabilisatieperiode: Weefsels/cellen die met RNAsafe zijn geïnfiltreerd, kunnen gedurende 1 dag bij 37°C, gedurende 1 week bij kamertemperatuur, gedurende 4 weken bij 4°C en voor langdurige opslag bij -20°C/-80°C worden bewaard.

Brede downstream compatibiliteit: Het is compatibel met bijna alle RNA-isolatiemethoden, zoals HieffTM Total RNA Extraction Reagent (catalogusnummer: 10606ES60), en bijna alle commerciële RNA-extractiekits, inclusief de centrifugale kolom-extractiemethode en de magnetische kralenzuiveringsmethode.

Brede toepassing van materialen: Het kan worden gebruikt voor het conserveren van diverse dierlijke en plantaardige weefsels (zoals hersenen, hart, lever, alvleesklier, nieren, milt, testikels, spieren, stengels en bladeren van planten, enz.), en ook voor gist, weefselkweekcellen, enz.