HiActi™ Cytokinen gevalideerd in gekweekte organoïden

In 2021 worden organoïden vermeld als een belangrijk project van het nationale onderzoeks- en ontwikkelingsplan "14th Five-Year Plan". Organoïden zijn zo populair, en de manier om ze te verkrijgen is ook het middelpunt van de aandacht geworden. Verschillende organoïden vereisen verschillende cytokines tijdens de kweek. Door cytokines toe te voegen die specifieke signaalpaden bevorderen of remmen, kunnen stamcellen worden gedifferentieerd tot gewenste organoïden. Het meest klassieke cytokinekweekprotocol in organoïdenkweek is WNER (respectievelijk: Wnt-3a, Noggin, EGF en R-Spondins), en de toename of afname van de combinatie van deze 4 factoren kan worden toegepast op bijna alle organoïdenkweekexperimenten.

Cytokinen die vaak worden gebruikt in organoïdeculturen

R-Spodin 1

Functie: R-Spodin 1 behoort tot de Rspo-familie van Wnt-regulatoren, die 4 leden omvat, namelijk Rspo1-4. Deze familie is een micro-omgevingsfactor die volwassen stamcellen in meerdere organen in stand houdt. RSPO1 is een uitgescheiden activatorproteïne. Rspo-1 wordt tot expressie gebracht in bepaalde regio's van het zich ontwikkelende centrale zenuwstelsel en wordt ook aangetroffen in de bijnier, eierstokken, teelballen, schildklier en luchtpijp.

Als activator van het Wnt-signaleringspad speelt Rspo1 een rol in veel aspecten door Wnt-signalering te versterken. Het is een veelgebruikt groeimedium voor maag-epitheelorganoïden, dunne darm- en colonorganoïden, leverorganoïden, prostaatorganoïden, pancreasorganoïden en borstorganoïden. factor.

Wnt-3a

Functie: Wnt-3a behoort tot de Wnt-familie van signaaleiwitten en speelt een belangrijke rol bij het handhaven van de integriteit van embryonale en volwassen weefsels. De Wnt-familie is zeer geconserveerd en rijk aan cysteïne. Wnts bemiddelen het Wnt-signaalpad door te binden aan celmembraanreceptoren en/of door te binden aan aangrenzende celmembraanreceptoren. Het Wnt-signaalpad kan worden onderverdeeld in een canoniek pad en een niet-canoniek pad, één is betrokken bij het canonieke signaalpad gemedieerd door β-catenine, waaronder Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b en Wnt10a; de andere is niet Niet-canonieke signaalpaden afhankelijk van β-catenine, waaronder Wnt4, Wnt5a, Wnt6 en Wnt11. Wnt3a is het meest representatieve signaaleiwit van de Wnt-familie. Het komt veel voor en speelt een sleutelrol bij de regulering van pleiotrope cellulaire functies, waaronder zelfvernieuwing, proliferatie, differentiatie en beweeglijkheid.

EGF

Functie: EGF is een krachtige groeifactor die de ontwikkeling van meerdere epitheliale cellen, angiogenese, remming van maagzuursecretie, fibroblastproliferatie en kolonievorming van epidermale cellen in kweek stimuleert. EGF is een stichtend lid van de EGF-familie, waartoe ook TGF-α, twee regulerende eiwitten (AR), β-celproteïne (BTC), epidermaal eiwit (EPR), heparinebindende EGF-achtige groeifactor (HB-EGF), epiproteïnen en neuregulinen (NRG1-6) behoren. Fysiologisch gezien bestaat EGF in verschillende lichaamsvloeistoffen, waaronder bloed, melk, urine, speeksel, sperma, pancreassap, hersenvocht en vruchtwater. EGF is een ligand met hoge affiniteit voor de EGF-receptor (ErbB). EGF bindt en induceert de dimerisatie van de EGF-receptor, wat leidt tot de activering van het proteïnetyrosinekinase-signaalpad, waardoor het EGF-familiesignaal wordt omgezet.

Noggin

Functie: Noggin kan TGF-β-familieliganden remmen en voorkomen dat ze zich aan de overeenkomstige receptoren binden.Noggin werd oorspronkelijk ontdekt als een antagonist van BMP-4 en bleek vervolgens de activiteit van andere BMP's (BMP-2, 7, 13 en 14) te moduleren. Noggin is zeer geconserveerd onder gewervelde dieren. Uitgescheiden Noggin-eiwitten reguleren de activiteit van botmorfogenetische eiwitten tijdens de ontwikkeling. Rol van de BMP-signaalantagonist Noggin bij de ontwikkeling van osteolytische botmetastasen van prostaatkanker.

bFGF/FGF-2

Functie: bFGF, een lid van de FGF-superfamilie van mitogene eiwitten. Het is een zeer specifieke chemotactische en mitogene factor voor veel celtypen en lijkt betrokken te zijn bij de hermodellering van beschadigd weefsel, zoals genezing van zweren, vasculaire reparatie, traumatisch hersenletsel. bFGF is een belangrijk onderdeel van het kweekmedium van menselijke embryonale stamcellen. Bovendien is het bFGF-eiwit een heparinebindend kationisch eiwit dat betrokken is bij verschillende pathologische aandoeningen, waaronder angiogenese en de groei van solide tumoren. Daarom wordt bFGF beschouwd als een doelwit voor chemopreventie en therapeutische strategieën tegen kanker. bFGF wordt vaak gebruikt als een belangrijk onderdeel van het kweekmedium van cellen, zoals het kweekmedium van menselijke embryonale stamcellen, serumvrij kweeksysteem.

FGF-10

Functie: Fibroblastgroeifactor 10 (FGF-10) is een heparinebindende groeifactor die tot de FGF-familie behoort. Eiwitten van deze familie spelen een centrale rol in de prenatale ontwikkeling, postnatale groei en regeneratie van verschillende weefsels door celproliferatie en -differentiatie te bevorderen. FGF-10 wordt afgescheiden door mesenchymale cellen en bindt aan extracellulaire FGF-BP, FGF-10 bindt en activeert bij voorkeur epitheliale FGF R2 (IIIb) en interageert zwak met FGF R1 (IIIb).

Qkwaliteit management systeem van HiActi™ cytokinen

Kwaliteitsmanagementsysteem

• Cytokinen zijn gecertificeerd volgens ISO 13485:2016 en worden vervaardigd via een volledig gesloten, ultraschoon productieproces om de reinheid en stabiliteit van de eiwitten te garanderen.
• Voldoen aan het systeem van "Good Manufacturing Practice for Drugs"
• Beschik over een Certificaat van Goedkeuring Kwaliteit (COA)
• Aseptische technologie en secundaire sterilisatiefiltratie
• Productiebasis voor grondstoffen voor farmaceutische producten

Kwaliteitsborging Management

• Een speciale persoon is verantwoordelijk voor het opleidingssysteem voor managementpersoneel
• Onderhouds- en kalibratieprocedures voor apparatuur vaststellen
• Grondstoffen- en leveranciersbeheersysteem
• Volledige batchproductieregistraties, batchinspectieregistraties, verpakkingsregistraties, etc.
• De kwaliteitsdocumenten zijn gecontroleerd en geïnspecteerd door QA
• Volledige batchproductie- en inspectieverslagen
• Validatie van analytische methoden

Kwaliteitscontrolesysteem

• Voldoen aan de derde algemene regel van de editie 2020 van de Farmacopee van de Volksrepubliek China: kwaliteitscontrole van grondstoffen en hulpstoffen voor de productie van biologische producten

Validatie van organoïdecultuur

Yeasen Cytokinen zijn aangetoond op menselijke tumororganoïden zoals longkanker, baarmoederhalskanker, eierstokkanker, alvleesklierkanker en darmkanker, en op normale organoïden zoals dunnedarmorganoïden van mensen en muizen.

Gerelateerde productinformatie