Gratis gids: Workflows van eiwitzuivering optimaliseren

Eiwitzuivering is een fundamentele techniek in de biochemie en moleculaire biologie, die uitgebreid wordt gebruikt in onderzoek, diagnostiek en therapeutische toepassingen. Om een ​​specifiek eiwit te bestuderen, is de eerste stap om het te isoleren en te zuiveren uit biologische monsters. Het bereiken van eiwit met een hoge zuiverheid kan echter een uitdaging zijn, gezien de diversiteit aan eiwitten en de complexiteit van biologische systemen. Inzicht in de kernprincipes van eiwitzuivering en het selecteren van de juiste technieken voor uw onderzoek kan uw workflow-efficiëntie en opbrengst aanzienlijk verbeteren.

De basisprincipes van eiwitzuivering

Eiwitzuivering is afhankelijk van verschillen in de fysieke en chemische eigenschappen van eiwitten, zoals grootte, lading, hydrofobiciteit en affiniteit voor specifieke liganden. Door deze verschillen te benutten, kunnen onderzoekers doeleiwitten effectief scheiden van andere biologische componenten, waardoor contaminatie wordt geminimaliseerd.

Hier zijn de belangrijkste technieken voor eiwitzuivering, gebaseerd op verschillende scheidingsmechanismen:

Elk van deze technieken kan worden geoptimaliseerd door de juiste materialen en kolommen te selecteren. De ideale methode hangt af van de eigenschappen van het eiwit en het zuiverheidsniveau dat vereist is voor downstream-toepassingen.

Optimaliseer uw eiwitzuiveringsworkflow met Yverlichten Biologie Producten

Bij Yeasen Biologie, wij bieden een breed scala aan hoogwaardige reagentia en materialen die zijn ontworpen om de zuivering van eiwitten te stroomlijnen. Of u nu complexe biologische monsters verwerkt of eiwitten met een hoge opbrengst en hoge zuiverheid nodig hebt, wij bieden hulpmiddelen om uw zuiveringsproces te verbeteren. Hier is een overzicht van enkele van onze belangrijkste producten om u te helpen uw zuiveringsworkflows te optimaliseren:

Zijn tag-eiwitzuivering (Cat.nr. 20502ES):

Bij recombinante proteïne-expressie is de Zijn tag (meestal 6×His) wordt veel gebruikt vanwege zijn kleine formaat, lage immunogeniciteit en minimale impact op de proteïnefunctie. Zijn tag-eiwitten kunnen efficiënt worden gezuiverd met behulp van affiniteitsharsen die gechelateerd zijn met nikkelionen, zoals Ni-NTA-harsen. HisSep Ni-NTA Agarose Hars (Cat#20502ES) geleverd door Yverlichten Biologie gebruikt sterk gecrosslinkte agarosegel als matrix, gecombineerd met de quad-gecoördineerde stikstof-triazijnzuur (NTA) ligand om stabiele nikkelionchelaten te vormen. Gecombineerde structuur zorgt voor efficiënte eiwitbinding en elutieprestaties.

Tag antilichaam affiniteitszuivering

Affiniteitszuivering van tag-antilichamen maakt gebruik van een hoge specifieke binding tussen het antilichaam en zijn specifieke tag om zuivering van het fusie-eiwit te bereiken. Veelvoorkomende tags omvatten Vlag, HA, Myc, enz. Door gebruik te maken van de overeenkomstige antilichaamaffiniteitsmedia kan het gewenste eiwit efficiënt worden geïsoleerd uit complexe monsters.

Yeasen Biologie biedt een verscheidenheid aan label-antilichaam-affiniteitszuiveringsproducten:

• Anti-vlag affiniteit Gel (Cat.nr. 20584ES):
  Bereid uit hoogwaardig muizen IgG2b monoklonaal antilichaam met 4% sterk gecrosslinkte agarosegel doorugh leveringskoppeling, het heeft een hoge Flag-tag fusie-eiwit laadcapaciteit, suGeschikt voor immunoprecipitatie en zuivering van Flag-tag-eiwitten. Yeasen.nl

• Anti-HA Affiniteitsgel(Cat#20586EN):
  Het is bereid uit hoogwaardige muizen-IgG1-monoklonale antilichamen en Sepharose 4B-gel via toevoerkoppeling en heeft een hoge laadcapaciteit voor HA-tag-fusie-eiwitten. Het is geschikt voor immunoprecipitatie en zuivering van HA-tag-eiwitten. Yeasen.met

• Anti-Myc Affiniteitsgel(Cat#20587EN）:
  Het hoogwaardige muizen-IgG1-monoklonale antilichaam is gekoppeld aan Sepharose 4B-gel, ontworpen voor de zuivering van Myc-gelabelde eiwitten, met een hoge specificiteit en een hoog bindingsvermogen.

• Anti-vlag immunomagnetische kralen(Cat.nr. 20565ES）:
  Deze immunomagnetische kraal is gekoppeld aan magnetische agarosemicrobolletjes met behulp van hoogwaardige muizenafgeleide IgG2b-monoklonale antilichamen, die Flag-gelabelde eiwitten snel kunnen zuiveren onder invloed van magnetische velden en geschikt zijn voor de zuivering van kleine monstergroottes.

Zuivering van antilichaamaffiniteit (Cat.nr. 36401ES):

Zuivering van antilichaamaffiniteit is een methode om de specifieke binding van een antilichaam aan zijn antigeen te gebruiken voor eiwitzuivering. Alkali-resistente recombinante proteïne A agarose zuiveringshars (Cat#36401ES) wordt vaak gebruikt als een antilichaam affiniteitszuiveringsmedium en wordt veel gebruikt voor antilichaamzuivering en -verrijking.

Proteïnase

In eiwitstudies worden proteasen gebruikt om fusietags te splitsen, waardoor de natuurlijke staat van het doeleiwit wordt hersteld. Het opnemen van deze proteasen in uw eiwitzuiveringsworkflow kan de kwaliteit en functionaliteit van uw doeleiwitten verbeteren, wat geavanceerde onderzoeks- en ontwikkelingsprojecten mogelijk maakt.

• Recombinante enterokinase (Cat#20401ES):

Enterokinase, ook bekend als enteropeptidase, is een serineprotease die specifiek de aminozuursequentie DDDDK afknipt. Yeasen's recombinante enterokinase wordt tot expressie gebracht in Escherichia coli en is vrij van tags, waardoor het geen interferentie veroorzaakt met downstream-toepassingen. Dit enzym is ideaal voor het verwijderen van fusietags van recombinante eiwitten, waardoor de productie van native eiwitten voor structurele en functionele studies wordt vergemakkelijkt.

• ikPNGase F (Cat#20407ES):

PNGase F is een amidase die specifiek de binnenste GlcNAc- en Asn-residuen van N-gekoppelde glycoproteïnen splitst. Yeasen's PNGase F wordt geleverd in een concentratie van 100.000 U/mL, wat een hoge activiteit biedt voor deglycosyleringsreacties. Dit enzym is cruciaal voor het bestuderen van glycoproteïnestructuren en -functies, omdat het N-gekoppelde glycanen verwijdert zonder de peptide-ruggengraat aan te tasten.

• Recombinant trypsine (MS-SAFE) (Cat#20416ES):

Trypsine is een serineprotease die peptidebindingen aan de carboxylzijde van lysine- en arginineresiduen verbreekt. Yeasen's recombinant trypsine is MS-SAFE, wat betekent dat het geschikt is voor massaspectrometrietoepassingen vanwege de hoge zuiverheid en minimale autolytische activiteit. Dit enzym is ideaal voor proteomische studies, waaronder eiwitvertering voor massaspectrometrieanalyse.

Zuivering Methode	Reagens type	Producttype	Aanbevolen producten
Gelfiltratie	Dextraan Gel Chromatografie	Ontzoutende vulstoffen Ontzouten van voorgepakte kolommen Ontzouten Zwaartekrachtkolommen Spinkolommen	Ontzoutingskolom G25 M(Cat.nr. 20590ES） Spin-ontzoutingskolom, 0,5 ml (Cat.nr. 20599ES） Zwaartekracht-ontzoutingskolom, 8.3 ml (Cat.nr. 20741ES）
	Agarose Gel Chromatografie	Vulmiddel Voorgepakte kolommen	Geldex 200 PG Hoge Resolutie Agarose Gel Chromatografie Verpakking (10-600 kDa) (Cat#20598ES) Geldex 200 PG Chromatografiekolom (Cat.nr. 20593ES）
Ionenuitwisseling	Anionische uitwisseling Chromatografie	Vulmiddel Voorgepakte kolommen	Q Agarose HP (Q Sterke Anionenuitwisselingschromatografie Verpakking HP) (Cat.nr. 20460ES) Q HP sterke anionenuitwisseling voorgepakte kolom, 5 ml (Cat.nr. 20462ES)
	Kationische uitwisselingschromatografie		SP Agarose HP (SP Sterke Kationenuitwisselingschromatografie Pakking HP) (Cat#20463ES) SP HP sterke kationenuitwisselingskolom, voorgepakt, 5 ml (Cat.nr. 20465ES)
Hydrofobe interactiechromatografie	Zwak hydrofoob Chromatografie	Vulmiddel Voorgepakte kolommen	Hoge resolutie butyl zwak hydrofoob chromatografiemedium (Cat#20484ES) Butyl HP zwak hydrofobe chromatografie voorgeladen kolom, 5 ml (Cat.nr. 20485ES)
	Sterk hydrofoob Chromatografie		Hoge resolutie fenyl sterk hydrofoob chromatografiemedium (Cat#20486ES) Phenyl HP Sterk Hydrofobe Chromatografie Voorgeladen Kolom, 5 ml (Cat#20487ES)
Affiniteitszuivering	Zijn-tag Eiwit zuivering	Hars Voorgepakte kolommen Zuiverende magnetische kralen	His-tag Proteïne Agarose Zuiveringshars (Cat.nr. 20502ES) His-tag eiwitzuiveringskolom, voorgeladen, 5 ml (Cat.nr. 20504ES) His-tag eiwitzuiveringsmagnetische kralen (Cat#20561ES)
	BTW-tag Eiwit zuivering	Hars Voorgepakte kolommen Zuiverende magnetische kralen	Glutathion-agarosehars (voor GST-gelabelde eiwitzuivering) (Cat.nr. 20507ES) GST-gelabelde eiwitzuiveringskolom, voorgeladen, 5 ml (Cat.nr. 20510ES) GST-gelabelde magnetische kralen voor eiwitzuivering (Cat.nr. 20562ES)
	MBP-tag Eiwit zuivering	Hars Voorgepakte kolommen	MBP-gelabelde eiwit sterk gecrosslinkte zuiveringshars (Cat#20515ES) MBP-gelabelde eiwitzuiveringskolom, voorgeladen, 5 ml (Cat.nr. 20517ES)
	StreptokokkenⅡ) Label Eiwit zuivering	Hars Voorgepakte kolommen	Strep(II) getagde proteïne-agarose zuiveringshars (Cat#20495ES)
	Bioti-tag Eiwit zuivering	Hars Voorgepakte kolommen Immunomagnetische kralen	Streptavidine Agarose Zuiveringshars (Cat#20512ES) Biotine Moleculaire Zuivering Voorgeladen Kolom, 5 ml (Cat#20514ES) Streptavidine (SAV) immunomagnetische kralen (Cat#47503ES)
	Tag-antilichaamaffiniteitszuivering	Gel Immunomagnetische kralen	Anti-vlag affiniteit zuiveringsgel (Cat.nr. 20584ES) Anti-HA Affiniteitszuiveringsgel (Cat.nr. 20586ES) Anti-Myc Affiniteitszuiveringsgel (Cat.nr. 20587ES) Anti-vlag immunomagnetische kralen (Cat.nr. 20565ES)
	Zuivering van antilichaamaffiniteit	Hars Voorgepakte kolommen Immunomagnetische kralen	Recombinant Proteïne A Agarose Zuiveringshars (Cat.nr. 36401ES) Proteïne G Agarose Zuiveringshars (Cat#36405ES) Proteïne A/G Agarose Zuiveringshars (Cat#36403ES) Proteïne A/G immunomagnetische kralen (Cat.nr. 36417ES)
	Andere antilichaamaffiniteitszuivering	Hars Voorgepakte kolommen	Endotoxineverwijderingshars met hoge efficiëntie (Cat.nr. 20518ES) Heparine-affiniteitszuiveringsmedium (Cat.nr. 20493ES)
其他产品	Proteasen	Tag splitsende enzymen Glycosidasen Enzymen van massaspectrometriekwaliteit	E.coli Expressed Recombinant Enterokinase (zonder label) (Cat.nr. 20401ES) Bovine trombine (hoge levensvatbaarheid, >2000 IE/mg) (Cat#20402ES) rTEV Protease Recombinant Tabak Etch Virus Protease (Cat#20403ES) PNGase F, N-Glycosidase F (100000 U/ml) (Cat.nr. 20407ES) Recombinant Trypsine (MS-SAFE) Recombinant Trypsine (Massaspectrometrie-kwaliteit) (Cat.nr. 20416ES)
	Verbruiksartikelen voor chromatografie	Zwaartekrachtstroom lege kolommen type Lege Kolommen YXK-kolommen Dialyse zakken	12 ml lege zwaartekrachtchromatografiekolom (Cat.nr. 20523ES) 5 ml Type C lege kolom (aangesloten op Akata, spuit of peristaltische pomp) (Cat.nr. 20526ES) YXK16/70 Chromatografie Lege Kolom (Cat#20443ES) Dialysezak van 27 mm (MWCO 50 kDa) (Cat.nr. 20534ES)

Conclusie: Pas uw workflow aan uw behoeften aan

Het optimaliseren van uw eiwitzuiveringsworkflow is cruciaal voor het bereiken van eiwitten met een hoge zuiverheid en hoge opbrengst voor uw onderzoek of toepassing. Door de zuiveringsprincipes te begrijpen en de juiste tools te selecteren, kunt u uw proces stroomlijnen en veelvoorkomende valkuilen vermijden. Yeasen Biology levert de hoogste kwaliteit reagentia en verbruiksartikelen voor alle fasen van eiwitzuivering. Zo bent u ervan verzekerd dat uw eiwitten zuiver, functioneel en klaar voor analyse zijn.

Wilt u meer weten over hoe onze producten uw eiwitzuiveringsproces kunnen verbeteren? Bezoek dan onze productpagina's of neem contact op met ons team voor gepersonaliseerde aanbevelingen.

Voor meer informatie of om te kopen, bezoek onze officieel wijBplaats.