Beschrijving
Productbeschrijving
Alkalische fosfatase kan de 5'-fosfaatgroepen van DNA en RNA verwijderen. Het wordt vaak gebruikt om de zelfligatie van vectoren te voorkomen. Bij moleculaire kloneringsexperimenten vereist DNA-ligase de aanwezigheid van fosfaatgroepen om DNA-ligatie te katalyseren. Na vertering met restrictie-enzymen behouden vectoren een fosfaatgroep op de splitsingsplaats. Na defosforylering door alkalische fosfatase mist het 5'-uiteinde van de vector echter een fosfaatgroep en kan het dus niet verbinden met zijn eigen 3'-uiteinde. Als gevolg hiervan wordt de zelfligatie van de vector, die anders bij voorkeur zou plaatsvinden in de ligatiereactie, voorkomen. Dit verhoogt de insertiesnelheid van het doelfragment. Bovendien kan alkalische fosfatase worden gebruikt om DNA-sjablonen te bereiden voor 5'-uiteindelabeling.
Dit product is een van garnalen afkomstige alkalische fosfatase die bijna alle fosfaatmonoesters kan afbreken. Het kan echter geen fosfaatdiesters of -triesters hydrolyseren. Het enzym werkt op de terminale defosforylering, ongeacht of de termini plakkerig of stomp zijn. SAP kan ook worden gebruikt om dNTP's af te breken in PCR-reacties, wat handig is voor latere sequentiebepaling en SNP-analyse.
Functies
- Verwijdering van fosfaatgroepen van DNA- en RNA-uiteinden. Voorkomen van zelfligatie van vectoren.
- Voorbereiding van DNA-sjablonen voor 5'-eindlabeling.
- Afbraak van dNTP's in PCR-reacties.
Toepassingen
- Moleculair Clonend
- DNA-sequentiebepaling
- SNP-analyse
Componenten
| Componenten nr. | Naam | 10322EN72 |
| 10322-A | Garnalen Alkalische Fosfatase (SAP) (1 U/µL) | 250 Ik |
| 10322-B | 10×SAP-buffer | 1 MIk |
Specificaties
| Het gen voor alkalische fosfatase van garnalen werd gekloond uit Pichia pastoris, afkomstig van Pandalus borealis. | |
| Kwaliteitscontrole | Vrij van ribonuclease- en deoxyribonucleaseverontreiniging. |
| Zuiverheid | ＞95% |
| Thermische inactivering | Incubatie op 65℃ gedurende 5 minuten resulteert in een volledig en onomkeerbaar verlies van activiteit. |
| Eenheid definitie | De hoeveelheid enzym die nodig is om 1 μg pUC19-DNA te defosforyleren, verteerd met HindIII (wat 5'-overhangen produceert) binnen 30 minuten bij 25℃ wordt gedefinieerd als één eenheid van activiteit. |
Opslag
De producten moeten worden bewaard bij -25~-15℃ voor 3 jaren.
Documenten:
Veiligheidsinformatieblad
10322ES-MSDS-HB.PDF
Handleidingen
10322_Manual_Ver. EN20250219_EN.pdf
Betaling en beveiliging
Uw betalingsinformatie wordt veilig verwerkt. We slaan geen creditcardgegevens op en hebben geen toegang tot uw creditcardinformatie.
Navraag
Misschien vind je het ook leuk
FAQ
Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van
Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.