S-Adenosylmethionine (S-Adenosylmethionine, SAM) is een hulpsubstraat dat betrokken is bij de methyltransferreactie, die in het lichaam is samengesteld uit adenosinetrifosfaat en methionine in de methionine-adenosyltransferase onder de werking van synthese. SAM wordt bereid in een oplossing van 10 mM HCl, 10% ethanol en pH 4 bij 25℃. Dit product wordt geproduceerd volgens GMP-procesvereisten en geleverd in vloeibare vorm.

Functies

• Gevalideerde, productspecifieke processen en analysemethoden
• Productspecifieke stabiliteit
• Documentatie volgt de toepasselijke GMP-richtlijnen
• AOF-productieproces en grondstoffen (TSE & BSE)
• Nitrosamine verklaring
• Regelgevende ondersteunende documenten beschikbaar
• Grootschalige productie

Toepassingen

• Enzymatisch cappingproces voor mRNA-vaccins en -therapieën
• Enzymatische methyleringen van biopolymeren

Specificaties

CAS-nr.	485-80-3
Formule	C15H23N6O5S+
Moleculair gewicht	399,44 g/mol
Zuiverheid (HPLC)	＞ 90%
Inhoud	32 mM ± 2 mM
Samenstelling (1X)	10 mM HCl, 10% ethanol pH 4 bij 25℃
Structuur

Componenten

Verzending en opslag

Het product wordt verzonden met droogijs en kan een jaar lang worden bewaard bij temperaturen van -15℃ ~ -25℃.

Cijfers

• Zuiverheidsbeoordeling

Figuur 1. De zuiverheid (HPLC) van het SAM-product kan meer dan 98% zijn (Figuur 1A) en de optische zuiverheid (ee, %) van de (S, S)-SAM-isovorm kan altijd ongeveer 70% zijn (Figuur 1B).

• Detectie van enzymresten

Figuur 2. Er werden geen enzymresten gedetecteerd door agarosegelelektroforese.

Een reactie van 20 µl in de buffer met 500 ng Hind III-digestie van λDNA en 2 µl S-adenosylmethionine (SAM) gedurende 4 uur geïncubeerd bij 37ºC resulteerde in geen verschil vergeleken met de controle (SAM vrij in het reactiesysteem) door middel van agarosegelelektroforese (Figuur 2A).Een reactie van 20 µl in de buffer met 500 ng pUC19-plasmide en 2 µl S-adenosylmethionine (SAM) gedurende 4 uur geïncubeerd bij 37ºC resulteerde in geen verschil vergeleken met de controle (SAM vrij in het reactiesysteem) door middel van agarosegelelektroforese (Figuur 2B).

• Functionele test en verificatie

Figuur 3 De capping-efficiëntie van Yeasen De post-transcriptionele cappingreactie zou dicht bij 99% kunnen liggen.

Een 20 µl-reactie in de buffer met 1 µg λDNA, 1 eenheid M. SssI (CpG Methyltransferase) en 160 µM S-adenosylmethionine (SAM) wordt 1 uur geïncubeerd bij 37°C. Het resulterende DNA is resistent tegen digestie met BstUI, zoals bepaald door agarosegelelektroforese (Figuur 3A). 10 μg RNA's werden gedenatureerd door incubatie bij 65°C gedurende 5 min voor capping. Een 20 μL post-transcriptionele capping-reactie werd opgezet en gedurende 2 uur geïncubeerd bij 37°C in een PCR-machine. Transcripten werden gezuiverd door magnetische kralen (Cat#12602). Vervolgens wordt de capping-efficiëntie gedetecteerd door LC-MS (Figuur 3B).