Figuur 3. Ligatie van ultra lange fragmenten. De resultaten tonen aan dat het aantal kolonies in 10923ES hoog is, met een positief percentage van 100%.A: Recombinante transformatieplaat. De molaire verhouding van de vector (21 kb) tot het insertfragment (4,5 kb) is 1:2.B: PCR-identificatie-elektroforese van het insertfragment, M:
Beschrijving
Hieff Clone™ Universal II One Step Cloning Kit is een onlangs verbeterde kloonkit.
De zorgvuldig geoptimaliseerde 2e generatie 2× Hieff Clone™ Universal II Enzyme Premix combineert het recombinante enzym en de buffer die nodig is voor de recombinante reactie met de toevoeging van een unieke recombinante enhancer om de efficiëntie van recombinant klonen aanzienlijk te verbeteren.
De kit kan worden gericht op het klonen van PCR-producten naar elke site van elke vector, compatibel met ongezuiverde PCR-producten, direct herstelde PCR-producten, lage concentratie van rubber herstelde producten, dit product kan het homologe arm GC-gehalte van 30%-70% van het gezamenlijke fragment opnieuw samenstellen. De vector was volledig gelineariseerd en homologe sequenties van het uiteinde van de gelineariseerde vector van 15-25 bp werden geïntroduceerd in het 5'-uiteinde van de positieve en omgekeerde PCR-primers van het ingevoegde fragment, zodat de 5'- en 3'-uiteinden van de PCR-producten van het ingevoegde fragment exact dezelfde sequentie hadden die respectievelijk overeenkomt met de twee uiteinden van de gelineariseerde vector. Onder invloed van recombinant enzym kan de recombinante reactie van PCR-product en gelineariseerde vector in slechts 5 minuten bij 50℃ worden voltooid. Het positieve kloneringspercentage kan meer dan 95% bedragen.
Functies
Eenvoudig: Kloon maximaal zes DNA-fragmenten in één enkele reactie.
Flexibel: dankzij de ontwerprichtlijnen kunt u elke gewenste vector samenstellen.
Efficiënt: Efficiënt voor het ligeren van één tot zeven fragmenten.
Toepassingen
Snel Klonen: Hiermee kunnen meerdere overlappende DNA-fragmenten naadloos aan elkaar worden gekoppeld in een isotherme reactie van 5 tot 50 minuten in één stap.
Gericht klonen; Plaatsgerichte mutagenese.
Specificaties
| Ligatie | Tot 7 fragmenten |
| Producttype | DNA-assemblage |
Componenten
| Componenten nr. | Naam | 10923ES05(5 ton） | 10923ES20(20 ton） | 10923ES50(50 ton） |
| 10923-A | 2 × Hieff KloonTM Universele II Enzym Premix | 50 μL | 200 μL | 500 μL |
| 10923-B | 500 bp controle-insert (25 ng/μL) | 5 μL | 5 μL | 5 μL |
| 10923-C | pUC 19 controlevector, gelineariseerd (50 ng/μL) | 5 μL | 5 μL | 5 μL |
Opslag
Dit product moet worden bewaard bij -25~-15℃ gedurende 1 jaren.
Cijfers
Ffiguur 1. 10 ng lage-input enkelvoudige fragmenten werden verbonden in de niet-reanimatie-ontvankelijke staat van het 6 μL kleine systeem. De resultaten toonden aan dat 10923ES betere prestaties had dan concurrerende producten, met een hoge verbindingsefficiëntie, meer kolonies en een positief percentage van 100%. AB: Klonenplaat. De molaire verhouding van drager (10 kb) tot insertfragment (1 kb) was 1:2. C: Elektroforesekaart geïdentificeerd door insertiefragment-PCR, M:
Figuur 2. Zes fragmenten (een totale lengte van 7,6 kb) werden gekloond in een plasmide van 11,6 kb. De resultaten toonden aan dat 10923ES betere prestaties had dan concurrerende producten, met meer kolonies en een positief percentage van 100%. AB: Kolonieplaat. De molaire verhouding van drager (11,6 kb) tot insertfragmenten was 1:2. C: Elektroforese-analyse van het insertiefragment, M:
Gerelateerde citaten en referenties:
[1] Zhang H, Shao S, Zeng Y, et al. Reversibele fasescheiding van HSF1 is vereist voor een acute transcriptionele respons tijdens hitteschok. Nat-celbiol. 2022;24(3):340-352. (IF:28.824)
[2] Xu Y, Yu Q, Wang P, et al. Een selectieve kleine-molecuul c-Myc-afbreker zorgt voor een krachtige regressie van dodelijke c-Myc-overexpressie-tumoren. Adv Wetenschap (Weinh). 2022;9(8):e2104344. (IF:16.806)
[3] Guan B, Jiang YT, Lin DL, Lin WH, Xue HW. Fosfatidinezuur onderdrukt autofagie door competitieve remming door binding van GAPC (glyceraldehyde-3-fosfaatdehydrogenase) en PGK (fosfoglyceraatkinase) eiwitten [online gepubliceerd vóór druk, 15 maart 2022]. Autofagie. 2022;1-15. (IF:16.016)
[4] He X, Li Y, Chen Q, et al. O-GlcNAcylatie en stabilisatie van SIRT7 bevorderen de progressie van alvleesklierkanker door de interactie tussen SIRT7 en REGγ te blokkeren [online gepubliceerd vóór de druk, 14 april 2022]. Celdood verschilt. 2022;10.1038/s41418-022-00984-3.(IF:15.828)
[5] Zhou T, Zhu X, Ye Z, et al. Lupus enhancer risk variant veroorzaakt dysregulatie van IRF8 via coöperatieve lncRNA- en DNA-methyleringsmechanismen. Nat. Gemeenschappelijk. 2022;13(1):1855. Gepubliceerd op 6 april 2022. (IF:14.919)
[6] Li T, Chen X, Qian Y, et al. Een synthetisch BRET-gebaseerd optogenetisch apparaat voor pulserende transgeenexpressie die glucosehomeostase bij muizen mogelijk maakt. Nat. Gemeenschappelijk. 2021;12(1):615. Gepubliceerd op 27 jan. 2021. (IF:14.919)
[7] Wu P, Zhang T, Liu B, et al. Mechanische regulatie van Peptide-MHC klasse I-conformaties bepaalt TCR-antigeenherkenning. Mol-cel. 2019;73(5):1015-1027.e7. (IF:14.548)
[8] Xiong L, Liu S, Chen S, et al. Een nieuw type DNA-fosforothioatie-gebaseerd antiviraal systeem in archaea. Nat. Gemeenschappelijk. 2019;10(1):1688. Gepubliceerd op 11 april 2019. (ALS:11.878)
[9] Jiang L, Wang Y, Xia A, et al. Een natuurlijke enkel-nucleotide polymorfismevariant in sulfietreductase beïnvloedt de zwavelassimilatie in maïs. Nieuwe Phytol. 2021;232(2):692-704. (IF:10.152)
Betaling en beveiliging
Uw betalingsinformatie wordt veilig verwerkt. We slaan geen creditcardgegevens op en hebben geen toegang tot uw creditcardinformatie.
Navraag
Misschien vind je het ook leuk
FAQ
Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van
Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.