Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix voor qPCR vertegenwoordigt een verbeterde versie van de Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix voor qPCR (gDNA Digester Plus). Het is ontworpen om te voldoen aan de eisen van het uitvoeren van zowel reverse transcriptie- als genoomverwijderingsreacties in één enkele buis. Bovendien stroomlijnt het het reactieproces, verkort het de reactietijd aanzienlijk en verhoogt het de opbrengst van het reverse transcriptieproduct. De 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix omvat alle essentiële reagentia voor de reverse transcriptiereactie. Tijdens de reactie hoeft u het alleen maar aan te vullen met de gDNA Remover Mix, template-RNA en water om de initiële streng cDNA efficiënt te synthetiseren en tegelijkertijd genomische DNA-verontreiniging te elimineren. Dit product is zeer geschikt voor de reverse transcriptie van ingewikkelde RNA-templates en blijkt zeer effectief voor reverse transcriptie waarbij schaarse templatehoeveelheden en genen met weinig kopieën betrokken zijn.

Het reverse transcriptieproduct dat door dit specifieke product wordt gegenereerd, is volledig compatibel met zowel de probe-based als dye-based qPCR-methoden. Voor probe-based qPCR raden we aan om Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211) te gebruiken, terwijl voor dye-based qPCR Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184) de aanbevolen keuze is voor high-performance genexpressieanalyse.

Het is echter belangrijk om op te merken dat het reverse transcriptieproduct dat door dit product wordt geproduceerd, niet geschikt is voor latere toepassingen, zoals de amplificatie van lange fragmenten. Als u efficiënte reverse transcriptie voor deze doeleinden nodig hebt, raden wij u aan de Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149, Cat#11150) te gebruiken.

Functies

• 5 minuten RT

• Geïntegreerde RT- en gDNA-vertering in één buis

Toepassingen

• RT-qPCR
  
• Antisense RNA-synthese

Specificaties

Componenten

Verzending en opslag

Het product wordt verzonden met droogijs en kan 12 maanden bewaard worden bij -15℃ ~ -25℃.

Gebruiksaanwijzing

Dooi de 11151-A/B/C componenten op ijs, voorzichtig schudden en grondig mengen elk reagenscomponent. Assembleer vervolgens het volgende componenten in een RNase-vrije buis:

Tabel 1: Reactievoorbereiding

*Wij raden aan om niet meer dan 2 μg te gebruiken als totale RNA-invoerhoeveelheid. In geval van lage expressieovervloed van het doelgen, kan de totale RNA-invoer worden verhoogd tot maximaal 5 μg.

Tabel 2: Reactieprotocollen

*Dit proces omvat zowel omgekeerde transcriptie als gDNA-vertering.

Het reverse transcriptieproduct is geschikt voor direct gebruik in qPCR-reacties of kan voor een korte periode worden bewaard bij -20°C. Voor langdurige opslag raden we aan om het te aliquoteren en te bewaren bij -80°C om meerdere vries-dooicycli te voorkomen.

Voorzorgsmaatregelen:

1. Alle procedures moeten op ijs worden uitgevoerd, waarbij uiterste zorgvuldigheid moet worden betracht om RNase-besmetting te voorkomen.

2. Zorg voor uw veiligheid en welzijn door een laboratoriumjas en wegwerphandschoenen te dragen.

3. Dit product is uitsluitend bedoeld voor wetenschappelijk onderzoek en mag niet op andere wijze worden gebruikt.