MicroRNA, een klasse van niet-coderende RNA's met een lengte van ongeveer 22 nt, is wijdverbreid en speelt een zeer belangrijke rol bij het reguleren van genexpressie in planten en dieren. Deze kit gebruikt de SYBR Green I chimere fluorescentiemethode voor de kwantitatieve detectie van miRNA-fluorescentie. De 2×Hieff™ miRNA Universal qPCR Master Mix is ​​een nieuwe generatie premix fluorescerende kwantitatieve PCR-detectiereagens die speciaal is ontwikkeld voor de kwantitatieve detectie van miRNA. Het bevat speciale ROX Passive Reference Dye. Geschikt voor de meeste qPCR-instrumenten, het is niet nodig om de concentratie van ROX op verschillende instrumenten aan te passen, voeg gewoon primers en sjablonen toe bij de voorbereiding van het reactiesysteem dat kan worden versterkt. De DNA-polymerase gebruikt chemisch gemodificeerde hitte-geactiveerde polymerase, gecombineerd met een speciaal buffersysteem, om de reactie specifieker, gevoeliger te maken en kan nauwkeurig worden gekwantificeerd in een breder bereik.
Dit product wordt aanbevolen voor gebruik met onze Hifair™ miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Tailing) (Cat.nr. 11148) om optimale experimentele resultaten te verkrijgen.

Functies

• Platformbreed: Geen noodzaak om de ROX-concentratie te wijzigen bij gebruik van vooraf gemengde kleuren
• Hoge gevoeligheidsdetectiegraad: 10 pg DNA kan worden gedetecteerd
• Goede versterkingsprestaties: Uitstekende versterkingsefficiëntie
• Hoge specificiteit: in staat om verschillen tussen enkele basen tussen miRNA's in dezelfde familie te onderscheiden

Toepassingen

• Genexpressie

Specificaties

Componenten

Opslag

Het product moet gedurende 1 jaar bewaard worden bij een temperatuur van -25℃ ~ -15℃.

Cijfers

Figuur 1. Goede versterkingsprestaties: uitstekende versterkingsefficiëntie.

De genen miR-let-7b-5p, miR-let-7c-5p, miR-let-7e-5p en miR-let-7f-5p werden versterkt met behulp van menselijke 293T-cellen en muizenlever-totaal-RNA als templates.Uit de resultaten bleek dat de Hifair™ miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat.nr. 11148ES) in vergelijking met soortgelijke producten overeenkwam met het reactiesysteem van de Hieff™ miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix (Cat.nr. 11171ES) met uitstekende prestaties.

Figuur 2. Hoge specificiteit: in staat zijn om verschillen tussen enkele basen tussen miRNA's in dezelfde familie te onderscheiden.

De menselijke hsa-let-7-familie heeft meerdere miRNA's, met weinig basen die van elkaar verschillen, of zelfs maar één baseverschil. Versterk deze miRNA's met verschillende primers en gebruik Formule 2- Δ CT x 100% berekende matching rate. De resultaten toonden aan dat nauw verwante subtype-familieleden effectief konden worden onderscheiden.