Beschrijving
CRISPR/Cas9 is een techniek waarbij RNA-gestuurde Cas-nuclease specifieke DNA-modificaties aanbrengt in gerichte genen, wat een verworven immuunverdedigingsmechanisme is dat is ontwikkeld door bacteriën en archaebacteriën als reactie op aanvallen door fagen en vreemde plasmiden. In dit systeem wordt de Cas9-nuclease geleid met kunstmatig geoptimaliseerde single guide RNA (sgRNA) om dubbelstrengs DNA (dsDNA) te knippen op de doellocatie, wat leidt tot DNA-breuken. DNA wordt gerepareerd met het niet-homologe end-joining- of homologie-gestuurde reparatiemechanisme in vivo, wat resulteert in frameshift-mutatie, vervanging of verwijdering van genen.
HifairTM Precision sgRNA Synthesis Kit gebruikt een T7 RNA polymerase mengsel om spCas9 sgRNA efficiënt te transcriberen. De kit bevat een specifieke sequentie die herkend wordt door het Cas9 eiwit en fungeert als een steiger. Een deel van de sequentie kan gedeeltelijk overlapt worden met de doelspecifieke sequentie die ontworpen is door de gebruiker. De complementaire strengen worden gevuld door DNA polymerase om dsDNA templates te genereren voor transcriptie. Met behulp van het meegeleverde reagens en door de gebruiker ontworpen specifieke DNA sequenties, kan de kit 20-100 μg functioneel sgRNA binnen 4 uur in een enkele buisreactie.
Functies
Hoge syntheseopbrengst:In een reactie in één buis gedurende 4 uur kan de opbrengst van sgRNA 20 - 100 μg bedragen.
Breed toepassingsgebied: Voor verschillende soorten sgRNA kunnen hoge opbrengsten worden behaald.
Hoge zuiverheid:Het gesynthetiseerde sgRNA heeft één enkele band.
Hoge activiteit:Het gesynthetiseerde sgRNA kan Cas9 effectief begeleiden bij het knippen van het doel-DNA.
Toepassingen
CRISPR/Cas-genbewerking
Componenten
| Componenten nr. | Naam | 11355ES05 | 11355ES25 | 11355ES50 | 11355ES60 |
| 11355-A | 10×sgRNA-enzymmix | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-B | 10×sgRNA-reactiebuffer | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-C | 2×Canace-enzymmix | 62,5 μL | 312.5 μL | 625 μL | 1,25 ml |
| 11355-D | Steiger sjabloon | 6,25 μL | 31,25 μL | 62,5 μL | 125 μL |
| 11355-E | NTP's (elk 25 mM) | 40 μL | 200 μL | 400 μL | 800 μL |
| 11355-F | Controle sgRNA Oligo (10 μM) | 2 μL | 10 μL | 20 μL | 40 μL |
Verzending en opslag
Dit product moet worden bewaard bij -25 ~ -15OC voor 2 jaren.
Cijfers
Figuur 1.De synthesehoeveelheid van sgRNA op verschillende tijdstippen
Figuur 2.De syntheseopbrengst van sgRNA met verschillende sequenties
Figuur 3.De zuiverheid van gesynthetiseerd sgRNA (bepaald met Agilent 2100)
Figuur 4.De grafiek van de splitsingsefficiëntie van sgRNA
Documenten:
Veiligheidsinformatieblad
11355_MSDS_Versie EN20250120.pdf
Handleidingen
11355_Handleiding_Ver.NL20240710.pdf
Betaling en beveiliging
Uw betalingsinformatie wordt veilig verwerkt. We slaan geen creditcardgegevens op en hebben geen toegang tot uw creditcardinformatie.
Navraag
Misschien vind je het ook leuk
FAQ
Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van
Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.