Beschrijving
Hieff™ Veelzijdigheid T4 DNA Ligase is een variant van T4 DNA Ligase. Dit enzym is geschikt voor het katalyseren van de ligatiereactie tussen cohesieve of stompe moleculen. Het is een enkelvoudig enzymproduct dat is ontworpen voor het verbinden van DNA-fragmenten en adapters tijdens het bibliotheekvoorbereidingsproces in next-generation sequencing (NGS). De Hieff® Veelzijdigheid T4 DNA Ligase is uitgebreid gevalideerd door middel van high-throughput sequencing en vertoont een uitzonderlijke kwaliteit.
Functie
- Hoge betrouwbaarheid
- Thermotolerant
Leer meer over de veelzijdige ontwikkeling van T4 DNA-ligase
Specificaties
| Bron | Recombinante E. coli |
| Opslagbuffer | 50 mmm Tris-HC1,100 mM KC1,0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50% glycerol, pH 7,5士0,2 bij 25℃ |
| Eenheid Definitie | In een ligatiereactiesysteem van 20 μL wordt de hoeveelheid enzym die nodig is om de ligatie van meer dan 50% van de DNA-fragmenten te katalyseren, wanneer 6 μg λDNA-Hind III gedurende 30 minuten bij 16°C reageert, gedefinieerd als 1 eenheid activiteit (E). |
Componenten
| Componenten | Naam | 12996ES60 60KU | 12996ES62 600KU |
| 12996-A | Hieff® Veelzijdige T4 DNA-ligase (600 U/µL) | 100 μL | 1000 μL |
| 12996-B | 10×T4 DNA-ligasebuffer | 500 μL | 3×1500 μL |
Opslag
Dit product moet gedurende 2 dagen bij -25~-15℃ worden bewaard. jaren.
Figuur
Laat een bericht achter als u informatie wilt over de prestatievergelijkingsgegevens tussen dit enzym en andere hoogwaardige thermostabiele en conventionele T4 DNA-ligasen.
Notities
1. Werk alstublieft met labjassen en wegwerphandschoenen，voor uw veiligheid.
2. Als er een kleine hoeveelheid neerslag in de buffer ontstaat, is dat een normaal verschijnsel. Keer de buffer om en meng hem grondig voordat u hem gebruikt.
3. Dit product is uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden.
Protocol
1. De huidige mainstream DNA-bibliotheekvoorbereidingskits die de op ligatie gebaseerde methode gebruiken, vereisen doorgaans geen zuiveringsstappen na eindreparatie en A-tailing. De DNA-fragmenten worden direct onderworpen aan adapterligatie zonder zuivering. Deze kit is compatibel met de mainstream Commercieel verkrijgbare eindreparatie- en A-tailingsystemen voor naadloze adapterligatie.
Zet de volgende reactie op in een microcentrifugebuis op ijs, meng voorzichtig door te pipetteren of te schudden, centrifugeer kort en verhit gedurende 15 minuten bij 20°C om het mengsel te inactiveren.
Tabel 1. Reactiesysteem voor adapterligatie
| Onderdeel | Volume(μL） | Eindconcentratie |
| dA-staart DNA | 60 | 1× |
| 10×T4 DNA-ligasebuffer | 10 | 0.1 μM-0.5 μM |
| 50% PEG6000 | 12* | 1 ng -400ng |
| DNA-adapter | 5** |
|
| 3~5*** |
| |
| Nucleasevrij water | omhoog tot 100 | - |
【Opmerking】*De 50% PEG6000-oplossing wordt niet meegeleverd in de kit, u dient deze zelf te bereiden
**Zie tabel 2 voor de Hoeveelheid adapter.
***De hoeveelheid T4 DNA Ligase kan indien nodig worden toegevoegd in de hoeveelheid van 3-5 μL.
2. De concentratie van de adapter heeft direct invloed op de ligatie-efficiëntie en de opbrengst van de bibliotheek. Overmatig gebruik van adapters kan resulteren in in meer adapterdimeren, terwijl een laag gebruik de verbindingsefficiëntie en bibliotheekproductie kan beïnvloeden. Tabel 2 geeft de aanbevolen adapterhoeveelheid weer voor verschillende hoeveelheden invoer-DNA.
Tabel 2. De aanbevolen adapterhoeveelheid voor 100 pg-1 μg Input DNA
| DNA invoeren | Concentratie |
| 0.1 ng | |
| 1 ng | 0,5 μM |
| 10 gram | 1 μM |
| 25 gram | 2 μM |
| 100ng~1000ng | 10 μM |
【Opmerking】：De hoeveelheid adapter Kan worden aangepast volgens de vereisten in de bovenstaande tabel.
Betaling en beveiliging
Uw betalingsinformatie wordt veilig verwerkt. We slaan geen creditcardgegevens op en hebben geen toegang tot uw creditcardinformatie.
Navraag
Misschien vind je het ook leuk
FAQ
Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van
Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.