Beschrijving
Tth DNA Polymerase is een hittebestendige DNA polymerase ontdekt bij de thermofiele bacterie Thermus thermophilus HB8. In aanwezigheid van Mg²⁺ vertoont dit enzym 5′-3′ DNA-polymerase-activiteit en 5′-3′-exonuclease-activiteit, maar mist 3′-5′-exonuclease-activiteit, waardoor het breed toepasbaar is voor PCR-amplificatiereacties. In aanwezigheid van Mn²⁺ vertoont het enzym sterke reverse transcriptase-activiteit bij temperaturen van 55-70°C, waardoor het geschikt is voor one-step RT-PCR-reacties.
Specificatie
Eenheid Definitie: Eén eenheid (E) activiteit wordt gedefinieerd als de hoeveelheid enzym die in 30 minuten bij 74 °C 10 nmol totale nucleotiden omzet in een zuur-onoplosbaar product, waarbij geactiveerd zalmsperma-DNA als template/primer wordt gebruikt.
Onderdeel
| Nee. | Naam | Maat | |
| 14607ES72 (250 stuks) | 14607ES80 (1250 Ik) | ||
| 14607-A | Tth DNA-polymerase (5 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
| 14607-B | 5×T-de RT-PCR Buffer | 1 ml | 4×1.25 ml |
| 14607-C | 10×T-de PCR Buffer (met Mg2+) | 500 μL | 2×1,25 ml |
| 14607-D | 50 mM Mg(OAc)2 | 250 μL | 1.25 ml |
| 14607-E | dNTP-mengsel (elk 10 mM) | 150 μL | 750 μL |
Verzending en opslag
Verzendingmet droogijs. Bewaren bij -20°C, met een houdbaarheid van 2 jaar.
Voorzorgsmaatregelen
1) Als er een kleine hoeveelheid neerslag in de buffer verschijnt bij het ontdooien, is dit een normaal verschijnsel. Keer het om en meng het grondig voor gebruik.
2) Draag voor uw eigen veiligheid en gezondheid een laboratoriumjas en wegwerphandschoenen tijdens de operatie.
3) Dit product is uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden!
Instructies
Aanbevolen PCR-reactieprocedure:
1.Voorbereiding van het reactiesysteem
| Naam | Volume (μL) |
| 10×T-de PCR Buffer (met Mg2+) | 5 |
| Tth DNA-polymerase (5 U/μL) | 0,5 |
| dNTP-mengsel (elk 10 mM) | 1 |
| Stroomopwaarts Inleiding 10μM | 2 |
| Stroomafwaarts Inleiding 10μM | 2 |
| Sjabloon-DNA | 50 pg- 1μg |
| ddH2O | naar 50 |
[Opmerking]: De hoeveelheden Tth DNA Polymerase, upstream en downstream primers en dNTP Mixture kunnen worden aangepast aan specifieke experimentele behoeften.
2. Cyclus instellen
| Stappen | Temperatuur°C) | Tijd | Cycli |
| Pre-denaturatie | 94 | 30 sec-5 min | 1 |
| Denaturatie | 94 | 30 seconden |
35
|
| Gloeien | 50-70 | 30 seconden | |
| Verlenging | 72 | 60 seconden/kb | |
| Laatste verlenging | 72 | 10 minuten | 1 |
[Opmerking]: De reactieomstandigheden kunnen worden aangepast aan specifieke experimentele vereisten.
Aanbevolen RT-PCR-reactieprocedure:
1. Voorbereiding van het reactiesysteem
| Naam | Volume (μL) |
| 5×T-de RT-PCR Buffer | 10 |
| Tth DNA-polymerase (5 U/μL) | 1.5 |
| 50 mM Mg(OAc)2 | 2.5 |
| dNTP-mengsel (elk 10 mM) | 1.5 |
| Stroomopwaarts Inleiding 10μM | 2 |
| Stroomafwaarts Inleiding 10μM | 2 |
| Sjabloon RNA | 50 pg- 1μg |
| ddH2O | naar 50 |
[Opmerking]: De hoeveelheden Tth DNA Polymerase, upstream en downstream primers en dNTP Mixture kunnen worden aangepast aan specifieke experimentele behoeften.
2.Cyclus instellen
| Stappen | Temperatuur (°C) | Tijd | Cycli |
| Omgekeerde transcriptie | 55-70 | 30 minuten | 1 |
| Pre-denaturatie | 94 | 30 sec-5 min | 1 |
| Denaturatie | 94 | 30 seconden |
35
|
| Gloeien | 50-70 | 30 seconden | |
| Verlenging | 72 | 60 seconden/kb | |
| Laatste verlenging | 72 | 10 minuten | 1 |
[Opmerking]: De reactieomstandigheden kunnen worden aangepast aan specifieke experimentele vereisten.
Betaling en beveiliging
Uw betalingsinformatie wordt veilig verwerkt. We slaan geen creditcardgegevens op en hebben geen toegang tot uw creditcardinformatie.
Navraag
Misschien vind je het ook leuk
FAQ
Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van
Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.