Beschrijving
HifairTM Lyo-klaar I Multiplex One Step RT-qPCR-kit(UDG plus) is een multiplex kwantitatieve PCR-kit op basis van RNA als template. Tijdens het experiment werden reverse transcriptie en kwantitatieve PCR in dezelfde buis uitgevoerd, wat de experimentele operatie vereenvoudigde en het risico op contaminatie verminderde.De Uniek buffer- en enzymontwerp zorgt ervoor dat het kan worden gebruikt bij de bereiding en het productontwerp van eenstaps RT-qPCR-lyofilisatiereactiesystemen.
In deze kit werd de eerste streng cDNA efficiënt gesynthetiseerd door hittebestendige HifairTM Reverse transcriptase en kwantitatief versterkt door UniconTM HotStart Taq DNA Polymerase. De kit bevat voornamelijk geoptimaliseerde ikyophiliseerbare buffer, enzymmix, enz. Bovendien worden de factoren toegevoegd die de niet-specifieke PCR-amplificatie effectief kunnen remmen en de amplificatie-efficiëntie van meerdere qPCR-reacties kunnen verbeteren, wat de amplificatie-efficiëntie kan garanderen en tot meerdere amplificatiereacties kan uitvoeren.
Deze kit is uitgerust met ikbeschermend die gebruikt kunnen worden voor lyofilisatie.
Specificaties
| Componenten nr. | 16645EN60 / 16645EN80 / 16645ES92 |
| Maat | 100 T / 1000 T / 10000 ton |
Componenten
| Naam | 16645ES60 (100T) | 16645ES80 (1.000 ton) | 16645ES92 (10.000 ton) | |
| 16645-A | 4×HifairTM Lyo-buffer | 600 μL | 6 ml | 60 ml |
| 16645-B | HifairTM Lyo-enzymmix | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
| 16645-C | Lyoprotectant | 800 μL | 8 ml | 80 ml |
Opslag
De product moet worden bewaard bij -25℃ ~ -15℃ gedurende 1 jaar. Herhaaldelijk invriezen en ontdooien moet worden vermeden.
Instructies
1. Reactie samenstelling:
| Componenten | Volume ((μL) | Eindconcentratie |
| 4×HifairTM Lyo-buffer | 6 | 1× |
| HifairTM Lyo-enzymmix | 1 | - |
| Lyoprotectant | 8 | - |
| Primermix (10 μM) | 1 | |
| Sondemix (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Sjabloon-RNA | 5 | - |
| DEPC-H2O | tot 25 | - |
Opmerking：Zorg ervoor dat u het mengsel goed mengt voor gebruik. Voorkom dat er te veel luchtbellen ontstaan door hevige trillingen.
2. Geoptimaliseerd fietsprotocol
(1) Standaard amplificatieprocedure
| Reactiefase | Temperatuur | Tijd | Cyclus | |
| 1 | Omgekeerde transcriptie | 50°CA | 1 | |
| 2 | Initiële denaturatie | 95°C | 5 mijn | 1 |
| 3 | Versterkingsreactie | 95°C |
| 45 cycli |
| 60°CB | 30 secC |
(2) Snel versterkingsprogramma
|
| Reactiefase | Temperatuur | Tijd | Cyclus |
| 1 | Omgekeerde transcriptie | 50°CA | 2 mijn | 1 |
| 2 | Initiële denaturatie | 95°C | 2 sec | 1 |
| 3 | Versterkingsreactie | 95°C |
| 45 cycli |
| 60°CB | 13 secC |
Opmerking:
a) Omgekeerde transcriptie: De temperatuur kan 42°C of 50°C selecteren gedurende 10-15 minuten.
b) Amplificatiereactie: De temperatuur wordt aangepast op basis van de Tm-waarde van de ontworpen primers.
c) Fluorescentiesignaalacquisitie: Stel de experimentele procedure in volgens de vereisten in de handleiding van het instrument.
3. Sollicitatie apparatuur
Uitrusting met Rox：ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Snel, StepOne™, StepOne Plus™
Uitrusting met Low Rox：ABI 7500, 7500 Snel, ViiA™7, QuantStudio™ 3 en 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
Uitrusting zonder Rox：
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Toegepaste Wetenschap LightCycler® 480, LightCycler® 2.0, Lightcycler® 96
Thermisch Wetenschappelijke PikoReal Cycler; Cepheïden SmartCycler®; Verlicht Eco-qPCR
Notities
Draag de benodigde PBM, zoals een labjas en handschoenen, om uw gezondheid en veiligheid te waarborgen!
Gebruik alstublieft RNasefree verbruiksartikelen voor het experiment.
Dit product is voor onderzoek alleen gebruiken!
Lyofilisatieprocedure
Deze kit kan direct worden gebruikt voor lyofilisatie, maar u kunt op basis hiervan ook hulpstoffen voor verschillende primers onderzoeken.De standaard lyofilisatieprocedure van dit reagens is als volgt:
| Proces | temperatuur | ingestelde tijd | duur | Vacuüm mbar |
| prelyofilisatie | -45℃ | 10 minuten | 60 minuten | —— |
| Initiële vriesdroogfase | -45℃ | 10 minuten | 60 minuten | 0,01 mbar |
| -40℃ | 10 minuten | 900 minuten | 0,01 mbar | |
| -35℃ | 10 minuten | 60 minuten | 0,01 mbar | |
| -30℃ | 20 minuten | 60 minuten | 0,01 mbar | |
| -20℃ | 20 minuten | 60 minuten | 0,01 mbar | |
| 0℃ | 20 minuten | 60 minuten | 0.01mbar | |
| druk opgebouwde test | ||||
| Analytische droogfase | 5 graden | 10 minuten | 20 minuten | 0,01 mbar |
| 10℃ | 10 minuten | 20 minuten | 0,01 mbar | |
| 15 graden | 10 minuten | 20 minuten | 0,01 mbar | |
| 20℃ | 10 minuten | 20 minuten | 0,01 mbar | |
| 25℃ | 10 minuten | 240 minuten | 0,01 mbar | |
| druk opgebouwde test | ||||
Betaling en beveiliging
Uw betalingsinformatie wordt veilig verwerkt. We slaan geen creditcardgegevens op en hebben geen toegang tot uw creditcardinformatie.
Navraag
Misschien vind je het ook leuk
FAQ
Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van
Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.