Beschrijving
Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) is een multiplex kwantitatieve PCR-kit op basis van RNA als template. Tijdens het experiment werden reverse transcriptie en kwantitatieve PCR in dezelfde buis uitgevoerd, wat de experimentele operatie vereenvoudigde en het risico op contaminatie verminderde.
In deze kit werd de eerste streng cDNA efficiënt gesynthetiseerd door hittebestendige Hifair™ Reverse Transcriptase en kwantitatief versterkt door UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase. De kit bevat voornamelijk geoptimaliseerde MP-buffer, enzymenmix. De bufferoplossing bevat al Mg2+ en dNTP Mix. Bovendien worden de factoren toegevoegd die effectief de niet-specifieke PCR-amplificatie kunnen remmen en de amplificatie-efficiëntie van meerdere qPCR-reacties kunnen verbeteren, wat de amplificatie-efficiëntie kan garanderen en tot meerdere amplificatiereacties kan uitvoeren. Het dUTP/UDG-systeem werd toegevoegd om het risico op aerosolverontreiniging effectief te voorkomen.
Functie
Functies
1. Ggrote veelzijdigheid: Het is geschikt voor qPCR-amplificatie en detectie van nucleïnezuren van pathogene micro-organismen, menselijke genomen, planten en andere soorten.
2. Hoge gevoeligheid: Het zorgvuldig geoptimaliseerde buffersysteem verbetert de detectiegevoeligheid van sjablonen met een lage concentratie tot 250 kopieën/ml.
3. dUP/UDG-systeem: dUTP/ Hitte-labiel UDG anti-vervuilingssysteem wordt geïntroduceerd om aerosolvervuiling van producten efficiënt af te breken, vals-positieve resultaten te verminderen en authentieke resultaten te garanderen.
4. Steuningaan snel programma: compatibel met 40min snelprogramma.
5. Super stabiliteit: stabielen bij 37℃ gedurende 14 dagen, 10 keer herhaaldelijk invriezen en ontdooien.
Specificaties
| Componenten nr. | 16901EN60 / 16901EN80 / 16901ES92 |
| Maat | 100 T / 1000 T / 10000 ton |
Componenten
| Naam | 16901ES60 (100T) | 16901ES80 (1.000 ton) | 16901ES92 (10.000 ton) | |
| 16901-A | 500 μL | 5 ml | 50 ml | |
| 16901-B | Hifair™ Enzymenmix | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
Opmerking: 1) 5×Hifair™ MP Buffer is de afkorting van Hifair™ Superieure Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer, die dNTP's, dUTP, Mg bevat2+, stabilisatoren en meer.
2) Hifair™ Enzymenmix bevat voornamelijk Hifair™ reverse transcriptase, UNICON™ HotStart Taq DNA-polymeren, RNase-remmer, En UDGase en dergelijke.
Opslag
Het product moet worden bewaard bij -25℃ ~ -15℃ gedurende 1 jaar. Herhaaldelijk invriezen en ontdooien moet worden vermeden.
Instructies
| Volume ((μL) | Eindconcentratie | |
| 5×Hifair™ MP-buffer | 5 | 1× |
| Hifair™ Enzymenmix | 1 | - |
| Primermix (10 μM) | 0,4 elk | 0,16 μM |
| Sondemix (10 μM) | 0,2 elk | 0.08 μM |
| 1-5 | - | |
| RNase-vrije H2O | tot 25 | - |
1. Reactie samenstelling:
Opmerking：Zorg ervoor dat u het mengsel goed mengt voor gebruik. Voorkom dat er te veel luchtbellen ontstaan door hevige trillingen.
A) Primerconcentratie: Inleiding mix inclusief multiplex primer, Afhankelijk van de situatie kan de optimale primerconcentratie tussen 0,1 en 1,0 μM liggen.
B) Sondeconcentratie: Sondemix met multiplex-sondelabelverschillen in fluorescerende groepen. Afhankelijk van de situatie kan de optimale sondeconcentratie tussen 0,05 en 0 liggen.5 μM.
C) Templateverdunning: qPCR is zeer gevoelig en het wordt aanbevolen om de template te verdunnen. De controle-Ct-waarde is geschikt tussen 20 en 35.
D) Systeemvoorbereiding: un head met filterelement. Vermijd kruisbesmetting en aerosolbesmetting.
2. Geoptimaliseerd fietsprotocol
(1) Standaard amplificatieprocedure
| Reactiefase | Temperatuur | Tijd | Cyclus | |
| 1 | Omgekeerde transcriptie | 50°CA | 1 | |
| 2 | Initiële denaturatie | 95°C | 5 mijn | 1 |
| 3 | Versterkingsreactie | 95°C | 15 sec | 45 cycli |
| 60°CB | 30 secC |
Opmerking：
a) Omgekeerde transcriptie: De temperatuur kan selecteren 50°C of 55°C gedurende 10-15 minuten.
b) Amplificatiereactie: De temperatuur wordt aangepast op basis van de Tm-waarde van de ontworpen primers.
c) Fluorescentiesignaalacquisitie: Stel de experimentele procedure in volgens de vereisten van de instrument handmatig.
(2) Snel versterkingsprogramma
|
| Reactiefase | Temperatuur | Tijd | Cyclus |
| 1 | Omgekeerde transcriptie | 50°C | 5 mijn | 1 |
| 2 | Initiële denaturatie | 95°C | 30 sec | 1 |
| 3 | Versterkingsreactie | 95°C | 5 sec | 45 cycli |
| 60°C | 20 sec |
Opmerking：Als de daadwerkelijke qPCR-detector snelle amplificatie ondersteunt, voer dan een voorafgaande test uit om dit te bevestigen.
3. Toepassingsapparatuur
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Snel, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 en 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；
Strategene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；
Roche Toegepaste wetenschap LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；
Thermisch Wetenschappelijke PikoReal Cycler; Cepheïden SmartCycler®; Verlicht Eco-qPCR; SLAN 96S, 96P.
Notities
Draag de nodige PBM, zoals een labjas en handschoenen, om uw gezondheid en veiligheid te waarborgen.!
Gebruik alstublieft RNasefree verbruiksartikelen voor het experiment.
Dit product is voor onderzoek alleen gebruiken!
Betaling en beveiliging
Uw betalingsinformatie wordt veilig verwerkt. We slaan geen creditcardgegevens op en hebben geen toegang tot uw creditcardinformatie.
Navraag
Misschien vind je het ook leuk
FAQ
Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van
Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.