Natuurlijk Proteïne A is een celwand-oppervlakte-eiwit dat voorkomt in Staphylococcus aureus, het lijkt op proteïne G dat is geïsoleerd uit de geslacht G of C Streptokokken, bind meest zoogdier IgG door interactie voornamelijk met de FC regio van immunoglobuline (Ig), maar verschillen in hun bindingsspecificiteit. Het kan worden gebruikt voor de scheiding en zuivering van een verscheidenheid aan antilichamen (monoklonale antilichamen en polyklonale antilichamen). Proteïne A en Proteïne G verschillen in hun bindingseigenschappen aan verschillende immunoglobuline-subklassen (zie Bijlage 1 voor details).
Dit product maakt gebruik van genetisch gemodificeerd proteïne A, dat niet alleen zijn Ig-affiniteitseigenschappen behoudt, maar ook het niet-belangrijke bindingsdomein van het natuurlijke proteïne zelf verwijdert om niet-specifieke binding te verminderen. SuRi rProtein A Agarose Resin, dat een sterk gecrosslinkte agarosegel is als matrix en gemodificeerd alkali-resistent recombinant proteïne A als ligand, heeft een hoge fysicochemische stabiliteit. Antilichamen met een hoge zuiverheid kunnen worden verkregen uit ascites-, serum- en kweekmediummonsters door middel van eenstaps affiniteitschromatografie met dit product, dat gemakkelijk te gebruiken is en veel wordt gebruikt.

Componenten

Specificaties

Verzending En Opslag

De producten worden geleverd met koelelementen.   Het kan stabiel worden opgeslagen bij 2~8℃ gedurende 5 jaar.

Instructies

1. Buffer voorbereiding

Het wordt aanbevolen om het volgende te doen Buffers moeten vóór gebruik worden gefilterd met een 0,22 μm of 0,45 μm filtermembraan. Balans-/bind-/wasbuffer: 0,15 M NaCl, 20 mM Na2 HPO4, pH 7,0

Elutiebuffer: 0,1 M glycine, pH 3,0

Neutraliserende buffer: 1 MTris-HCl, pH 8.5

2. Monstervoorbereiding

Ervoor zorgen Dat de steekproef oplossing heeft de gepast ionisch kracht En pH voor laden de kolom, of door door het serummonster, de ascites of de celkweekoplossing te verdunnen met een bind-/wasbuffer, of door het monster te dialyse met een bind/wasbuffer.

3. Kolomverpakking

Laad de SuRi rProtein A Giet de agarosehars in een geschikte chromatografiekolom, waarbij u erop let dat u geen luchtbellen krijgt.

4. Monsterzuivering

1) Balans: De chromatografische kolom is in evenwicht met een verbindend Buffer van 5 keer de kolom volume, Dus Dat de verpakking bevindt zich in hetzelfde buffersysteem als het doeleiwit en vervult de rol van bescherming van het eiwit.

2) Steekproef laden: De steekproef was geladen naar de goed uitgebalanceerd rProteïne A Agarose Hars naar ervoor zorgen vol contact tussen het doeleiwit en de hars, het herstel verbeteren snelheid van het doelproteïne en verzamel het effluent om getest worden.

3) Wassen: Wassen met 10-15 keer de kolom volume van de wassen Buffer, verwijderen de onzuiverheid eiwit tenzij specifiek geadsorbeerd, verzamel de wasoplossing.

4) Elutie: Elutie met 5-10 keer kolom volume van de elutie Buffer, verzamelen eluens, Dat is, de doel eiwit onderdeel.

5) CIP-reiniging En behoud: Algemeen gebruik 0,1-0,5 M NaOH groter dan 3CV, en de contact tijd is 15 mijn; Dan spoelen met 5CV balanceeroplossing tot neutraal. Ten slotte is het in evenwicht met 20% ethanol van 5 keer de kolom volume, En Dan opgeslagen  in 20%  ethanol  van de  dezelfde  volume  bij  4°C  naar  voorkomen  de  verpakking  van  wezen besmet met bacteriën.

5. SDS-PAGE-detectie

De monsters verkregen in de zuivering proces (inbegrepen origineel monsters, afvalwater componenten, wassen En elutiecomponenten, enz.) werden gedetecteerd door SDS-PAGE om het zuiveringseffect te bepalen.

Notities

1. Bewaar het product niet in de koelkast.
2. rProteïneAAgarosehars moet voor gebruik meerdere malen volledig worden omgedraaid, zodat de agarosehars gelijkmatig wordt gemengd.
3. Tijdens alle bewerkingen moet het monster bij 4°C of op ijs worden bewaard.
4. Voor uw eigen veiligheid en gezondheid verzoeken wij u om tijdens de operatie een labjas en wegwerphandschoenen te dragen.
5. Alleen voor onderzoeksdoeleinden.

Bijgevoegde tabel 1: Samenvatting van het bindend vermogen vanf eiwitten A en G naar Ig in verschillende soort

SuRi rProteïne Een Agarose Hars