Beschrijving
T7 RNA polymerase gebruikt dubbelstrengs DNA dat de T7 promotorsequentie (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') bevat als template en NTP's als substraten om RNA te synthetiseren dat complementair is aan de omgekeerde DNA-streng stroomafwaarts van de promoter. Zowel lineair dubbelstrengs DNA met stompe uiteinden of 5' overhangen kunnen dienen als template substraten voor T7 RNA polymerase, wat betekent dat gelineariseerde plasmiden of PCR-producten kunnen worden gebruikt als templates voor in vitro RNA-synthese.
Deze kit maakt gebruik van een sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) principe om resterend T7 RNA polymerase te detecteren. T7 RNA polymerase standaarden en testmonsters worden toegevoegd aan microtiterplaat wells die vooraf gecoat zijn met anti-T7 RNA polymerase antilichamen (36705-A). Verdunde biotine-gelabelde T7 RNA polymerase detectie antilichamen (36705-C) worden vervolgens toegevoegd, gevolgd door Streptavidine-HRP (SA-HRP) (36705-D), waardoor een antilichaam + antigeen + antilichaam-biotine + SA-HRP complex ontstaat. Na het wassen wordt TMB substraat (36705-H) toegevoegd voor kleurontwikkeling. TMB wordt gekatalyseerd door HRP om over te gaan van kleurloos naar blauw en uiteindelijk naar geel bij toevoeging van stop oplossing (36705-I). De intensiteit van de gele kleur is positief gecorreleerd met de hoeveelheid T7 RNA polymerase die in het monster is gedetecteerd.
Componenten
| Nee. | Naam | 36705ES48 | 36705ES96 |
| 36705-A | Met anti-T7 RNA-polymerase gecoate microtiterstrips | 48 T | 96T |
| 36705-B* | Standaard: T7 RNA-polymerase | 1 flesje | 2 flesje |
| 36705-C | Detectie Antilichaam：Biotine-geconjugeerd Antilichamen | 60 μL | 120 μL |
| 36705-D | Streptavidine-HRP | 30 μL | 60 μL |
| 36705-E | Verdunningsbuffer 1 | 25 ml | 45 ml |
| 36705-F | Wasbuffer Concenttarief (20×) | 25 ml | 50 ml |
| 36705-G | Verdunningsbuffer 2 | 15 ml | 30 ml |
| 36705-H | TMB-substraat | 8 ml | 15 ml |
| 36705-ik | Stop Oplossing | 5 ml | 10 ml |
| 36705-J | Plaatsealer | 3 elk | 5 elk |
*De standaard 36705-B is een gevriesdroogd poeder.
Compatibel met T7 RNA-polymerase: 10625, 10628 En 10629.
Validatiegegevens
Tabel 1. Lineariteitsbereik: 1~32 ng/ml ，R2=0,999 ，CV≤5%.
| Standaard | Betreft( ng/ml) | AVG( ng/ml) | Herstel(%) | CV% |
| Standaard 1 | 32 | 31.965 | 99,9% | 2,2% |
| Standaard 2 | 16 | 16.070 | 100,5% | 5,0% |
| Std3 | 8 | 7.812 | 97,7% | 2,1% |
| Standaard 4 | 4 | 4.192 | 104,8% | 0,8% |
| Standaard 5 | 2 | 2.020 | 101,8% | 3,5% |
| Std6 | 1 | 1.173 | 117,3% | 0,0% |
| Noord-Carolina | 0 | / | / | / |
Tabel 2. Hoge specificiteit
| Eiwit Naam | Betreft | Gedetecteerd of niet |
| Positief Ccontrole | 1 ng/ml | Gedetecteerd |
| Negatief Ccontrole | 0 ng/ml | nd |
| UltraNuclease | 10 μg/ml | nd |
| Zout Actieve UltraNuclease | 10 μg/ml | nd |
| DNase I | 10 μg/ml | nd |
| Muizen RNase-remmer | 10 μg/ml | nd |
| Vaccinia Capping Enzym | 10 μg/ml | nd |
| Anorganische pyrofosfatase | 10 μg/ml | nd |
| mRNA Cap 2 ´-O-methyltransferase | 10 μg/ml | nd |
| 1%BSA | 10 Mgram/ml | nd |
Tabel 3. LOQ: De kwantificeringslimiet voor dit product wordt bepaald door het verdunnen van het laagste concentratiepunt van de standaardcurve, waarbij de variatiecoëfficiënt (CV) bij de laagste concentratie minder dan 20% is. Dit wordt gedefinieerd als de kwantificeringslimiet, die 1 ng/mL is.
| Std6 theoretische waarde (ng/ml) | Gemiddelde testwaarde Std 6 (ng/ml) | Test herhalingen | CV% | Herstel |
| 1 | 0,858 | 24 | 12,6% | 85,8% |
Tabel 4. LOD: De detectielimiet van dit product is gedefinieerd als de standaardconcentratie die overeenkomt met de gemiddelde detectiewaarde van de negatieve controle (NC) plus twee keer de standaarddeviatie. Door 24 NC-standaarden te meten en het gemiddelde en de standaarddeviatie te berekenen, wordt de detectielimiet bepaald op 0,318 ng/mL.
| Gemiddelde waarde(OD） | SD(OD） | Gemiddelde waarde +2SD (OD) | Gemiddelde waarde +2SD (ng/ml) |
| 0,0527 | 0,0038 | 0,0604 | 0,3176 |
Verzending en opslag
Bewaren bij 2-8°C. De houdbaarheid is 1 jaar indien ongeopend en 6 maanden na opening.
Controleer bij ontvangst van het product of alle onderdelen compleet zijn en bewaar het product direct op de juiste bewaartemperatuur.
Betaling en beveiliging
Uw betalingsinformatie wordt veilig verwerkt. We slaan geen creditcardgegevens op en hebben geen toegang tot uw creditcardinformatie.
Navraag
Misschien vind je het ook leuk
FAQ
Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van
Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.