O câncer associado à colite (CAC) é o terceiro tumor maligno mais comum no mundo, com morbidade e mortalidade atrás apenas do câncer gástrico e hepático[1], Doença Inflamatória Intestinal (DII) pode aumentar a probabilidade de desenvolver câncer colorretal. A combinação de AOM e DSS ganhou popularidade devido à sua reprodutibilidade, potência, baixo custo e facilidade de uso. Este artigo destaca um protocolo para criação de modelo DSS-AOM para estudar a oncogênese de CACs.
Modelo animal
Camundongos BALB/c (7 semanas de idade, macho)
Material
DSS(
Preparação da solução
Água potável suplementada com DSS: Use água estéril para preparar a solução de DSS de 1-3%. Armazene a 4 °C até o uso.
Solução AOM: Dissolva AOM em WFI para obter uma solução estoque de 10 mg/mL. Aliquote e congelar a -20 °C. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento. No dia do uso, descongele a alíquota e dilua 1/10 com solução salina estéril.
Protocolo
- No dia 1, pese e marque os camundongos. Injete nos camundongos por via intraperitoneal 10 mg/kg de solução de AOM.
- Encha o suprimento de água das gaiolas dos camundongos com água. Calcule 7-10 mL de água por camundongo por dia. Alimentação por uma semana.
- Substituir a água potável por 2,5% de DSS por uma semana;
- Alimente com água potável regular por duas semanas;
- Repita os passos 3-4 3 vezes.
Fig1. Protocolo de modelagem de câncer colorretal AOM/DSS
Resultados de um modelo CAC bem-sucedido
Perda de peso com tratamento DSS
Fig 2. A mudança no peso corporal dos ratos
2、Pontuação de diarreia e pontuação de sangramento
Fig 3. Diarreia pontuação e pontuação de sangramento
3、Formação de tumores no cólon do rato
Figura 4. Os cólons inteiros representativos e o número de câncer de cólon
Figura 5. As expressões proteicas de COX-2, IL-6, β-catenina e caracol em modelos de camundongos com colite aguda e câncer colorretal induzido por azoximetano (AOM)/DSS (A) As seções do cólon foram coradas com H&E e os anticorpos indicados (B) A expressão proteica foi examinada por Western blot com os anticorpos indicados após a lise dos tecidos do cólon de dois camundongos de cada grupo, e a β-tubulina foi usada como controle de carga[2].
Links para este recurso
[1]Qun Wang,et al.O polissacarídeo de cártamo inibe o câncer colorretal em camundongos induzido por AOM/DSS por meio da regulação da polarização de macrófagos[J].Frontiers in Pharmacology.2021.761641[2]Jia-Rong Huang,et al.Piperlongumina alivia camundongo Colite e colite associada Colorretal Câncer[J].Fronteiras em Farmacologia.2020.586885
Caso de sucesso de modelagem com
Tabela 1 Construção de diferentes tipos de modelos de enterite com DSS
| Modelo | Amostras de modelagem | Plano de modelagem | Resultados da modelagem | Avaliação de uso |
| colite aguda | Camundongos BALB/c, fêmeas, 6-8 semanas, 25 g | 3%-5% DSS beba à vontade por 7 dias consecutivos | No dia 5 apareceu, o comprimento do cólon estava encurtado, coloração HE e a inflamação era óbvia | a velocidade de moldagem é rápida e o tempo é curto. Consistente com as características do modelo de colite aguda |
| Camundongos C57BL/6, machos, 8 semanas, 20 g | 3%-5% DSS por gavagem, administração contínua | Ocorre o dia 5, encurtamento do cólon, perda de peso, sangue nas fezes, diarreia | Alta taxa de mofo e curta duração. Consistente com as características do modelo de colite aguda | |
| colite crônica | Camundongo C57BL/6, macho, 8 semanas, 22 g | 1-2% DSS por gavagem, administração contínua | Dia 40 aparece, encurtamento do cólon, perda de peso, sangue nas fezes, diarreia | Alta taxa de moldagem. Consistente com as características do modelo de colite crônica |
| câncer de cólon | Camundongo C57BL/6, macho, 8 semanas, 21 g | 1%-2% DSS ad libitum por 5 dias durante 3 semanas | 14 semanas com cólon encurtado, perda de peso, coloração HE e inflamação óbvia | Alta taxa de moldagem. Consistente com as características do modelo de câncer de cólon |
Pordem do produto
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| Pproduto Nãoeu sou | UMartigo Nãoumber | Especificação |
| Sal de sódio de sulfato de dextrano (DSS), grau de colite MW:36000~50000 | 60316ES25/60/76/80 | 25 g/100 g/500 g/1 kg |
| Azoximetano (OMA) | 60751ES03/08/10 | 1 mg/5 mg/10 mg |
| MolPuro® Kit de DNA de fezes | 18820ES08/50/70 | 5 T/50 T/200 E |
| MolPuro® Kit de DNA de solo/fezes Mag48 FA | 18528ES48 | 48 T |
| MolPuro®Kit de DNA de solo/fezes Mag | 18526ES20/50/70 | 20 T/50 T/200 E |
| Kit de coloração de hematoxilina e eosina | 60524ES60 | 2×100 mL |
| Kit de teste de sangue oculto nas fezes e urina | 60403ES60 | 100T |
| Solução de coloração de ácido periódico de Schiff (AB-PAS) azul de Alcian | 60534ES50/60 | 6×50 mL/6×100 mL/ |
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- Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis modula a tolerância imunológica na colite por meio da via AhR-IDO1-Kyn ativada por L-lisina. Nat Commun. 2024 13 de fev;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.SE= 16,6
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