A cultura celular é a base de muitas aplicações de pesquisa, do desenvolvimento de medicamentos à terapia genética. No entanto, manter culturas saudáveis e proliferantes pode ser desafiador sem a abordagem e as ferramentas certas. Seja você um cientista experiente ou novo na cultura celular, otimizar cada etapa do processo pode fazer toda a diferença. Neste guia, mostraremos cinco dicas essenciais para garantir que suas culturas celulares prosperem, da digestão à prevenção de contaminação.
1. Aperfeiçoando a digestão celular
A digestão celular é uma etapa crucial em experimentos de cultura celular, facilitando o desprendimento de células da superfície da cultura e sua separação em uma suspensão de célula única para subcultura e análises subsequentes. Escolher a enzima de digestão correta pode melhorar a eficiência da separação celular, reduzir danos celulares e garantir um progresso experimental tranquilo. Para ajudar você a selecionar a enzima de digestão mais adequada para suas necessidades, compilamos um guia sobre vários produtos enzimáticos comumente usados e suas características. Você pode escolher o produto mais apropriado com base no tipo de célula, requisitos experimentais e aplicações posteriores.
Enzimas digestivas comuns
- Tripsina (usada para hidrolisar proteínas intercelulares)
- Tripsina recombinante (livre de contaminação de origem animal, adequada para aplicações biofarmacêuticas)
- Colagenase (usada para degradar fibras de colágeno, ideal para digestão de tecidos)
- Tripsina composta (como Accutase, que preserva melhor os antígenos da superfície celular)
- Alternativas à tripsina (como TrypLE™, perfeita para culturas de células sem soro)
- Dispase II (para separar vários tecidos e células).
Cada enzima tem suas aplicações e vantagens únicas, e selecionar a correta pode melhorar significativamente a eficiência experimental e a qualidade dos seus resultados.
| Nome do produto | Número do gato | Especificação |
| PerfCel™l Tripsina-EDTA (0,25%), não Vermelho fenol | 40123ES60 | 100 mL |
| PerfCell™ Tripsina - sem EDTA (0,25%), sem vermelho de fenol | 40124ES60 | 100 mL |
| PerfCell™ Tripsina (0,25%), vermelho de fenol | 40126ES60 | 100 mL |
| PerfCell™ Tripsina-EDTA (0.25%), Vermelho fenol | 40127ES60 | 100 mL |
| Tripsina 1:250 (pó) | 40101ES25 | 25 g |
| PerfCell™ Tripsina recombinante（pó） | 40512ES10/60 | 10 mg/100 mg |
| 20416ES60 | 100 µg | |
| Enzima PerfCel Tryzyme™ Express (1X), Vermelho Fenol | 40134ES60 | 100 mL |
| Enzima PerfCel Tryzyme™ Express (1X), não Vermelho Fenol | 40135ES60 | 100 mL |
| Solução de dissociação celular ACCUTASE | 40506ES60 | 100 mL |
| Dispase II | 40104ES60/80 | 100 mg/1 g |
2. Criando o ambiente de cultivo ideal
Uma cultura saudável começa com o ambiente certo. Isso inclui uma temperatura adequada, pH e meio ótimo para seu tipo de célula. A
Cultura de células sem soro surgiu como uma tecnologia fundamental na pesquisa biológica, garantindo repetibilidade, consistência e padrões éticos. Culturas celulares tradicionais dependem de soro bovino fetal (FBS), o que traz variabilidade em resultados experimentais e riscos éticos de origem animal. Para lidar com esses desafios, muitos pesquisadores estão cada vez mais optando por meios de cultura sem soro.
Na pesquisa imunológica, cultura de linfócitos desempenha um papel crucial, especialmente nas áreas de resposta imune, desenvolvimento de vacinas e imunoterapia contra o câncer. Como componentes centrais do sistema imune, os linfócitos requerem condições de cultura específicas para proliferar e ativar in vitro. A
Além disso, cultura organoide representa outro avanço importante na tecnologia de cultura de células. Organoides são estruturas celulares tridimensionais que podem simular tecidos humanos e funções de órgãos in vitro, fornecendo uma nova plataforma de pesquisa para modelagem de doenças, triagem de medicamentos e medicina regenerativa. A estrutura tridimensional dos organoides replica melhor a complexidade e as funções fisiológicas dos órgãos humanos e se tornou uma ferramenta importante para estudar o desenvolvimento de órgãos, mecanismos de doenças e respostas terapêuticas.
| Nome do produto | Número do gato | Especificação |
| Meio de cultura de células de inseto CelCulSF™（Sem soro） | 40140ES | 1000 mL |
| Meio de cultura celular CelCulSF™ 293（Sem soro） | 40141ES | 1000 mL |
| Meio de cultura de linfócitos CelCulSF™（Sem soro） | 40142ES | 1000 mL |
| Meio de cultura de células de hibridoma CelCulSF™（Sem soro） | 40143ES | 1000 mL |
| CelCulSF Célula-tronco mesenquimal（MSC）Meio de cultura（Sem soro） | 40144ES | 500 mL |
| Meio de cultura celular aderente CelCulSF™（Reduzido em soro） | 40145ES | 1000 mL |
| Cebrary® Meio de crescimento de organoides intestinais (camundongo) | 41426ES60/76 | 100/500 mL |
| Cebrary® Meio de crescimento organoide de câncer intestinal (humano) | 41427ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
| Cebrary® Meio de crescimento organoide de câncer gástrico (humano) | 41428ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
| Cebrary® Meio de crescimento organoide para câncer de fígado (humano) | 41429ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
| Cebrary® Meio de crescimento organoide para câncer de mama (humano) | 41430ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
| Cebrary® Meio de crescimento organoide para câncer de pulmão (humano) | 41431ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
| Cebrary® Esofágico Meio de crescimento de organoide cancerígeno (humano) | 41432ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
| Cebrary® Meio de crescimento organoide para câncer de ovário (humano) | 41433ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
| Meio de crescimento organoide para câncer de pâncreas Cebrary® (humano) | 41434ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
3.Transfecção eficiente para expressão genética de alta qualidade
A transfecção celular é uma técnica crucial na pesquisa biomédica, permitindo a introdução de ácidos nucleicos exógenos (como DNA, mRNA, siRNA e miRNA) em células para expressão gênica, silenciamento ou estudos funcionais. Com diversos tipos de células e ácidos nucleicos, selecionar o reagente de transfecção correto é essencial para experimentos bem-sucedidos.
Reagentes de transfecção química, incluindo formulações lipossomais, PEI e à base de fosfato de cálcio, cada um oferece vantagens únicas.
| Número do gato | Nome do produto | Ácido nucleico | Aplicativo |
| 40802ES | ADN | Reagente de transfecção de lipossomas de alto desempenho | |
| 40804ES | LV | Aumentar a capacidade de infecção lentiviral. | |
| 40806ES | Reagente de transfecção de siRNA/miRNA in vitro Hieff Trans® | siRNA, miRNA, ASO | Reagentes de transfecção específicos para siRNA e miRNA com alta eficiência de knockdown. |
| 40808ES | DNA, siRNA, miRNA | Reagente de transfecção de lipossomos atualizado que pode realizar transfecções de DNA e RNA em vários tipos de células, ainda mostrando bons efeitos em células difíceis de transfectar. | |
| 40809ES | mRNA | Reagente de transfecção específico de mRNA com alta eficiência de transfecção em uma variedade de tipos de células. | |
| 40815ES | ADN | Amplamente aplicável para expressão de proteínas e embalagem viral (forma de pó). | |
| 40816ES | Hieff Trans®Polietilenoimina Linear (PEI) MW40000（lise rápida） | ADN | |
| 40820ES | ADN | Reagentes de transfecção dedicados para embalagem viral, capazes de atingir maiores rendimentos para embalagem viral AAV e LV | |
| 40821ES | ADN | ||
| 40823ES | ADN | A mais alta eficiência de transfecção. Particularmente adequado para a produção de AAV em cultura de suspensão, produzindo maiores resultados. |
4. Criopreservando suas células para uso a longo prazo
O congelamento de células é uma técnica crucial para a preservação de células a longo prazo, servindo a propósitos como prevenção de contaminação, manutenção da consistência experimental, facilitação do transporte e estabelecimento de bancos de células. Os principais riscos durante o congelamento incluem formação de cristais de gelo e danos na solução. Para mitigar esses riscos, empregar protocolos de congelamento lento e descongelamento rápido é essencial. Crioprotetores como glicerol ou dimetilsulfóxido (DMSO) são comumente usados para reduzir a formação de cristais de gelo e o estresse osmótico.
A
| Nome do produto | Número do gato | Especificação |
| Congelamento de células de mamíferos | 40128ES50 | 5×10 mL |
| Congelamento de células de mamíferos | 40128ES60 | 100 mL |
| Congelamento de células de insetos | 40129ES50 | 5×10 mL |
| Congelamento de células de insetos | 40129ES60 | 100 mL |
| Meio de congelamento celular sem soro | 40151ES | 50 mL/100 mL |
| Meio de congelamento celular sem soro (sem DMSO) | 40152ES | 100 mL |
| Meio de congelamento celular sem soro (para células-tronco) | 40153ES | 100 mL |
| Meio de congelamento celular sem soro (para células-tronco, sem DMSO) | 40154ES | 100 mL |
5. Prevenção da contaminação para culturas saudáveis
Contaminação é um problema prevalente em cultura de células, frequentemente levando a resultados comprometidos e desperdício de tempo de pesquisa. Reconhecer os vários tipos de contaminação é essencial para prevenção e remediação eficazes.
Célula comum contaminantes
- Bactérias
- Fungos
- Micoplasma
- Protozoários
- manchas pretas
- Vírus
- espécies cruzadas
Medidas preventivas incluem o uso de antibióticos, desinfecção regular de equipamentos, adesão a técnicas estéreis e manutenção de áreas de trabalho limpas. Após a detecção de contaminação, geralmente é aconselhável descartar as culturas afetadas, a menos que sejam raras ou valiosas; nesses casos, medidas devem ser tomadas para eliminar o contaminante. É recomendado estabelecer linhas celulares de backup ou adquirir novas culturas.Em certas situações, tratamentos especializados visando contaminantes específicos podem auxiliar na restauração de culturas de células. Manter a higiene adequada, garantir a separação rigorosa de equipamentos e manter um ambiente estéril são cruciais para prevenir a contaminação e garantir experimentos de cultura de células bem-sucedidos.
| Tipo | Nome do produto | Número do gato | Especificação |
| Antibacteriano | Penicilina-Estreptomicina (100×), Adequado para cultura de células | 60162ES76 | 100 mL |
| 60230ES07/60 | 3.2/100 g | ||
| Sal de sulfato de gentamicina | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 g | |
| Metronidazol | 60223ES25/60 | 25/100 mg | |
| Antifúngico | Anfotericina B | 60238ES01/03 | 100 mg/1 g |
| Nistatina | 60219ES08 | 5 g | |
| 60231ES03/08 | 1/5 mg | ||
| Detecção de micoplasma | 40601ES10/20 | 10/20 ensaios | |
| Kit de detecção de micoplasma em uma etapa MycAway™ Plus-Color | 40612ES25/60 | 25/100 toneladas | |
| Remoção de micoplasma | MeucAway™ Spray (Pronto para uso) | 40605ES02/03/08 | 02/01/10×500 mL |
| MeucAway™ Tratamento (1000×) - Reagente para eliminação de micoplasma | 40607ES03/08 | 1/5 mL | |
| MeucAway™ Profilático (2000×) - Reagente para prevenção de micoplasma | 40608ES03/08 | 1/5 mL | |
| 40609ES60 | 100 mL | ||
| 40610ES60 | 100 mL |
Conclusão
Otimizar os processos de cultura de células é fundamental para produzir resultados confiáveis e reprodutíveis.Da seleção das enzimas certas para digestão à prevenção da contaminação, cada etapa do fluxo de trabalho importa. Ao incorporar reagentes e técnicas de alta qualidade da
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