Você ainda se incomoda com a baixa eficiência da recombinação homóloga de fragmentos múltiplos ou superlongos e com o pequeno número de colônias?

Ainda para o transportador ou fragmento é mais precioso, baixo rendimento, a fim de economizar matérias-primas, o uso de pequeno sistema de ligação de baixa concentração, mas a eficiência da ligação é baixa e incomodada?

Produto YEASEN: Melhoria significativa, baixa concentração, sistema pequeno e fragmentos ultralongos da eficiência de ligação, alta taxa de clonagem positiva, ajudam você a concluir facilmente o ligadura.

Comparação da clonagem em uma etapa com métodos tradicionais de clonagem por restrição enzimática

Método

Preparação do fragmento de inserção

Restrição de locais de restrição

Propriedade universal

Tempo de conexão

Taxa positiva

Técnica de clonagem recombinante rápida de uma etapa

Etapa 1 purificação

Nenhum

★★★★★

O tempo mais rápido foi de 5 min

Até 95%

A técnica de clonagem por digestão de restrição e ligação

Etapa 2 purificação

Sim

★★

passar a noite

Genes diferentes variam muito

Vantagem do produto

Orientação: 1-7 fragmentos de DNA clonagem em uma etapa.

Simples: vários fragmentos podem ser ligados em um tubo.

Rápido: Ligadura mais rápida em 5 min.

Alta eficiência: alta taxa de clonagem positiva.

Sistema pequeno: O sistema de ligação total pode ser tão baixo quanto 6 μL.

Excesso de comprimento: acima de 25 kb (comprimento do portador+fragmento) para ligação.

Desempenho Mostrar

  • Recombinação eficiente de um único fragmento de 6 μL em um pequeno sistema

Figura 1 10 ng de fragmentos únicos de baixa entrada foram ligados no estado de células receptivas não ressuscitadas do pequeno sistema de 6 μL.Os resultados mostraram que 10923ES teve melhor desempenho do que produtos concorrentes, com alta eficiência de ligação, mais colônias e uma taxa positiva de 100%. AB: Placa de conversão reconstituída. A razão molar de transportador (10 kb) para fragmento de inserção (1 kb) foi de 1:2. C: Identificação de PCR do fragmento de inserção. M: YEASEN 10505ES. Volume de transportador: 40 ng/6 μL Sistema de reação, condições de reação: 50℃, 15 min.

  • Recombinação eficiente de múltiplos fragmentos

Figura 2 Seis fragmentos (7,6 kb) ligados. Os resultados mostraram que 10923ES teve melhor desempenho do que produtos concorrentes, com mais colônias e taxa positiva de 100%. AB: Placa de conversão reconstituída. A razão molar de transportador (11,6 kb) para fragmento de inserção (7,6 kb) foi de 1:2. C: Identificação de PCR do fragmento de inserção. M: YEASEN 10505ES, comprimento de PCR 2,6 kb. Volume de transportador: 200 ng/20 μL Sistema de reação, condições de reação: 50℃, 50 min.

  • Recombinação eficiente de múltiplos fragmentos de baixa concentração

Figura 3 Ligue os fragmentos cinco e seis de baixa concentração separadamente. Os resultados mostraram que 10923ES exibiu conectividade estável em baixas concentrações, com uma alta contagem bacteriana e uma taxa de positividade de 100%. AB: Placa de Conversão Recombinante. CD: Imagem de eletroforese de identificação de PCR de fragmento de inserção, M: YEASEN 10505ES, comprimento de PCR 2,6 kb.

  • Estabilidade do reagente

Figura 4 Após ser colocado a 37℃ por 7 dias, os resultados mostraram que o 10923ES permaneceu estável na ligação dos fragmentos cinco e seis em baixas concentrações. AF: Placa de conversão recombinante. GH: Imagem de eletroforese de identificação de PCR de fragmento de inserção, M: YEASEN 10505ES, comprimento de PCR 2,6 kb.

Caso do cliente

  • Reorganização eficiente de pequenos sistemas

Fig. 5 10923ES foi ligado a um único fragmento em um Sistema de reação pequeno de 10 μL, com uma taxa positiva de 100%. A: Placa de conversão reconstituída. B: Identificação de PCR do fragmento inserido. Tamanho do portador: 5.631 pb; Tamanho do fragmento alvo: 1.384 pb.

Figura 6 10 μL de clone de fragmento único de sistema pequeno e mutação pontual, taxa de positividade de 100%. A e C: Placas de transformação de recombinação. B: Identificação de PCR de fragmentos de inserção, as pistas 1-5 são colônia 1, colônia 2, controle negativo, controle positivo (genoma como molde), controle positivo (fragmento purificado de PCR como molde). D: Eletroforegrama de identificação de PCR de fragmentos de inserção.

  • Recombinação eficiente de fragmentos curtos de baixa concentração

Fig. 7 10923ES conectando o fragmentos de baixa concentração. Comparado com produtos concorrentes, o número de colônias foi alto, e a taxa positiva (10/11) foi > 90,9%. AB: Placa de conversão reconstituída. C: Identificação de PCR do fragmento de inserção. Tamanho do portador: 3.000 pb; tamanho do fragmento alvo: 441 pb.

  • Ligadura multissegmentar eficiente e rápida

Figo.8 10923ES ligação de quatro segmentos, GC alto e conexão de combinação de segmento curto, comparado à marca S, tem uma contagem bacteriana maior de 10923ES e uma taxa positiva de 100%. D: Comprimido de conversão recombinante. E: Inserir mapa de identificação de sequenciamento de fragmento. F: O sequenciamento de Sanger confirmou a conexão bem-sucedida entre o vetor e os fragmentos, e o sequenciamento no local da conexão estava correto.

Recomendação de produto Strength Star

Canal de pedidos 10923ES

Orientação do produto

Nãoeu sou

Arte.Não

Sespecificações

1 – 7 fragmentos foram unidos em uma etapa e a reação de recombinação foi concluída no tempo mais rápido de 5 minutos

Clone de HieffTM Kit de clonagem universal II em uma etapa

10923ES20/50

20 toneladas/50 toneladas

Rexultante Pprodutos

Orientação do produto

Nãoeu sou

Arte.Não

Sespecificações

PCR de alta fidelidade

2× Hieff CanaceTM AdvanceFast PCR Master Mix (com corante)

10164ES03/08

1 mL/5×1 mL

Atualização rápida de PCR, pode ser PCR de colônia e adequado para amplificação de modelo complexo

2×HieffTM Mistura Master PCR Ultra-Rapid II HotStart

10167ES03/08

1 mL/5×1 mL

Investigação