Figura 1. Estrutura da albumina sérica humana ^[1]

3.Aplicação de Recombinante Sérum UMluminosidade

3.1. A albumina é um suplemento de meio de cultura isento de soro

A albumina é um componente importante de muitos sistemas de cultura de células sem soro, como aqueles para células de hibridoma e células de ovário de hamster chinês (CHO).A albumina pode ser incorporada em andaimes celulares para fornecer às células nutrientes essenciais e uma fonte de fatores de crescimento, promovendo a sobrevivência e proliferação celular. A albumina sérica humana é usada como um suplemento de meio de cultura celular para manter o crescimento e a saúde das células usadas na produção de anticorpos monoclonais, proteínas recombinantes e outros produtos biológicos. A albumina também pode tornar o ambiente de cultura celular mais estável e controlável, reduzindo a variabilidade de lote para lote e os riscos de contaminação associados ao soro derivado de animais.

3.2. Cultura de células de mamíferos

A albumina se liga a uma ampla gama de substâncias bioativas, tornando-a uma molécula de transporte essencial. A albumina também elimina espécies reativas de oxigênio que são prejudiciais à sobrevivência celular. Essas propriedades tornam a albumina uma excelente escolha para promover o crescimento celular e manter uma variedade de células eucarióticas in vitro. A albumina humana recombinante é bem adequada para uma variedade de diferentes tipos de células-tronco, primárias e de produção, incluindo células imunes, VERO, células-tronco mesenquimais, HEK293, células diploides, CHO e outros tipos de células.

3.3. Produção e preparação de vacinas

HSA é um componente importante para estabilizar vacinas, fornecendo múltiplos benefícios para uma variedade de tipos de vacinas, incluindo vírus vivos atenuados, vírus inativados ou mortos, partículas semelhantes a vírus e vacinas de subunidade. Uma das propriedades notáveis ​​do HSA é sua capacidade de revestir superfícies hidrofóbicas e hidrofílicas, evitando assim a adsorção indesejada não específica de vacinas ao longo de seu ciclo de vida, da produção à formulação e ao armazenamento. Por meio de sua capacidade de ligação, capaz de interações iônicas e hidrofóbicas, o HSA pode proteger superfícies de vacinas expostas de agregação indesejada e formação de partículas, o que poderia comprometer a eficácia da vacina.

3.4. Diagnóstico de doenças in vitro/in vivo

HSA é um biomarcador para uma variedade de doenças, incluindo câncer, artrite reumatoide, isquemia, doença hepática, obesidade e diabetes.

3.5 Aplicação de albumina sérica humana na terapia com células-tronco

A albumina tem sido um componente essencial dos meios de cultura de células há muito tempo. Sua capacidade de promover o crescimento de uma variedade de tipos de células é bem documentada, incluindo células-tronco mesenquimais (MSCs), células-tronco embrionárias (ESCs), células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs) e células imunes. Na cultura de células, a albumina é mais do que apenas uma fonte de nutrientes. Ela atua como um reservatório multifuncional, protegendo metais essenciais e outras entidades moleculares, criando assim um ambiente ideal para o crescimento e viabilidade celular contínuos.

Além de sua aplicação em cultura de células, a albumina também pode ser usada para criopreservação de células-tronco. A capacidade de revestimento de superfície da albumina garante a segurança das células durante o processo de congelamento. Além disso, a capacidade de tamponamento da albumina mantém o equilíbrio do pH necessário para a integridade celular, enquanto sua capacidade de estabilização mantém as células em suspensão, estendendo assim sua viabilidade durante a criopreservação.

Além disso, a albumina também pode ser usada como um transportador de medicamentos para prolongar o tempo de circulação dos medicamentos no corpo e aumentar a eficácia dos medicamentos.

4.Mecanismo de ação da albumina em meio de cultura

4.1 Ácidos graxos ligantes

A albumina é um transportador para 99% dos ácidos graxos não esterificados (FA) no plasma. A albumina tem 7 sítios de ligação de FA de alta afinidade e mais de 20 de baixa afinidade. Ácidos graxos como ácido linoleico, ácido linolênico e ácido oleico são insolúveis em solução aquosa e devem ser entregues às células por meio de moléculas transportadoras. A albumina circulante geralmente pode transportar 1 ou 2 ácidos graxos livres. A ligação de ácidos graxos também ajuda a estabilizar a albumina. Como um aditivo de cultura de células, a atividade da albumina depende em parte dos ácidos graxos específicos que ela liga e entrega às células.

4.2 Ligação de íons metálicos

Íons metálicos são componentes essenciais para cultura de células. HSA é um transportador chave para os íons metálicos chave Cu 2+ e Zn 2+. Além disso, átomos de cobre podem sofrer reações redox monovalentes e catalisar a geração de radicais livres, tornando o cobre citotóxico. In vivo, íons de cobre extracelulares se ligam à albumina, enfraquecendo a toxicidade potencial do cobre. Cada molécula de albumina tem um sítio de ligação de cobre de alta afinidade, e quando o cobre é ligado a este sítio, ele não participará de reações redox relacionadas a radicais livres. A albumina também pode se ligar a outros cátions divalentes, como Ca, Mg, Mn, Cd, Co e Ni.

4.3 Propriedades antioxidantes do HSA

A atividade antioxidante do HSA é atribuída principalmente às propriedades redox de quatro principais sítios de ligação de metais. Cu livre 2+, Fé 2+ e outros íons metálicos reagem com oxigênio para gerar ROS , que também pode interagir com H2O2 para produzir radicais hidroxila prejudiciais. Por outro lado, a ligação da albumina a íons metálicos limita a capacidade desses íons de participar da geração de ROS.

Culturas de células eucarióticas em escala industrial realizadas em biorreatores contêm oxigênio dissolvido e metais livres, como ferro, cobre, cobalto e níquel, que produzem ROS que degradam membranas celulares. A adição de BSA ou HSA reduz a pressão de ROS, resultando em culturas de células saudáveis. Por outro lado, a ligação da albumina a esses metais, especialmente cobre, zinco, vanádio e selênio, promove a absorção desses metais pelas células, estimula o crescimento da cultura e melhora significativamente a produção de proteínas recombinantes em células eucarióticas.

4.4 Ligação de piridoxal

Os aminoácidos são componentes-chave dos meios de cultura de células. O piridoxal e seu derivado 5' piridoxal fosfato (PLP) podem reagir de forma não enzimática com aminoácidos e formar bases de Schiff. Essas bases de Schiff são muito instáveis ​​e, quando em contato com íons metálicos, levam à degradação de aminoácidos e à inibição do crescimento celular. A fração livre de piridoxal é sequestrada pela ligação à albumina, o que impede que o piridoxal reaja com aminoácidos in vitro e os destrua.

4.5 Ligação à riboflavina

A riboflavina é outro fator que reage com aminoácidos livres e os degrada. Em solução aquosa, a riboflavina pode se ligar ao triptofano para formar um complexo. Sob condições de luz, esse complexo se decompõe em produtos tóxicos. A albumina pode se ligar à riboflavina e seu fosfato (monofosfato de flavina) e protegê-los da degradação. A albumina tem um único sítio de ligação ao triptofano.

5. Características do produto

A Yeasen fornece uma variedade de albumina sérica recombinante, incluindo humana, de camundongo, de rato, de macaco e de outras espécies.