Инструмент исследований круговой РНК -Rnase r

Инструмент для исследования кольцевой РНК - РНКаза R

—— Ускорение разработки лекарств на основе кольцевой РНК

В последние годы вакцина/препарат мРНК постепенно вошли в поле зрения общественности. Вакцина/препараты мРНК имеют преимущества быстрого дизайна, низкой стоимости и простоты производства, но поскольку сама мРНК легко деградирует, в настоящее время в основном улучшают стабильность препарата мРНК, добавляя шляпу и хвост, и способствуют трансляции мРНК. В последние годы исследователи обнаружили новый тип РНК - кольцевую РНК (Circular RNA, circRNA). Такие РНК представляют собой ковалентно-замкнутую кольцевую структуру, которую нелегко деградировать. По сравнению с мРНК, circRNA более стабильна и может достигать независимую от шляпы трансляцию. Поэтому открытие CIRCRNA дает возможности для разработки нового поколения вакцин и препаратов РНК с более простой и лучшей стабильностью.

Рисунок 1: Процесс создания РНК-вакцины 1

Процесс производства CIRCRNA включает: подготовку шаблона, транскрипцию in vitro, удаление шаблона ДНК, кольцевание и очистку. После кольцевания РНК необходимо использовать рибонуклеазу R (Ribonuclease R, RNASE R) для переваривания необработанной РНК для достижения цели обогащения CirCRNA. Yeasen имеет платформу молекулярной ферментативной инженерии и рациональной эволюции. Это одновременно гарантирует качество продукта. Команда исследований и разработок Yeasen успешно разработала ферменты RNASE R с высокой чистотой и высокой активностью.

РНКАЗА R (CAT#14606ES) является экзонуклеазой рибонуклеиновой кислоты Mg2+dependence 3 '→ 5', которая получена из E. coli. Она может расщеплять все линейные РНК и не расщепляет CirCRNA, лариатную РНК. Она часто используется для удаления линейных молекул РНК и достижения цели обогащения нелинейных РНК, таких как CirCRNA и лариатная РНК.

Функции

Чистота белка (SDS-PAGE) ≥95%

Рисунок 2: Определение чистоты белка: различные объемы (1 мкл, 2 мкл, 3 мкл) продукта (кат. № 14606ES) демонстрируют высокую чистоту ≥95%.

Нет остатка экзонуклеаза

Рисунок 3: 20 U РНКазы R было добавлено к 0,5 мкг λDNA-Hind III Digest, инкубация при 37 ℃ в течение 4 часов. Результат показывает, что нет остаточного Экзонуклеаза была обнаружена в продуктах РНКАЗЫ R (CAT#14606ES).

Способность переваривать линейную РНК и Циркулярная РНК

Рисунок 4: РНКаза R (CAT#14606ES) может расщеплять линейные молекулы РНК.
Рисунок 5: Циркулярная РНК может выдерживать обработку РНКазой R (CAT#14606ES).

Продукт

Кот

Размер

РНКаза R (20 ед./мкл)

14606ES

250U/2500U/10000U
РНКаза R (GMP-класса, 20 ед/мкл) 14615ES 250U/2500U/10000U

T7 РНК-полимераза GMP-класса (250 ед./мкл)

10625ES

10КУ/100КУ/2500КУ
РНК-полимераза CleaScrip™ T7 (низкое содержание дцРНК, 250 ед./мкл) 10628ES 10КУ/100КУ/2500КУ

Ссылка

  1. Цюй Л, Йи З, Шен Ю и др. Циркулярные РНК-вакцины против SARS-CoV-2 и новых вариантов. Клетка.2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Чэнь Л., Ван Ч., Сан Х. и др. Биоинформатический инструментарий для обнаружения и анализа кольцевых РНК. Краткая биоинформатика. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

Расследование