Вас все еще беспокоит низкая эффективность гомологичной рекомбинации многофрагментных или сверхдлинных фрагментов и малое количество колоний?

Все еще для носителя или фрагмента более ценен, низкий выход, в целях экономии сырья, использование небольшой системы лигирования с низкой концентрацией, но эффективность лигирования низкая и беспокоит?

Продукт YEASEN: Значительно улучшенная, низкая концентрация, малая система и сверхдлинные фрагменты эффективности лигирования, высокая скорость положительного клонирования, помогут вам легко завершить перевязка.

Сравнение одношагового клонирования с традиционными методами клонирования с использованием ферментов рестрикции

Метод

Подготовка фрагмента вставки

Ограничение мест рестрикции

Универсальная собственность

Время подключения

Положительный рейтинг

Одноэтапная быстрая технология рекомбинантного клонирования

Шаг 1. Очистка

Никто

★★★★★

Самое быстрое время — 5 мин.

До 95%

Метод рестриктного расщепления и лигирования клонирования

Шаг 2. Очистка

Да

★★

провести ночь

Различные гены сильно различаются

Преимущество продукта

Ориентация: Одноэтапное клонирование 1-7 фрагментов ДНК.

Простота: несколько фрагментов можно лигировать в одной пробирке.

Быстро: самое быстрое лигирование за 5 мин.

Высокая эффективность: высокий процент положительного клонирования.

Малая система: общий объем системы лигирования может составлять всего 6 мкл.

Избыточная длина: более 25 кб (длина носителя + фрагмента) для лигирования.

Производительность Отображать

  • Эффективная рекомбинация одного фрагмента 6 мкл малая система

Рис. 1 10 нг одиночных фрагментов с низким входом были лигированы в состоянии нереанимационных рецептивных клеток малой системы объемом 6 мкл.Результаты показали, что 10923ES показал лучшую производительность, чем конкурирующие продукты, с высокой эффективностью лигирования, большим количеством колоний и положительным показателем 100%. AB: Реконструированная конверсионная пластина. Молярное соотношение носителя (10 кб) к фрагменту вставки (1 кб) составило 1:2. C: ПЦР-идентификация фрагмента вставки. M: YEASEN 10505ES. Объем носителя: 40 нг/6 мкл Реакционная система, условия реакции: 50℃, 15 мин.

  • Многофрагментная эффективная рекомбинация

Рис. 2 Лигировано шесть фрагментов (7,6 кб). Результаты показали, что 10923ES показал лучшую производительность, чем конкурирующие продукты, с большим количеством колоний и положительным показателем 100%. AB: Восстановленная конверсионная пластина. Молярное соотношение носителя (11,6 кб) к фрагменту вставки (7,6 кб) составило 1:2. C: ПЦР-идентификация фрагмента вставки. M: YEASEN 10505ES, длина ПЦР 2,6 кб. Объем носителя: 200 нг/20 мкл Реакционная система, условия реакции: 50℃, 50 мин.

  • Эффективная рекомбинация с низкой концентрацией нескольких фрагментов

Рис. 3 Лигируйте отдельно фрагменты пять и шесть низкой концентрации. Результаты показали, что 10923ES демонстрирует стабильную связь при низких концентрациях с высоким количеством бактерий и 100%-ным уровнем позитивности. AB: Рекомбинантная конверсионная пластина. CD: Электрофорезное изображение идентификации ПЦР-фрагмента вставки, M: YEASEN 10505ES, длина ПЦР 2,6 кб.

  • Стабильность реагента

Рис. 4 Результаты показали, что после помещения при температуре 37 ℃ в течение 7 дней 10923ES оставался стабильным в связывании пяти и шести фрагментов при низких концентрациях. AF: Рекомбинантная конверсионная пластина. GH: Электрофорезное изображение идентификации фрагмента вставки с помощью ПЦР, M: YEASEN 10505ES, длина ПЦР 2,6 кб.

Дело клиента

  • Эффективная реорганизация небольших систем

Рис. 5 10923ES был лигирован с одним фрагментом в Небольшая реакционная система объемом 10 мкл, с положительным показателем 100%. A: Реконструированная конверсионная пластина. B: ПЦР-идентификация фрагмента вставки. Размер носителя: 5631 п.н.; Размер целевого фрагмента: 1384 п.н.

Рис. 6 10 мкл Малая система одиночного фрагмента соединения и клонирования точечной мутации, 100% положительный показатель. A и C: Планшеты рекомбинационной трансформации. B: ПЦР-идентификация фрагментов вставки, дорожки 1–5 — колония 1, колония 2, отрицательный контроль, положительный контроль (геном в качестве матрицы), положительный контроль (очищенный ПЦР-фрагмент в качестве матрицы). D: Электрофореграмма ПЦР-идентификации фрагментов вставки.

  • Эффективная рекомбинация коротких фрагментов низкой концентрации

Рис. 7 10923ES подключение фрагменты низкой концентрации. По сравнению с конкурирующими продуктами количество колоний было высоким, а положительный показатель (10 / 11) составил > 90,9%. AB: Реконструированная конверсионная пластина. C: ПЦР-идентификация фрагмента вставки. Размер носителя: 3000 п.н.; размер целевого фрагмента: 441 п.н.

  • Эффективное и быстрое многосегментное лигирование

Инжир.8 10923ES четырехсегментное лигирование, высокое GC и соединение коротких сегментов, по сравнению с брендом S, имеет более высокое количество бактерий 10923ES и положительный показатель 100%. D: Рекомбинантная конверсионная таблетка. E: Вставьте карту идентификации секвенирования фрагмента. F: Секвенирование по Сэнгеру подтвердило успешное соединение между вектором и фрагментами, и секвенирование в месте соединения было правильным.

Рекомендация продукта Strength Star

10923ES Канал заказа

Ориентация на продукт

Наме

Арт.№

Сспецификации

1–7 фрагментов были соединены за один шаг, и реакция рекомбинации была завершена за 5 минут.

Клон ХиффаТМ Универсальный набор для одношагового клонирования II

10923ES20/50

20 т/50 т

Рвоодушевленный Ппродукты

Ориентация на продукт

Наме

Арт.№

Сспецификации

Высокоточная ПЦР

2× Хайфф КэнэсТМ AdvanceFast PCR Master Mix (с красителем)

10164ES03/08

1 мл/5×1 мл

Быстрое обновление ПЦР, может быть ПЦР колоний и подходит для сложной шаблонной амплификации

2×ХиффТМ Мастер-микс Ultra-Rapid II HotStart PCR

10167ES03/08

1 мл/5×1 мл

Расследование