Ключевые слова:
Низкий остаток, предварительно смешанный, универсальный, многоцелевой, однопробирочный, qPCR, высокая чувствительность.
Абстрактный:
Новая смесь третьего поколения для количественной ПЦР со сверхнизким содержанием остатков, предварительно смешанная для обеспечения высокой чувствительности, поддерживает быстрый 30-минутный протокол и отлично подходит для мультиплексной амплификации в различных сценариях.
Фон：
Коммерческие молекулярные ферменты, в первую очередь производимые посредством рекомбинантной экспрессии в сконструированных штаммах (например, E. coli), часто содержат остаточную геномную ДНК хозяина. Такие факторы, как среда приготовления и человеческое загрязнение, еще больше увеличивают вероятность наличия остаточной ДНК в этих ферментах. Это может привести к неточной количественной оценке остатков нуклеиновых кислот хозяина в продуктах контроля качества, создавая риски безопасности для биофармацевтического производства. Во время обнаружения патогенов загрязненные фоновые бактериальные нуклеиновые кислоты могут подавлять малораспространенные целевые нуклеиновые кислоты или совместно обнаруживаться с ними, что ставит под угрозу точность теста.
Полное решение
Для устранения помех, создаваемых фоновыми бактериями и остатками нуклеиновых кислот хозяина, при обнаружении патогенов,
Хайфф ЮниконТМ Смесь Pure Pro U+ qPCR（Одна трубка）（Кот#16713ES）представляет собой тщательно разработанную универсальную смесь для ПЦР
Преимущества продукта
- Низкий фоновый остаток – В 48 лунках не обнаружено остатков Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и геномной ДНК человеческого происхождения.
- Исключительная стабильность предварительно смешанного состава: Стабилен при температуре 37°C до 14 дней, при температуре 4°C до 28 дней и после 50 циклов замораживания-оттаивания.
- Превосходная универсальность реагентов – Совместимость с различными наборами мультиплексных праймеров-зондов (проверено для более чем 40 различных типов мишеней) с превосходными характеристиками амплификации.
- Высокая чувствительность и специфичность – Чувствительность позволяет обнаружить 250 копий/мл, а специфичность гарантирует отсутствие пиков в 48 отрицательных лунках.
- Поддерживает быстрые протоколы – Совместимость с быстрыми протоколами, результаты можно получить всего за 30 минут.
- Система защиты от загрязнения dUTP/UDG – Включает в себя систему защиты от загрязнения dUTP/UDG для эффективного предотвращения аэрозольного загрязнения.
- Совместимость с несколькими платформами и системами – Совместимость с такими платформами, как Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, Slan, Tianlong и другими.
Основные показатели производительности
1. Сверхнизкий фоновый бактериальный остаток
На основании оценки фоновых уровней остатков бактерий реагента, использование
2. Исключительная стабильность полностью предварительно смешанной премиксной смеси.
На основе исследования стабильности предварительно смешанный Реагент, Cat#16713ES, обрабатывали тремя способами (4°C, 37°C и замораживание-оттаивание). Экспериментальные группы обрабатывали при 4°C и 37°C в течение 7 дней соответственно и подвергали 50 циклам замораживания-оттаивания. Стабильность оценивали по сравнению с контрольной группой (хранящейся при -20°C) в четырех системах мультиплексной амплификации (группы 1, 2 и 4 представляют собой системы 4-плексной амплификации, а группа 3 представляет собой систему 3-плексной амплификации), при этом некоторые группы амплификации дополнительно оценивали на стабильность после 14 дней ускорения при 37°C. Результаты показали, что Отклонение значения Ct (значение ΔCt) между экспериментальными и контрольными реагентами было в пределах ±0,5, а отклонение значения флуоресценции составило в пределах 15%, указывая на то, что
3. Отличная универсальность реагентов.
На основе исследования многосторонних сценариев применения реагента,
4. Исключительная чувствительность усиления
На основании оценки чувствительности реагента была проведена оценка скорости обнаружения Cat#16713ES в мультиплексной системе амплификации (4-плексной) с использованием образцов в сверхнизких концентрациях (250 копий/мл). Результаты показывают, что
5. Совместимость с несколькими быстрыми протоколами.
На основании исследования эффективности амплификации быстрого протокола реагента семь образцов градиента (1~10^6 копий/мкл) были проверены с использованием как обычных (1 час и 6 минут), так и быстрых протоколов (30 минут) на одном и том же приборе для количественной ПЦР (ABI Q5). Результаты показали, что эффективность амплификации быстрого протокола осталась прежней. выше 99%, а отклонение значения Ct (значение ΔCt) между обычным и быстрым протоколами составило в пределах ±0,5, с отклонением значения флуоресценции в пределах ±10%, и кривые усиления отображал форму буквы «S».
Совместное использование реагентов для обнаружения IVD
Как поставщик инструментов для естественных наук,
| Тип продукта | Функция продукта | Название продукта | Номер товара |
| смесь для ПЦР | Совершенно новый универсальный набор 3-го поколения, полностью готовый к использованию, высокая чувствительность, поддерживающая быстрое тестирование | Hieff UniconTM Универсальная смесь TaqMan Pro U+ qPCR（Одна трубка） | 16710ES |
| Высокочувствительный универсальный (5-кратная концентрация) | Hieff UniconTM Универсальная основная смесь TaqMan Multiplex qPCR（УДГ плюс） | 13891ES | |
| 2-е поколение, быстрое, полностью предварительно смешанное | Hieff UniconTM Superpro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix（УДГ плюс） | 11827ES | |
| Сверхнизкий остаточный уровень без хоста | Hieff UniconTM Purepro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix（УДГ плюс） | 11853ES | |
| Высокочувствительный универсальный лиофилизируемый | Hieff UniconTM Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix（УДГ плюс） | 11893ES | |
| Смесь ОТ-ПЦР | Высокочувствительный универсальный быстрый | HifairTM C203P1 Мультиплексный одношаговый набор зондов ОТ-ПЦР（УДГ Плюс） | 16630ES |
| полностью предварительно смешанный универсальный | HifairTM Набор зондов V Multiplex One Step RT-qPCR（УДГ Плюс） | 11899ES | |
| Универсальный быстролиофилизируемый | 11831ES |