Нуклеиновая кислота служит основой всех исследований молекулярной биологии. Более того, качество извлеченной нуклеиновой кислоты также является одним из ключевых факторов, определяющих успех или неудачу последующих экспериментов. При разработке реагентов для экстракции нуклеиновых кислот, в дополнение к обычным химическим компонентам, некоторые нуклеиновые кислоты или ферменты малых молекул могут значительно повысить эффективность экстракции или устранить помехи нецелевых веществ и стать важными компонентами в экстракции нуклеиновых кислот.
О вспомогательных веществах для осаждения нуклеиновых кислот
РНК-носитель
- Концепция и функция РНК-носитель
РНК-носитель, также известный как средство осаждения нуклеиновых кислот на китайском языке. В процессе извлечения нуклеиновых кислот центрифужные пробирки, используемые для извлечения, в основном изготавливаются из полипропилена. На стенках пробирок присутствует статическое электричество, которое адсорбирует нуклеиновые кислоты. Использование РНК-носителя в процессе извлечения и очистки может помочь нуклеиновым кислотам устранить электростатический эффект, гарантировать, что нуклеиновые кислоты могут быть хорошо адсорбированы на колонке очистки, улучшить эффективность элюирования и, таким образом, достичь максимально возможного извлечения нуклеиновых кислот из образца.
- Распространенные типы РНК-носителей
В качестве вспомогательного вещества для осаждения нуклеиновых кислот используется РНК-носитель нескольких типов, например, калиевая соль полиА, общая РНК E. coli, общая РНК дрожжей, тРНК и т. д.
- Распространенные проблемы при использовании РНК-носитель
Можно ли использовать РНК-носитель после помещения ее на некоторое время при комнатной температуре? Влияет ли деградация РНК-носителя на ее использование? Влияет ли РНК-носитель на последующие эксперименты?
РНК-носитель растворяется в протекторе РНК. Жидкая РНК-носитель оказывает незначительное воздействие при помещении при температуре 37°C или комнатной температуре на короткий период (в течение 7 дней). По сути, РНК-носитель представляет собой фрагмент в диапазоне от 500 нуклеотидов до 1000 нуклеотидов. Незначительная деградация не влияет на нормальное использование. Для последующих приложений, таких как флуоресцентная количественная ПЦР, РНК-носитель не оказывает влияния на значение Ct. Для последующих приложений, таких как NGS, ее можно добавлять в соответствии с фактическими потребностями.
- Введение в продукт РНК-носитель
РНК-носитель Yeasen's — это РНК, полученная из дрожжей. Остаточных ферментов ДНКазы или РНКазы нет, а остаточное содержание белка и ДНК крайне низкое. Его можно использовать в таких экспериментах, как извлечение вирусной нуклеиновой кислоты и извлечение следовой ДНК. Извлеченные нуклеиновые кислоты можно использовать в последующих экспериментах, таких как ОТ-ПЦР и ОТ-кПЦР. Продукт доступен в жидкой и лиофилизированной порошковой форме для удобного прямого использования, транспортировки на большие расстояния и хранения.
Название продукта | Продукт Число | Спецификация | Условия и срок хранения |
РНК-носитель, 6 мкг/мкл | 19701ES | 1 мл / 5 мл / 100 мл | Хранить при температуре от -25 до -15 °C. Срок годности 2 года. |
Порошок РНК-носителя, 216 мкг/пробирка | 19703ES | 1 тюбик / 100 тюбиков / 1000 тюбиков | Хранить при комнатной температуре. Срок годности 2 года. |
19704ES | 1 тюбик / 100 тюбиков / 1000 тюбиков | Хранить при комнатной температуре. Срок годности 2 года. |
Линейный раствор акриламида
- Концепция и функция раствора линейного акриламида
Линейный акриламид, имеющий английское название Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide, сокращенно LPA), является соосаждающим агентом, который помогает осаждать нуклеиновые кислоты в процессе очистки нуклеиновых кислот.
- Характеристики раствора линейного акриламида
Это нейтральный носитель небиологического происхождения. Поэтому он не содержит потенциального загрязнения нуклеиновыми кислотами или нуклеазами.
Он не влияет на показания A260/A280 и не подавляет активность полимеразы и рестрикционной эндонуклеазы.
Он совместим с другими последующими приложениями молекулярной биологии, такими как ПЦР и ферментативное расщепление.
Он может помочь в осаждении ДНК и РНК на уровне пикограмма или выше (включая олиго). Длина извлекаемого фрагмента составляет более 20 нуклеотидов, и применимы как одноцепочечные, так и двухцепочечные нуклеиновые кислоты.
- Введение в продукт
Название продукта | Продукт Число | Спецификация | Условия и срок хранения |
Раствор линейного акриламида (5 мг/мл) | 10408ES | 1 мл | Сохранено в 4 °C. Срок годности 3 годы. |
Вспомогательный фермент для экстракции нуклеиновых кислот
РНКаза А
- Концепция и функция РНКазы А
Рибонуклеаза А (РНКаза А), как эндорибонуклеаза, специфически разрушает остатки цитозина (C) или урацила (U) на одноцепочечной РНК. Наиболее распространенным применением рибонуклеазы А (РНКаза А) является удаление РНК во время подготовки плазмидной ДНК или геномной ДНК. Кроме того, этот продукт также может использоваться в экспериментах по молекулярной биологии, таких как анализы защиты от РНКазы и анализ последовательности РНК.
- Характеристики РНКазы А
РНКаза А получена из поджелудочной железы крупного рогатого скота. Не содержит примесей эндо- и экзонуклеазы дезоксирибонуклеазы. Может использоваться напрямую без предварительного нагревания и устойчива к воздействию высоких температур.
- Введение в продукт
Название продукта | Продукт Число | Спецификация | Условия и срок хранения |
РНКаза А(100 мг/мл) | 10406ES | 1 мл | Хранить при температуре -20°С. Срок годности 2 года. |
РНКаза А(10 мг/мл) | 10405ES | 1мл | Хранить при комнатной температуре.Срок годности 1 годы. |
Рибонуклеаза А (РНКаза А) из поджелудочной железы крупного рогатого скота | 10407ES | 100мг/1г | Хранить при комнатной температуре. Срок годности 2 года. |
Дезоксирибонуклеаза I (ДНКаза I)
Дезоксирибонуклеаза I (ДНКаза I), эндонуклеаза, обнаруженная в различных клетках и тканях, нацеливается и расщепляет фосфодиэфирную связь, прилегающую к пиримидинам, производя полинуклеотиды с фосфатной группой на 5'-конце и гидроксильной группой на 3'-конце. Средний минимальный продукт переваривания — тетрануклеотидный полимер. ДНКаза может катализировать различные формы ДНК, такие как одноцепочечная ДНК, двухцепочечная ДНК и даже хроматин (на скорость расщепления которого влияют гистоны). В экспериментах по молекулярной биологии ее часто используют для удаления ДНК из белков или для внесения надрезов в ДНК с целью вставки меченых оснований в ДНК.
2.Характеристики ДНКазы I
Оптимальный рабочий диапазон ДНКазы I составляет pH 7-8, а ее активность зависит от Ca2+ и может быть активирован ионами двухвалентных металлов, такими как Co2+, Мн2+, Zn2+и т.д. 5 мМ Ca2+ может защитить фермент от гидролиза. В присутствии Mg2+, этот фермент может случайным образом распознавать и разрезать любой участок на любой нити ДНК; в то время как в присутствии Mn2+, он может распознавать обе цепи ДНК одновременно и разрезать их практически в одном и том же месте.
3.Введение в продукт
Название продукта | Продукт Число | Спецификация | Условия и срок хранения |
Дезоксирибонуклеаза I (ДНКаза I) из поджелудочной железы крупного рогатого скота | 10607ES | 15 КУ/10×15КУ | Хранить при температуре -20°С. Срок годности 2 года. |
Дезоксирибонуклеаза I (ДНКаза I) из поджелудочной железы крупного рогатого скота | 10608ES | 25 мг/100 мг/1г | Хранить при температуре -20°С. Срок годности 2 года. |
Протеиназа К
1.Концепция и функция протеиназы К
Протеиназа К (Proteinase K) — сериновая протеаза с широким спектром расщепляющей активности. Ее относительная молекулярная масса составляет около 29,3 кДа, и она может расщеплять карбоксильные концевые пептидные связи алифатических аминокислот и ароматических аминокислот. Протеиназа К имеет широкий спектр применения и может использоваться в таких экспериментах, как подготовка хромосомной ДНК для гель-электрофореза в импульсном поле, вестерн-блоттинг и удаление нуклеаз из препаратов ДНК и РНК. Денатурирующие агенты, такие как SDS (1%), могут повысить ее активность.
2.Характеристики протеиназы К
Получен из генетически рекомбинантного штамма дрожжей.
Не содержит РНКазы и ДНКазы.
Активен и стабилен в мочевине и SDS.
Активен в широком диапазоне pH (pH 4,0 - 12,0), оптимальный диапазон pH составляет pH 7,5 - 9,0.
Название продукта | Продукт Число | Спецификация | Условия и срок хранения |
10401ES | 100мг/1г/5г/100г | Хранить при температуре 4°С. Срок годности 3 года. годы. | |
Раствор протеиназы К (20 мг/мл) | 10412ES | 1мл/10мл/25мл/500мл | Хранить при температуре 4°С. Срок годности 2 года. годы. |
Раствор протеиназы К (20 мг/мл) | 10410ES | 1мл/10мл/25мл/500мл | Хранить при температуре 4°С. Срок годности 2 года. годы. |
стабилизатор РНК
Раствор стабилизатора РНК для тканей животных и растений
1.Функция раствора стабилизатора РНК для тканей животных и растений
РНКазы широко распространены в окружающей среде и с большой вероятностью могут разрушать РНК в свежесобранных образцах тканей животных и растений, крови, биологических жидкостях и т. д. Стабилизатор тканей RNAsafe для тканей животных и растений (RNAsafe Tissue Stabilizer) специально разработан для стабилизации и защиты РНК в собранных образцах. Как нетоксичный раствор, он может быстро проникать в ткани и инактивировать эндогенные РНКазы.
2.Характеристики раствора стабилизатора РНК для тканей животных и растений
Чрезвычайно прост в использовании: просто разрежьте свежие ткани на блоки подходящего размера (≤0,5 см) и погрузите их в 5–10-кратный объем RNAsafe.
Длительный период стабилизации: ткани/клетки, инфильтрованные RNAsafe, можно хранить при температуре 37°C в течение 1 дня, при комнатной температуре в течение 1 недели, при 4°C в течение 4 недель, а также при длительном хранении при температуре -20°C/-80°C.
Широкая совместимость с последующими методами: он совместим практически со всеми методами выделения РНК, такими как реагент для извлечения полной РНК HieffTM (каталожный номер: 10606ES60), и практически со всеми коммерческими наборами для извлечения РНК, включая метод извлечения с помощью центрифужной колонки и метод очистки с помощью магнитных частиц.
Широкое применение материалов: может использоваться для консервации различных тканей животных и растений (таких как мозг, сердце, печень, поджелудочная железа, почки, селезенка, яички, мышцы, стебли и листья растений и т. д.), а также дрожжей, клеток тканевых культур и т. д.
3.Введение в продукт
Название продукта | Продукт Число | Спецификация | Условия и срок хранения |
RNAsafe Стабилизатор тканей RNAsafe | 10604ES60 | 100 мл | Хранить при комнатной температуре. Срок годности 5 лет. годы. |
Сопутствующие товары
Название продукта | Продукт Число | Спецификация | Условия и срок хранения |
Лизоцим | 10402ES | 5/50 г | Хранить при температуре -20°С. Срок годности 3 года. годы. |
Литиказа (10 ЕД/мкл) | 10403ES | 1500/3000/10000 ЕД | Хранится в -20°С. |
Улитка | 10404ES | 5/10 г | Хранить при температуре 2-8°С. Срок годности 2 года. годы. |
РНКсейф-ICE | 10605ES | 100 мл | Хранить при комнатной температуре. Срок годности 2 года. годы. |