Бесплатное руководство: оптимизация рабочих процессов очистки белка

Очистка белков — это фундаментальный метод в биохимии и молекулярной биологии, широко используемый в исследованиях, диагностике и терапевтических приложениях. Для изучения конкретного белка первым шагом является его выделение и очистка из биологических образцов. Однако получение высокоочищенного белка может быть сложной задачей, учитывая разнообразие белков и сложность биологических систем. Понимание основных принципов очистки белков и выбор правильных методов для вашего исследования может значительно повысить эффективность и производительность вашего рабочего процесса.

Основы очистки белка

Очистка белков основана на различиях в физических и химических свойствах белков, таких как размер, заряд, гидрофобность и сродство к определенным лигандам. Используя эти различия, исследователи могут эффективно отделять целевые белки от других биологических компонентов, минимизируя загрязнение.

Ниже приведены основные методы очистки белков, основанные на различных механизмах разделения:

Каждый из этих методов можно оптимизировать, выбрав соответствующие материалы и колонки. Идеальный метод зависит от характеристик белка и уровня чистоты, необходимого для последующих приложений.

Оптимизация рабочего процесса очистки белка с помощью Yоблегчить Биологическая продукция

В Йесен Биология, мы предоставляем широкий спектр высококачественных реагентов и материалов, предназначенных для оптимизации очистки белков. Независимо от того, работаете ли вы со сложными биологическими образцами или вам требуются высокопродуктивные, высокочистые белки, мы предлагаем инструменты для улучшения вашего процесса очистки. Вот обзор некоторых из наших ключевых продуктов, которые помогут вам оптимизировать ваши рабочие процессы очистки:

Его метка очистки белка (Кат.№20502ES):

При экспрессии рекомбинантного белка Его тег (обычно 6×His) широко используется из-за своего небольшого размера, низкой иммуногенности и минимального влияния на функцию белка. Его белки-метки можно эффективно очищать с помощью аффинных смол, хелатированных ионами никеля, таких как смолы Ni-NTA. Агарозная смола HisSep Ni-NTA (Кат. № 20502ES) предоставлено Yоблегчить Биология использует высокосшитый агарозный гель в качестве матрицы в сочетании с лигандом квадрокоординированной азот-триуксусной кислоты (NTA) для образования стабильных хелатов ионов никеля. Комбинированная структура обеспечивает эффективное связывание белка и производительность элюирования.

Аффинная очистка антитела-метки

Аффинная очистка антител-меток использует высокоспецифическое связывание между антителом и его специфической меткой для достижения очистки белка слияния. Обычные метки включают Флаг, HA, Mycи т. д. Используя соответствующую среду сродства антител, интересующий белок может быть эффективно выделен из сложных образцов.

Биология Йесен предлагает широкий выбор продуктов для аффинной очистки меченых антител:

• Антифлаговая близость Гель (Кат.№20584ES):
  Приготовлено из высококачественного мышиного моноклонального антитела IgG2b с 4% высокосшитым агарозным гелем черезugh поставка сцепления, он имеет высокую емкость загрузки белка слияния Flag-tag, suподходит для иммунопреципитации и очистки белков Flag-tag. yeasen.com

• Анти-HA Affinity Gel(Кат#20586ЭС):
  Изготовленный из высококачественного мышиного моноклонального антитела IgG1 и геля Sepharose 4B посредством соединения с источником, он обладает высокой емкостью загрузки белков слияния HA-тегов, подходит для иммунопреципитации и очистки белков с HA-тегами. yeasen.ком

• Анти-Myc Аффинити Гель（Кат#20587ЭС）:
  Высококачественное мышиное моноклональное антитело IgG1 соединено с гелем Sepharose 4B, разработанным для очистки белков с меткой Myc, с высокой специфичностью и высокой связывающей способностью.

• Иммуномагнитные шарики Anti-Flag（Кат.№20565ES）:
  Эта иммуномагнитная гранула соединена с магнитными агарозными микросферами с использованием высококачественного моноклонального антитела IgG2b, полученного от мышей, которое может быстро очищать белки, помеченные Flag, под действием магнитных полей и подходит для очистки образцов небольшого размера.

Аффинная очистка антител (кат. № 36401ES):

Аффинная очистка антител это метод использования специфического связывания антитела с его антигеном для очистки белка. Щелочеустойчивая рекомбинантная агарозная смола для очистки белка А (Cat#36401ES) обычно используется в качестве среды для аффинной очистки антител и широко применяется для очистки и обогащения антител.

Протеиназа

В исследованиях белков протеазы используются для расщепления тегов слияния, восстанавливая естественное состояние целевого белка. Включение этих протеаз в ваш рабочий процесс очистки белков может улучшить качество и функциональность ваших целевых белков, способствуя продвинутым проектам исследований и разработок.

• Рекомбинантная энтерокиназа (кат. № 20401ES):

Энтерокиназа, также известная как энтеропептидаза, является сериновой протеазой, которая специфически расщепляет после аминокислотной последовательности DDDDK. Рекомбинантная энтерокиназа Йезена экспрессируется в Escherichia coli и свободен от тегов, что гарантирует, что он не будет мешать последующим приложениям. Этот фермент идеально подходит для удаления тегов слияния из рекомбинантных белков, облегчая получение нативных белков для структурных и функциональных исследований.

• лPNGase F (каталожный номер 20407ES):

PNGase F — это амидаза, которая специфически расщепляет остатки GlcNAc и Asn в N-связанных гликопротеинах. PNGase F от Yeasen поставляется в концентрации 100 000 U/мл, что обеспечивает высокую активность для реакций дегликозилирования. Этот фермент имеет решающее значение для изучения структур и функций гликопротеинов, поскольку он удаляет N-связанные гликаны, не затрагивая пептидный остов.

• Рекомбинантный трипсин (MS-SAFE) (кат. № 20416ES):

Трипсин — это сериновая протеаза, которая расщепляет пептидные связи на карбоксильной стороне остатков лизина и аргинина. Рекомбинантный трипсин Йесена является MS-SAFE, что означает, что он подходит для масс-спектрометрических приложений благодаря своей высокой чистоте и минимальной автолитической активности. Этот фермент идеально подходит для протеомных исследований, включая переваривание белков для масс-спектрометрического анализа.

Очищение Метод	Тип реагента	Тип продукта	Рекомендуемые продукты
Гель-фильтрация	Декстран Гель Хроматография	Наполнители для обессоливания Предварительно упакованные колонны для обессоливания Опреснительные гравитационные колонны Спиновые колонны	Колонна обессоливания G25 M（Кат.№20590ES） Колонка для обессоливания спина, 0,5 мл （Кат.№20599ES） Гравитационная обессоливающая колонна, 8.3 мл (Кат.№20741ES）
	Агароза Гель Хроматография	Наполнитель Предварительно упакованные колонны	Наполнитель для хроматографии на агарозном геле высокого разрешения Geldex 200 PG (10-600 кДа) (кат. № 20598ES) Хроматографическая колонка Geldex 200 PG （Кат.№20593ES）
Ионный обмен	Анионный обмен Хроматография	Наполнитель Предварительно упакованные колонны	Q Agarose HP (насадка для анионообменной хроматографии Q Strong HP) (кат. № 20460ES) Предварительно упакованная колонка Q HP Strong Anion Exchange, 5 мл (кат. № 20462ES)
	Катионообменная хроматография		SP Agarose HP (насадка для катионообменной хроматографии SP Strong HP) (кат. № 20463ES) Предварительно упакованная колонка SP HP Strong Cation Exchange, 5 мл (кат. № 20465ES)
Хроматография гидрофобного взаимодействия	Слабая гидрофобность Хроматография	Наполнитель Предварительно упакованные колонны	Слабогидрофобная хроматографическая среда высокого разрешения на основе бутила (кат. № 20484ES) Слабогидрофобная колонка для хроматографии с предварительной загрузкой Butyl HP, 5 мл (кат. № 20485ES)
	Сильный гидрофобный Хроматография		Среда для хроматографии высокого разрешения с сильно гидрофобным фенилом (кат. № 20486ES) Предварительно загруженная колонка для хроматографии с сильно гидрофобным Phenyl HP, 5 мл (кат. № 20487ES)
Аффинная очистка	Его-тег Очистка белка	Смола Предварительно упакованные колонны Очищающие магнитные бусины	Смола для очистки белка His-tag на основе агарозы (Кат. № 20502ES) Колонка для предварительной очистки белка His-tag, 5 мл (кат. № 20504ES) Магнитные шарики His-tag для очистки белка (кат. № 20561ES)
	НДС-ярлык Очистка белка	Смола Предварительно упакованные колонны Очищающие магнитные бусины	Смола глутатион-агарозы (для очистки GST-меченого белка) (кат. № 20507ES) Предварительно загруженная колонка для очистки белка с меткой GST, 5 мл (кат. № 20510ES) Магнитные шарики для очистки белка с меткой GST (кат. № 20562ES)
	МБП-ярлык Очистка белка	Смола Предварительно упакованные колонны	Очищающая смола с высокой степенью сшивки белка, меченного MBP (кат. № 20515ES) Предварительно загруженная колонка для очистки белка с меткой MBP, 5 мл (кат. № 20517ES)
	Стрептококк(Ⅱ) Ярлык Очистка белка	Смола Предварительно упакованные колонны	Смола для очистки белка агарозы с меткой Strep(II) (кат. № 20495ES)
	Биоти-ярлык Очистка белка	Смола Предварительно упакованные колонны Иммуномагнитные бусины	Смола для очистки стрептавидин-агарозы (кат. № 20512ES) Предварительно загруженная колонка для молекулярной очистки биотина, 5 мл (кат. № 20514ES) Иммуномагнитные шарики стрептавидина (SAV) (кат. № 47503ES)
	Тег Аффинная очистка антител	Гель Иммуномагнитные бусины	Очищающий гель Anti-Flag Affinity (Кат. № 20584ES) Гель для очистки сродства к анти-HA (Кат. № 20586ES) Очищающий гель Anti-Myc Affinity (Кат. № 20587ES) Иммуномагнитные шарики Anti-Flag (Кат. № 20565ES)
	Аффинная очистка антител	Смола Предварительно упакованные колонны Иммуномагнитные бусины	Рекомбинантный белок А Агарозная очистительная смола (Кат. №36401ES) Смола для очистки агарозы с белком G (кат. № 36405ES) Смола для очистки агарозы с белком A/G (кат. № 36403ES) Иммуномагнитные шарики с протеином A/G (Кат. №36417ES)
	Другие методы аффинной очистки антител	Смола Предварительно упакованные колонны	Смола для высокоэффективного удаления эндотоксинов (кат. № 20518ES) Среда для аффинной очистки гепарина (кат. № 20493ES)
Даты НОЯБРЯ	Протеазы	Ферменты расщепления тегов Гликозидазы Ферменты для масс-спектрометрии	Э.coli Экспрессированная рекомбинантная энтерокиназа (без этикетки) (Кат. № 20401ES) Бычий тромбин (высокая жизнеспособность, >2000 МЕ/мг) (кат. № 20402ES) Протеаза rTEV Рекомбинантная протеаза вируса гравировки табака (Cat#20403ES) PNGase F, N-гликозидаза F (100000 ед/мл) (Кат. № 20407ES) Рекомбинантный трипсин (MS-SAFE) Рекомбинантный трипсин (класс для масс-спектрометрии) (Кат. № 20416ES)
	Расходные материалы для хроматографии	Гравитационный поток Пустые колонны тип Пустые столбцы Колонны YXK Мешки для диализа	Пустая колонка для гравитационной хроматографии объемом 12 мл (кат. № 20523ES) Пустая колонка типа C объемом 5 мл (подключенная к Akata, шприцу или перистальтическому насосу) (кат. № 20526ES) Пустая хроматографическая колонка YXK16/70 (кат. № 20443ES) Диализный мешок 27 мм (MWCO 50 кДа) (Кат. № 20534ES)

Заключение: адаптируйте свой рабочий процесс к своим потребностям

Оптимизация рабочего процесса очистки белков имеет решающее значение для достижения высокой чистоты и выхода белков для ваших исследований или приложений. Понимая принципы очистки и выбирая правильные инструменты, вы можете оптимизировать свой процесс и избежать распространенных ошибок. Йесен Biology поставляет реагенты и расходные материалы высочайшего качества для всех этапов очистки белков, гарантируя, что ваши белки будут чистыми, функциональными и готовыми к анализу.

Чтобы узнать больше о том, как наши продукты могут улучшить процесс очистки белка, посетите страницы наших продуктов или свяжитесь с нашей командой для получения индивидуальных рекомендаций.

Для получения дополнительной информации или покупки посетите наш официально мыбсайт.