Описание
Описание продукта
2×Хайфф Кэнэс™ Plus PCR Master Mix (с красителем) — это готовый к использованию 2-кратный предварительно смешанный раствор, содержащий Hieff Canace™ Плюс высокоточная ДНК-полимераза, dNTP и оптимизированная буферная система. Смесь включает два моноклональных антитела, которые ингибируют полимеразную активность и 3'→5'экзонуклеазную активность при комнатной температуре, что позволяет проводить высокоспецифичную ПЦР с горячим стартом. Добавление факторов удлинения позволяет проводить амплификацию длинных фрагментов с целевыми фрагментами до 13 кб. Этот фермент проявляет 5'→3' ДНК-полимеразную активность и 3'→5' экзонуклеазную активность с точностью в 83 раза выше, чем у Taq ДНК-полимеразы и в 9 раз выше, чем у обычной Pfu ДНК-полимеразы. Он подходит для амплификации сложных шаблонов, производя продукты ПЦР с тупыми концами.
2×Хайфф Кэнэс™ Plus PCR Master Mix (With Dye) предлагает такие преимущества, как простота, высокая чувствительность, сильная специфичность и превосходная стабильность. Реакционная система требует только добавления праймеров и шаблона, а двухэтапный протокол ПЦР может быть использован для упрощения процедуры и экономии времени. Продукт включает в себя краситель для отслеживания электрофореза, позволяющий прямую загрузку продуктов ПЦР для анализа геля. Кроме того, он содержит специальный защитный агент, который обеспечивает стабильную активность даже после повторных циклов замораживания-оттаивания.
Технические характеристики
| Кат.Nо. | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08 / 10154ES60 |
| Размер | 100 мкл / 1 мл / 5×1 мл / 100×1 мл |
Хранилище
Этот продукт следует хранить при температуре от -25 до -15℃. 1 годы.
Инструкции
1. Рекомендуемые системы ПЦР-реакций.
| Компоненты | Объем（мкл） | Финал концентрация |
| 2× Хайфф Канас™ Плюс Мастер-микс ПЦР (с красителем)* | 25 | 1× |
| Шаблон*** | х | - |
| Вперед Пример（10 мкмоль/л）** | 2 | 0.4 мкмоль/л |
| Рнаоборот Пример（10 мкмоль/л）** | 2 | 0,4 мкмоль/л |
| ддх2О | До 50 | - |
*Конечная концентрация смеси 1× содержит 1 ед./50 мкл полимеразы, 2 ммоль/л Mg2+и 200 мкмоль/л dNTPs.
**Рекомендуемая конечная концентрация праймеров в реакции ПЦР составляет 0,2–1 мкмоль/л, предпочтительнее 0,4 мкмоль/л..
***Рекомендуемые количества шаблонов для реакционной системы объемом 25 мкл:
| Тип шаблона | Размер фрагмента (1 кб-10 кб) |
| Геномная ДНК | 50 нг-200 нг |
| Плазмидная или вирусная ДНК | 10 пг-20 нг |
| кДНК | 1-2,5 мкл (не более 1/10 от общего объема ПЦР) |
2. Программа реагирования.
1)Двухэтапный протокол (предпочтительно):
| Цикл шаг | Тэмп. | Время | Циклы |
| Начальная денатурация | 98℃ | 3 мин | 1 |
| Денатурация | 98℃ | 10 сек. | 30-35 |
| Расширение | 68℃ | 30 сек/кб | |
| Ффинал ерасширение | 72℃ | 5 мин | 1 |
2)Трехэтапный протокол (обычный):
| Цикл шаг | Тэмп. | Время | Циклы |
| Начальная денатурация* | 98℃ | 3 мин | 1 |
| Денатурация | 98℃ | 10 сек. | 30-35 |
| Отжиг** | 60℃ | 20 сек | |
| Расширение*** | 72℃ | 30 сек/кб | |
| Ффинал ерасширение | 72℃ | 5 мин | 1 |
*Начальная денатурация: рекомендуется при 98°C в течение 3 мин (5–10 мин для шаблонов с высоким содержанием ГХ).
**Отжиг: рекомендуется при 60°C в течение 20 сек (регулируется в пределах 10-30 сек). Длительный отжиг может привести к размазыванию гелей.
***Расширение: рекомендуется при 72°C в течение 30 сек/кб (до 60 сек/кб для сложных шаблонов).
3)Протокол градиентного отжига (рекомендуется для сложных целей):
| Цикл шаг | Тэмп. | Время | Циклы |
| Начальная денатурация | 98℃ | 3 мин | 1 |
| Денатурация | 98℃ | 10 сек. | 15 (снижение на 1°C за цикл) |
| Градиентный отжиг | 70-55°С | 20 сек | |
| Расширение | 72℃ | 30 сек/кб | |
| Денатурация | 98°С | 10 сек. | 20 |
| Отжиг | 55°С | 20 сек. | |
| Расширение | 72°С | 30 сек/кб | |
| Ффинал ерасширение | 72℃ | 5 мин | 1 |
4)Характеристики различных протоколов ПЦР:
| Тип протокола | Скорость | Специфичность | Выход ПЦР | Скорость обнаружения |
| Два шага | Самый быстрый | Высокий | Середина | Высокий |
| Трехступенчатый | Середина | Середина | Самый высокий | Середина |
| Градиентный отжиг | Медленный | Высокий | Середина | Высокий |
Примечания
1.Данный продукт предназначен только для исследовательских целей.
2. Пожалуйста, работайте в лабораторных халатах и одноразовых перчатках.，для вашей безопасности.
Оплата и безопасность
Ваша платежная информация обрабатывается надежно. Мы не храним данные кредитной карты и не имеем доступа к информации вашей кредитной карты.
Расследование
Вам также может понравиться
Часто задаваемые вопросы
Продукт предназначен только для исследовательских целей и не предназначен для терапевтического или диагностического использования на людях или животных. Продукты и содержимое защищены патентами, товарными знаками и авторскими правами, принадлежащими Yeasen Biotechnology. Символы товарных знаков указывают на страну происхождения, а не обязательно на регистрацию во всех регионах.
Для некоторых приложений могут потребоваться дополнительные права интеллектуальной собственности третьих лиц.
Йесен привержен этической науке, полагая, что наши исследования должны затрагивать важнейшие вопросы, обеспечивая при этом безопасность и соблюдение этических стандартов.