2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (с красителем) — это готовый к использованию 2-кратный предварительно смешанный раствор, содержащий Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase, dNTPs и оптимизированная буферная система, которая содержит предварительно добавленные индикаторы электрофореза. Премикс содержит предварительно добавленный индикатор электрофореза, продукты ПЦР могут быть подвергнуты непосредственному электрофорезу, продукты амплификации представляют собой плоские концы. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) имеет преимущества быстроты и простоты, высокой чувствительности, высокой специфичности, хорошей стабильности и т. д., реакционную систему можно добавлять только с праймерами и матрицами. Кроме того, продукт также содержит специальный защитный агент, так что премикс может сохранять стабильную активность после многократного замораживания и оттаивания.

Сверхвысокая точность: Низкий уровень несоответствия у людей, склонных к мутациям ген с высоким содержанием GC;
Быстрая скорость: Скорость такая же высокая, как 5 сек/кб;
Широкая применимость: Его можно использовать для амплификации генов с содержанием ГЦ 20–80 %, а также он допускает использование 20 % лизатов крови и мышей;
Хорошая устойчивость: Хранить при температуре 37°C в течение 7 дней без снижения производительности;
Простота использования: Просто добавляем праймеры и матрицы для амплификации с синим загрузочным красителем для прямого электрофореза.

Технические характеристики

Цифры

Рисунок: ДНК-полимераза Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity обладает высокой точностью по сравнению с продуктами других брендов (A). Анализ проводился путем изучения частоты мутаций продуктов ПЦР 6 сегментов, богатых GC (около 80%), амплифицированных из геномов разных видов. Продукты ПЦР, амплифицированные ДНК-полимеразой Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity, клонировались в векторы, и 100 выбранных отдельных клонов для каждой последовательности подвергались секвенированию по Сэнгеру.

Высокоточная ДНК-полимераза Hieff Canace™ AdvanceFast отличается высокой скоростью амплификации (B), высокой совместимостью с GC-амплификацией (C) и переносимостью кровью (D). Результаты ПЦР и секвенирования, полученные нашими клиентами, показывают, что ДНК-полимераза Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity демонстрирует хорошие показатели выходов и специфичности ПЦР (EH).

Хранилище

Данный продукт следует хранить при температуре от -25 до -15℃ в течение 1 года.

Инструкции

1. Рекомендуемые системы ПЦР-реакций.

Таблица 1 Система реакции ПЦР

*В 1× премиксах, содержащих 2 мМ Mg2+ и 200 мкМ dNTP.

**Рекомендуемый диапазон 10–200 нг, диапазон загружаемого объема образца кДНК не более 1/10 объема реакционной системы, рекомендуемый диапазон 1–2,5 мкл.

***Конечная концентрация праймера в системе ПЦР-реакции составляет 0,2–1 мкМ, рекомендуемая концентрация — 0,4 мкМ.

1. Программа реагирования.

Таблица 2 Программа реакции ПЦР

*Рекомендуемая температура: 60°C, можно задать температурный градиент, чтобы найти оптимальную температуру для отжига праймера. Рекомендуемое время отжига установлено на 5 секунд и может быть скорректировано от 5 до 30 секунд. Слишком длительное время отжига может привести к диффузным продуктам амплификации на геле.

**Время расширения: рекомендуемое 5 сек/КБ, при необходимости можно увеличить до 10 сек/КБ.

Примечания

1. Данный продукт предназначен только для исследовательских целей.
2. Для вашей безопасности работайте в лабораторных халатах и ​​одноразовых перчатках.

Документы:

10164ES-Вер. 20230720.pdf

Цитаты и ссылки:

[1] Dong W, Zhu Y, Chang H и др. Модуль SHR-SCR определяет судьбу кортикальных клеток бобовых, чтобы обеспечить образование клубеньков. Nature. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z(IF:42.779)

[2] Sun L, Yan Y, Lv H и др. Рапамицин воздействует на STAT3 и c-Myc, подавляя рост опухоли. Cell Chem Biol. 2022;29(3):373-385.e6. doi:10.1016/j.chembiol.2021.10.006(IF:8.116)

[3] Ye M, Xiong L, Dong Y и др. Потенциальная роль гена метиониновой аминопептидазы PxMetAP1 у космополитического вредителя для устойчивости к токсинам Bacillus thuringiensis. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13005. Опубликовано 27 октября 2022 г. doi:10.3390/ijms232113005(IF:6.208)

[4] He Y, Zhou J, Fu R и др. Применение ДНК-HRP-функционализированных зондов AuNP в колориметрическом обнаружении генов Alternaria, ассоциированных с цитрусовыми. Talanta. 2022;237:122917. doi:10.1016/j.talanta.2021.122917(IF:6.057)

[5] Го Л., Ян В., Хуан Ц. и др. Селеноцистеин-специфическая масс-спектрометрия выявляет тканеспецифичные селенопротеомы и селенопротеины-кандидаты. Cell Chem Biol. 2018;25(11):1380-1388.e4. doi:10.1016/j.chembiol.2018.08.006(IF:5.592)

[6] Доу В., Чжу Ц., Чжан М., Цзя З., Гуань В. Скрининг и оценка сильных эндогенных промоторов Pichia Pastoris. Факт о микробной клетке. 2021;20(1):156. Опубликовано 9 августа 2021 г. doi:10.1186/s12934-021-01648-6(ЕСЛИ:5.328)

[7] Xiong Y, Yi Y, Wang Y, Yang N, Rudd CE, Liu H. Ubc9 взаимодействует с адаптером TCR SLP-76 и SUMOylates для транскрипции NFAT в Т-клетках. J Immunol. 2019;203(11):3023-3036. doi:10.4049/jimmunol.1900556(IF:4.718)

[8] Хуан Л., Сян М., Е. П., Чжоу В., Чэнь М. Бета-катенин стимулирует опосредованный макрофагами острый воспалительный ответ после инфаркта миокарда. Immunol Cell Biol. 2018;96(1):100-113. doi:10.1111/imcb.1019(IF:4.557)

[9] Ван X, Ду А, Ю Г, Дэн Z, Хе X. N-метилирование гуанидина BlsL зависит от ацилирования бета-амина аргинина в биосинтезе бластицидина S. Front Microbiol. 2017;8:1565. Опубликовано 22 августа 2017 г. doi:10.3389/fmicb.2017.01565(IF:4.076)

[10] Ю П., Чжоу Л., Ян В. Т. и др. Сравнительный анализ митогенома раскрывает особенности митогенома и филогенетические последствия подсемейства Cobitinae. BMC Genomics. 2021;22(1):50. Опубликовано 14 января 2021 г. doi:10.1186/s12864-020-07360-w(IF:3.969)

[11] Лю Г., Лю И., Ниу Б. и др. Генетическая мутация TRPV2 вызывает тревожность, снижая экспрессию GABA-B R2 в гиппокампе. Biochem Biophys Res Commun. 2022;620:135-142. doi:10.1016/j.bbrc.2022.06.079(IF:3.575)

[12] Тан КС, Чжан И, Лю Л и др. Молекулярное клонирование и характеристика атипичного белка, подобного бутирилхолинэстеразе, у данио-рерио. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2021;255:110590. doi:10.1016/j.cbpb.2021.110590(IF:2.231)