Рибонуклеаза А (РНКаза А) — одноцепочечный полипептид, содержащий 4 дисульфидные связи, с молекулярной массой около 13,7 кДа. РНКаза А — это эндорибонуклеаза, которая специфически расщепляет одноцепочечную РНК по остаткам C и U. В частности, расщепление распознает фосфодиэфирную связь, образованную 5'-рибозой нуклеотида и фосфатной группой на 3'-рибозе соседнего пиримидинового нуклеотида, так что 2', 3'-циклические фосфаты гидролизуются до соответствующих 3'-нуклеозидфосфатов (например, pG-pG-pC-pA-pG расщепляется РНКазой A с образованием pG-pG-pCp и A-PG). РНКаза A наиболее активна в расщеплении одноцепочечной РНК. Рекомендуемая рабочая концентрация составляет 1-100 мкг/мл, что совместимо с различными реакционными системами. Низкая концентрация соли (0-100 мМ NaCl) может использоваться для разрезания одноцепочечной РНК, двухцепочечной РНК и цепей РНК, образованных гибридизацией РНК-ДНК. Однако при высокой концентрации соли (≥ 0,3 М) РНКаза А специфически расщепляет только одноцепочечную РНК.

РНКаза А чаще всего используется для удаления РНК во время подготовки плазмидной ДНК или геномной ДНК. Активность ДНКазы во время процесса подготовки может легко повлиять на реакцию. Традиционный метод кипячения на водяной бане может быть использован для инактивации активности ДНКазы. Этот продукт не содержит ДНКазу и протеазу и не требует термической обработки перед использованием. Кроме того, этот продукт также может использоваться в экспериментах по молекулярной биологии, таких как анализ защиты от РНКазы и анализ последовательности РНК.

Этот продукт поставляется в виде раствора в концентрации 100 мг/мл. Рекомендуемая рабочая концентрация составляет 1-100 мкг/мл в зависимости от типа применения.

Функции

Рибонуклеаза А (РНКаза А) из поджелудочной железы быка

Активность ≥80 Кунитц Е/мг

Нет Остаток ДНКазы

Приложения

РНКазы

Эпитранскриптомный анализ

Извлечение и очистка геномной ДНК

Технические характеристики

Доставка и хранение

Продукт следует хранить при температуре от -25°C до -15℃ в течение 2 лет.

Консервирующий буфер представлял собой 50 мМ Трис-HCl (pH 7,4) и 50% (об./об.) глицерина.

Цифры

Образец 1 не имеет РНКаза А,Образец 2-4 добавили 1 мкл 100 мг/мл РНКаза А. Затем адд 500 нг РНК. После инкубации при комнатной температуре в течение 5 минут добавьте 1 мкл 10X буфера для загрузки РНК. Затем загрузите все образцы на 0,8%-ный агарозный гель с порами для электрофореза при 160 В в течение 10 минут.

Документы:

Паспорт безопасности

10406ES-MSDS-HB240223.PDF

Руководства

10406_Руководство_Версия HB240703_EN.pdf

Цитаты и ссылки:

[1] Чэнь Цюй, Синь М., Ван Л. и др. Ингибирование LDHA для индукции высвобождения eEF2 усиливает тромбоцитопоэз. Кровь. 2022;139(19):2958-2971. doi:10.1182/blood.2022015620(IF:23.629)

[2] Чэнь К., Го Т., Ли С. М. и др. Трансляционная регуляция реакции растений на высокую температуру с помощью двухфункциональной тРНК-His-гуанилилтрансферазы в рисе. Mol Plant. 2019;12(8):1123-1142. doi:10.1016/j.molp.2019.04.012(IF:10.812)