МикроРНК, класс некодирующих РНК длиной около 22 нт, широко распространен и играет очень важную роль в регуляции экспрессии генов у растений и животных. Этот набор использует метод химерной флуоресценции SYBR Green I для количественного обнаружения флуоресценции miRNA. Универсальная основная смесь miRNA 2×Hieff™ qPCR — это новое поколение предварительно приготовленных флуоресцентных количественных реагентов для ПЦР, специально разработанных для количественного обнаружения miRNA. Он содержит специальный пассивный референтный краситель ROX. Подходит для большинства инструментов qPCR, нет необходимости регулировать концентрацию ROX на разных инструментах, просто добавьте праймеры и шаблоны при подготовке реакционной системы, можно амплифицировать. ДНК-полимераза использует химически модифицированную термоактивируемую полимеразу в сочетании со специальной буферной системой, чтобы сделать реакцию более специфичной, более чувствительной и может быть точно количественно определена в более широком диапазоне.
Этот продукт рекомендуется использовать с нашим набором для синтеза первой цепи ДНК miRNA (Tailing) Hifair™ (каталожный номер 11148) для получения оптимальных экспериментальных результатов.

Функции

• На всей платформе: нет необходимости изменять концентрацию ROX при использовании предварительно смешанных цветов
• Высокая чувствительность обнаружения: можно обнаружить 10 пг ДНК.
• Хорошие характеристики усиления: Отличная эффективность усиления
• Высокая специфичность: способность различать различия в отдельных основаниях между miRNA в одном семействе

Приложения

• Экспрессия генов

Технические характеристики

Компоненты

Хранилище

Продукт следует хранить при температуре от -25℃ до -15℃ в течение 1 года.

Цифры

Рисунок 1. Хорошие характеристики усиления: превосходная эффективность усиления.

Гены miR-let-7b-5p, miR-let-7c-5p, miR-let-7e-5p и miR-let-7f-5p были амплифицированы с использованием клеток человека 293T и общей РНК печени мыши в качестве матриц.Результаты показали, что по сравнению с аналогичными продуктами набор для синтеза первой цепи ДНК микроРНК Hifair™ (кат. № 11148ES) соответствует реакционной системе универсальной основной смеси для ПЦР SYBR для микроРНК Hieff™ (кат. № 11171ES) и демонстрирует превосходные результаты.

Рисунок 2. Высокая специфичность: возможность различать различия в отдельных основаниях между miRNA в одном семействе.

Семейство hsa-let-7 человека имеет несколько miRNA, с несколькими основаниями, которые отличаются друг от друга, или даже только с одним отличием основания. Амплифицируйте эти miRNA с различными праймерами и используйте Формулу 2 - Δ CT x 100% рассчитанный коэффициент соответствия. Результаты показали, что близкородственные члены семейства подтипов могут быть эффективно различены.