Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (No Rox) — это предварительное решение для 2×реального времени количественной ПЦР-амплификации, характеризующееся высокой интенсивностью флуоресценции, высокой чувствительностью и специфичностью, а также высоким выходом амплификации. Основной компонент, Hieff UNICON™ Taq DNA Polymerase, запускается методом антител, что может эффективно ингибировать неспецифическую амплификацию, вызванную отжигом праймера во время подготовки образца. В то же время формула добавляет факторы для повышения эффективности амплификации реакции ПЦР и посредников для выравнивания амплификации генов с различным содержанием GC (30~70%), так что количественная ПЦР может получить хорошую линейную зависимость в широком диапазоне количественных областей. Продукт использует смешанную реакцию изменения цвета различных красителей для контроля операции пипетирования, что эффективно снижает возникновение ошибок пипетирования.

Функции

Отслеживание пипетирования: снижение риска пропущенных/дополнительных ошибок

Превосходное усиление: хорошая линейность в широком линейном диапазоне

Высокая точность: позволяет точно различать шаблоны с двукратной разницей в концентрации.

Хорошая повторяемость: небольшая межлуночная вариабельность в повторных лунках, что обеспечивает лучшую повторяемость.

Стабильность и надежность: реакционную систему можно хранить при комнатной температуре в течение 24 часов, а продукт остается неизменным после 20 циклов замораживания-оттаивания.

Приложения

Анализ разницы экспрессии генов

Абсолютный количественный анализ

Технические характеристики

Компоненты

Доставка и хранение

Данный продукт следует хранить при температуре от -25 до -15℃ в течение 1 года.

Цифры

Рисунок 1. Надежные результаты могут быть получены в динамическом диапазоне.

Используя 2 мкл плазмидных шаблонов с градиентом 10^1-10^7, были амплифицированы родственные гены. Hieff UNICON™ Мастер-микс ColorGPS может эффективно определять диапазон значений шаблона в 7 порядков, достигая хорошей линейности в широком линейном диапазоне.

Фигура2. Может точно различать различия в концентрации шаблона в 2 раза.

Используя 2 мкл плазмиды, разведенной в 2-кратном градиенте в качестве матрицы, были амплифицированы соответствующие гены. Hieff UNICON™ Мастер-микс ColorGPS может точно устранить различия в концентрации шаблонов.

Фигура3. Наблюдается небольшая межскважинная изменчивость, что свидетельствует о лучшей повторяемости.

Используя десятки копий плазмиды в качестве шаблона, амплификация была проведена с различными флуоресцентными количественными реагентами в соответствии с процедурами, указанными в соответствующих инструкциях. Значения SD указывают на то, что по сравнению с другими реагентами обратной транскрипции новый продукт имеет меньшие различия между лунками-репликами и лучшую повторяемость.

Фигура4. Более гибкий, подходит для стандартных или быстрых процедур.

В стандартной процедуре время денатурации и время удлинения устанавливаются на 10 секунд и 30 секунд соответственно, в то время как в быстрой процедуре время денатурации и время удлинения устанавливаются на 3 секунды и 10 секунд соответственно, чтобы обнаружить значения Ct, соответствующие 10 целевым генам.Результаты показывают, что значения Ct, полученные с новым продуктом как в стандартных, так и в быстрых процедурах, имеют сильную корреляцию, и новый продукт может давать хорошие результаты при использовании быстрой процедуры.

Фигура5После приготовления реакционной системы она может оставаться стабильной при комнатной температуре в течение 24 часов.

Используя различные гены из мыши, человеческих клеток 293 и Arabidopsis thaliana в качестве мишеней, после подготовки реакционной системы ее помещали в темноту при разных температурах на 24 часа перед обнаружением. По сравнению с немедленной обработкой, разница в обнаружении для разных генов не превышает 0,5 Ct, что указывает на возможность получения стабильных результатов при длительных операциях.

Ддокументы:

Руководства

11188_Руководство_Вер.EN20241218.pdf