Люцифераза светлячка — это белок с молекулярной массой около 61 кДа, который может катализировать окисление люциферина в оксилюциферин в присутствии АТФ, ионов магния и кислорода. Он испускает биолюминесценцию с длиной волны около 560 нм. Люцифераза рениллы — это белок с молекулярной массой около 36 кДа, который может катализировать окисление целентеразина в целентерамид в присутствии кислорода и испускает длину волны 480 нм в процессе окисления. о биолюминесценции. Обе биолюминесценции можно измерить с помощью хемилюминесценции. Принцип обнаружения показан на рисунке 1:

Рисунок 1: Схема анализа люциферазы Firefly и Renilla

Обычно 5'UTR или промотор целевого гена клонируется выше люциферазы светлячка, или 3'UTR клонируется ниже люциферазы светлячка, и эффект регуляции транскрипции промотора или регуляторного элемента обнаруживается путем определения количества люциферазы светлячка. Люцифераза Renilla использовалась в качестве внутреннего контроля для устранения различий в количестве клеток, эффективности трансфекции и т. д. Набор для анализа гена-репортера двойного люциферазы использует люциферин в качестве субстрата для определения активности гена-репортера люциферазы светлячка, а затем использует целентеразин в качестве субстрата для определения люциферина Renilla при тушении реакции флуоресценции. Активность гена-репортера фермента. Набор обладает характеристиками высокой чувствительности.

Функции

Расширенные возможности лизиса: способность полностью лизировать подавляющее большинство типов клеток.

Более сильный сигнал: точное обнаружение слабой экспрессии промотора.

Более высокая чувствительность: обнаруживается до 10–20 пикомолей молекул люциферазы.

Более широкий линейный диапазон: Линейный диапазон обнаружения превышает 8 порядков концентрации фермента.

Приложения

Проверка взаимодействий miRNA с 3'UTR целевого гена

Проверка взаимодействий lncRNA-miRNA

Проверка регуляции факторов транскрипции в промоторной области

Анализ сигнальных путей

Анализ активности SNP

Технические характеристики

Компоненты

Доставка и хранение

Продукты набора для анализа гена-репортера двойного люциферазы следует хранить при температуре -15℃. ~ -25℃ для 1 год.

Цифры

Рисунок1. ЙЕСЕН (Кот#: 11402) имеет интенсивность флуоресценции, сопоставимую с таковой у марки P.

Фигура2. ИИЗЕН (Кот#: 11402) реагенты обнаружения взаимодействуют с люциферазой для достижения оптимальной интенсивности люминесценции. После добавления субстрата люциферазы Renilla биолюминесценция люциферазы светлячка гасится: ее можно по существу полностью погасить.

Документы:

Паспорт безопасности

11402 MSDS HB220209 EN.PDF

Руководства

11402 Руководство HB241230 RU.pdf

Цитаты и ссылки:

[1] Ван Х., Ян Дж., Цай И., Чжао И. Макрофаги подавляют сердечное перепрограммирование фибробластов in vivo посредством опосредованной IFN межклеточной самостимулирующей цепи [опубликованное исправление появилось в Protein Cell. 2024 2 декабря;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]. (ЕСЛИ=21,1)

[2] Чжао Л., Чжу И., Тао Х. и др. Айлантон улучшает течение легочного фиброза, подавляя активацию MEOX1, зависящую от JUN. Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560. doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(ЕСЛИ=14,5)

[3] Wu X, Chen S, Zhang Z и др. Путь вирусной малой интерферирующей РНК-растения-хозяина мРНК модулирует вызванную вирусом устойчивость к засухе путем усиления аутофагии. Plant Cell. 2024;36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158(ЕСЛИ=12,6)

[4] Xuan H, Li Y, Liu Y и др. Домен H1/H5 способствует разделению фаз OsTRBF2 и репрессии генов во время развития риса. Plant Cell. 2024;36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199(ЕСЛИ=12)

[5] Han Y, Hu Q, Gong N и др. Естественная изменчивость MORE GRAINS 1 регулирует количество и вес зерен в рисе. J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674(ЕСЛИ=11,4)

[6] Pan M, Luo M, Liu L и др. EGR1 подавляет рост HCC и аэробный гликолиз путем транскрипционного подавления PFKL. J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35. Опубликовано 29 января 2024 г. doi:10.1186/s13046-024-02957-5(ЕСЛИ=11,3)

[7] Hao X, Wang S, Fu Y и др. Модуль WRKY46-MYC2 играет решающую роль в реакциях, вызванных E-2-гексеналь, на антитравоядных животных, способствуя накоплению флавоноидов. Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(ЕСЛИ=10,5)

[8] Wu J, Li P, Li M и др. Тепловой стресс ухудшает окончание цветочной меристемы и развитие плодов, влияя на каскад BR-SlCRCa в томате. Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(ЕСЛИ=10,5)

[9] Чэнь Л., Ся С., Ван Ф. и др. Абляция NR1D1, вызванная метилированием m6A, нарушает циркадные часы HSC и способствует фиброзу печени. Pharmacol Res. 2023;189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(ЕСЛИ=10,33)

[10] Niu MX, Feng CH, He F и др. Модуль miR6445-NAC029 регулирует устойчивость к засухе, регулируя экспрессию глутатион-S-трансферазы U23 и поглощение активных форм кислорода в Populus. New Phytol. 2024;242(5):2043-2058. doi:10.1111/nph.19703(ЕСЛИ=9,4)

[11]Хуан Т., Ю К., Хуан Д. и др.Положительная обратная связь между PDIA3P1 и OCT4 способствует свойствам стволовых клеток плоскоклеточного рака пищевода. Cell Commun Signal. 2024;22(1):60. Опубликовано 22 января 2024 г. doi:10.1186/s12964-024-01475-3(ЕСЛИ=8,4)

[12]Ван С., Лю И., Хао Х., Чэнь И., Ван З., Шэнь И. Усиление растительных дефензинов в пустынном кустарнике: исследование регуляторного пути AnWRKY29. Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259(ЕСЛИ=8,2)