Описание
Hieff™ Универсальность T4 DNA Ligase — это вариант T4 DNA Ligase. Этот фермент подходит для катализа реакции лигирования между связанными или тупоконечными молекулами. Это одноферментный продукт, предназначенный для соединения фрагментов ДНК и адаптеров в процессе подготовки библиотеки в секвенировании следующего поколения (NGS). Hieff® Универсальность ДНК-лигаза Т4 прошла тщательную проверку с помощью высокопроизводительного секвенирования и демонстрирует исключительное качество.
Особенность
- Высокая точность
- Термотолерантный
Узнайте больше о разработке универсальной ДНК-лигазы Т4
Технические характеристики
| Источник | Рекомбинантная E.coli |
| Буфер хранения | 50 мм Трис-HC1,100 мМ KC1,0,1 мМ ЭДТА, 1 мМ ДТТ, 50% глицерина, pH 7,5士0,2 при 25℃ |
| Определение единицы измерения | В системе реакции лигирования объемом 20 мкл количество фермента, необходимое для катализа лигирования более 50% фрагментов ДНК при реакции 6 мкг λDNA-Hind III при 16°C в течение 30 минут, определяется как 1 единица активности (Е). |
Компоненты
| Компоненты | Имя | 12996ES60 60КУ | 12996ES62 600КУ |
| 12996-А | Hieff® Универсальная ДНК-лигаза Т4 (600 ед/мкл) | 100 мкл | 1000 мкл |
| 12996-Б | 10×T4 ДНК-лигазный буфер | 500 мкл | 3×1500 мкл |
Хранилище
Этот продукт следует хранить при температуре от -25 до -15℃ в течение 2 годы.
Фигура
Оставьте сообщение, чтобы запросить данные сравнения производительности этого фермента с другими термостабильными и обычными ДНК-лигазами Т4 высшего уровня.
Примечания
1. Пожалуйста, работайте в лабораторных халатах и одноразовых перчатках.，для вашей безопасности.
2. Если в буфере выпадает небольшое количество осадка, это нормальное явление. Пожалуйста, переверните и тщательно перемешайте буфер перед использованием.
3. Данный продукт предназначен только для исследовательских целей.
Протокол
1. Текущие наборы для подготовки основной библиотеки ДНК, использующие метод лигирования, обычно не требуют этапов очистки после репарации концов и A-хвоста. Фрагменты ДНК напрямую подвергаются лигированию адаптера без очистки. Этот набор совместим с основной библиотекой коммерчески доступные системы ремонта концов и А-образного хвоста для бесшовного лигирования адаптеров.
Поставьте следующую реакцию в микроцентрифужную пробирку на льду, осторожно перемешайте пипетированием или встряхиванием, быстро центрифугируйте и инактивируйте нагреванием при 20°C в течение 15 минут.
Таблица 1. Реакционная система для лигирования адаптера
| Компонент | Объем（мкл） | Конечная концентрация |
| ДНК с dA-хвостом | 60 | 1× |
| 10×T4 ДНК-лигазный буфер | 10 | 0.1 мкМ-0.5 мкМ |
| 50% ПЭГ6000 | 12* | 1 нг -400 нг |
| ДНК-адаптер | 5** |
|
| 3~5*** |
| |
| Вода без нуклеазы | вверх до 100 | - |
【Примечание】*50% раствор ПЭГ6000 в комплект не входит, его необходимо приготовить самостоятельно.
**Пожалуйста, обратитесь к таблице. 2 для количество адаптера.
***Количество ДНК-лигазы Т4 можно добавлять по мере необходимости по 3–5 мкл.
2. Концентрация адаптера напрямую влияет на эффективность лигирования и выход библиотеки. Чрезмерное использование адаптеров может привести к в больше димеров адаптеров, в то время как низкое использование может повлиять на эффективность соединения и производство библиотеки. Таблица 2 перечислено рекомендуемое количество адаптера для различного количества входной ДНК.
Таблица 2. Рекомендуемое количество адаптера для 100 пг-1 мкг входной ДНК
| Ввод ДНК | Концентрация |
| 0.1 нг | |
| 1 нг | 0,5 мкМ |
| 10 нг | 1 мкМ |
| 25 нг | 2 мкМ |
| 100 нг~1000 нг | 10 мкМ |
【Примечание】：Количество адаптера можно скорректировать в соответствии с требованиями, указанными в таблице выше.
Оплата и безопасность
Ваша платежная информация обрабатывается надежно. Мы не храним данные кредитной карты и не имеем доступа к информации вашей кредитной карты.
Расследование
Вам также может понравиться
Часто задаваемые вопросы
Продукт предназначен только для исследовательских целей и не предназначен для терапевтического или диагностического использования на людях или животных. Продукты и содержимое защищены патентами, товарными знаками и авторскими правами, принадлежащими Yeasen Biotechnology. Символы товарных знаков указывают на страну происхождения, а не обязательно на регистрацию во всех регионах.
Для некоторых приложений могут потребоваться дополнительные права интеллектуальной собственности третьих лиц.
Йесен привержен этической науке, полагая, что наши исследования должны затрагивать важнейшие вопросы, обеспечивая при этом безопасность и соблюдение этических стандартов.